Calcein AM(钙黄绿素 AM) 货号: C4041 规格: 1 mg

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Calcein AM(钙黄绿素 AM)

产品货号: C4041

产品规格: 1 mg

目录价(元):1500

推荐仪器:荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于 DMSO 的灰白色固体
CAS 号:148504-34-1
Ex/Em:494/517 nm (pH =8)
分子式:C46H46N2O23
分子量:995 

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。

产品介绍
Calcein AM 是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,它可以穿透细胞膜进入细胞,被细胞内的酯酶剪切形成 Calcein,从而被滞留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如 BCECF, AM 和 CFDA)相比,Calcein AM 的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和 515 nm。Calcein AM 仅对活细胞染色。可与 PI 联用,用于区别活细胞和死细胞。由于不同细胞系的最佳染色条件不同,我们建议根据实际情况确定 Calcein AM 的最适浓度。

注意事项
1. Calcein AM 的酯键遇到湿气会分解,使用后请在 -20℃ 下密闭冷冻保存,防止水分进入。
2. Calcein AM 储备液稀释后请及时使用,尽量现配现用。
说明书:

Calcein AM(钙黄绿素 AM) 货号:               C4041  规格:               1 mg UE-C4041    
MSDS:

MSDS C4041 Calcein AM
常见问题解答:

细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间

用Calcein,AM标记了细胞,但是第二天成像时,没有来自Calcein的荧光,为什么?

Calcein,AM是细胞追踪和普通细胞质染色的良好选择,然而,它不与任何东西结合,可能会在几个小时内被主动抽出细胞,钙黄绿素在活细胞内的保留取决于细胞类型和培养条件的固有特性
对于长期成像,您可能希望考虑反应性细胞质染色,如CFDA,SE染料

我想在活细胞中加入一种染料,使其在高浓度下自猝灭,但如果细胞死亡,染料将被释放并取消猝灭。有这样的吗?
可以的,这通常是通过钙黄绿素AM或FDA(荧光素二乙酸酯)完成的。这些染料在被酯酶分解之前不会发出荧光。经酯酶修饰后,在非常高的浓度下,它们会自我猝灭。一旦质膜破裂或细胞死亡,染料将被释放到细胞外介质中,并变得不猝灭。必须优化浓度和培养时间,以获得足够的淬火效果

当我用钙黄绿素 AM对细胞进行染色时,细胞经过固定处理后信号就消失了,为什么?
Calcein AM扩散到细胞中,“AM”部分由细胞酯酶裂解,随后染料分子的荧光信号可以在细胞质中被观测到,但其不结合到细胞组分。这意味着它们能够为“整个细胞”染色。这也意味着染料不能通过醛类固定剂进行交联,因此染料会在固定时丢失。此外,质膜的任何干扰(例如去垢剂或胰蛋白酶处理)都会导致染料从细胞中渗漏。

想做一个细胞迁移研究大约4个小时,需要用染料荧光标记细胞,您有什么推荐的吗?
Calcein AM和FDA(荧光素二乙酸盐)是用于该应用的一些染料的实例,由于这些染料不与任何细胞组分结合或共价连接,它们可能具有短的保留时间,因为一些细胞类型可能主动将染料从细胞中流出


使用本产品的文献:

引用文献
1.Methods for the assessment of mitochondrial membrane permeabilization in apoptosis
应用方向:活细胞染色

2.A fluorometric assay for the quantitation of cell adherence to endothelial cells
应用方向:细胞增殖和功能

3.Localization and activity of multidrug resistance protein 1 in the secretory pathway of Leishmania parasites
应用方向:细胞示踪

4.Viability assessment of turkey sperm using fluorescent staining and flow cytometry
应用方向:细胞流式

5.Visualization of keratocytes in the human cornea with fluorescence microscopy
应用方向:组织切片染色

6.An accurate, precise method for general labeling of extracellular vesicles
应用方向:外泌体完整性检测。如果外泌体完整性很好,绿色荧光就可以保留在外泌体中,反之,则会从外泌体中泄漏出来

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