小鼠白细胞介素17A ELISA试剂盒(Mouse IL-17A ELISA KIT) 货号: M6144S/M6144M/M6144L 规格: 24T/48T/96T

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小鼠白细胞介素17A ELISA试剂盒(Mouse IL-17A ELISA KIT)

产品货号: M6144S/M6144M/M6144L

产品规格: 24T/48T/96T

目录价(元):952/1587/2698

推荐仪器:酶标仪

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产品概述:

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格

24T

48T

96T

使用方法

开封后保存条件

A. 标准品

250 pg

250 pg

250 pg

按说明书进行稀释

-20℃可存放一月

B. 标准稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

4可存放一月

C. 浓缩生物素化抗体(100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

D. 生物素化抗体稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

E. 浓缩酶结合物(避光 100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

F. 酶结合物稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

G. 浓缩洗涤液(20×

16 mL

16 mL

25 mL

即用型

H. 显色剂(避光)

6 mL

6 mL

12 mL

即用型

I. 终止液

12 mL

12 mL

12 mL

即用型

4或常温保存

J. 预包被96孔板

8×3

8×6

8×12

即用型

密封干燥4保存

K. 封板胶纸

1

2

4

即用型

:终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。

产品介绍 

Mouse IL-17A ELISA Kit (Mouse Interleukin-17A Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即小鼠白细胞介素17A ELISA试剂盒,可以定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组IL-17A浓度。
白细胞介素17,也被称为细胞毒性T淋巴细胞相关抗原8CTLA-8),是二硫键相连的分子量为34 kDa的糖蛋白,主要由激活的小鼠αβTCR+CD4-CD8-胸腺细胞或人的CD4+记忆性T细胞产生。白细胞介素17家族(Interleukin 17 familyIL-17家族),是与白细胞介素17具有较高同源性、在脊椎动物进化中高度保守的一组蛋白质,目前共有六个成员,IL-17A(原IL-17)、BCDEF。其中,IL-17BCDEF的编码基因,是在人类基因组大规模测序过程中,通过同源性分析、EST序列拼接得到的。
已经检测到IL-17R在几乎所有细胞和组织中均可表达,其中包括NK细胞、巨噬细胞、肥大细胞、B细胞、成纤维细胞、胎肝细胞和肠上皮细胞。
IL-17具有多种生物学效应。在体外,它可以诱导粘附细胞(如成纤维细胞、角质形成细胞、巨噬细胞、上皮细胞和内皮细胞)释放的一些炎症和/或造血细胞因子(包括TNF-αIL-1βIL-6IL-8LIFG-CSFMCP-1IL-17还可以上调人类关节中的软骨细胞产生氧化亚氮诱导ICAM-1在成纤维细胞表面的表达,激活成纤维细胞和软骨细胞中的在体内,IL-17可刺激小鼠血细胞生成和中性粒细胞。根据IL-17在体外和体内的生物学效应可推测:IL-17T细胞依赖的炎症反应的一种重要调节剂。IL-17也可能是一种重要的接免疫系统和造血作用的T细胞衍生介质。
目前研究发现IL-17与机体多种疾病相关特别是肺部感染、哮喘、类风湿性关节炎、器官移植、肠道炎症等炎症性疾病关系密切。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中小鼠IL-17A浓度。在小鼠IL-17A单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品,其中的IL-17A会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗小鼠IL-17A抗体,抗小鼠IL-17A抗体与结合在单抗上的小鼠IL-17A结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有IL-17A,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色;加终止液变为黄色。在450 nm下测OD值,小鼠IL-17A浓度与OD 450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠IL-17A浓度。


说明书:

小鼠白细胞介素17A ELISA试剂盒(Mouse IL-17A ELISA KIT) 货号:               M6144S/M6144M/M6144L  规格:               24T/48T/96T UE-M6144S/M6144M/M6144L    
常见问题解答:

背景信号强是什么原因?
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保孔区域洗涤充分;确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液;增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度,在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液;延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

没有信号?
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验;检查试剂配制方法;复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量;增加抗体用量(浓度)。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

整块板呈现规则蓝色?
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。

标准曲线差?
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。