iBox Explorer 活体小动物荧光显微成像系统UVP凝胶成像分析系统

iBox Explorer 活体小动物荧光显微成像系统UVP凝胶成像分析系统

iBox Explorer 活体小动物荧光显微成像系统UVP凝胶成像分析系统

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:英文
生产厂家:

  • 产品概览
  • 技术参数
  • 订购信息
  • 相关资料
  • 相关产品

主要特征
iBox Explorer使研究人员能够可视化在体内微注射的癌细胞.
可以显微拍摄到活老鼠皮下或体腔内的细胞和组织。
领先的高帧速率制冷型彩色CCD,可以快速检测,采集高通量图像。
简单易用的自动化软件(结合模板功能)重现性好,保持一致的结果获取。
高强度照明,保证样品较强的荧光信号,尽量缩短了曝光时间。
多种选择的滤光片,保证用户在荧光、可见光、近红外光谱范围内捕获到图像。(包括RFP/GFP ,其他可选)
可结合VisionWorks®LS 软件生成精确数据。

◆使用全新制冷型彩色CCD,保证从可见光-近红外都拥有较高的光学捕获能力。
◆电动光学系统可以检测单个细胞到整个器官(检测范围)
◆通过软件界面调节biolite的滤光片切换和控制光强度。
◆通过选择滤光片生成连续激发光谱用于荧光显微观察
◆完全光密闭暗箱提供了最适宜的成像环境
◆独特的视窗设计方便直接、快速的观测样本。
◆通过操纵杆可十分方便的电动调整平台X, Y, Z 位置。

暗箱参数:
滤光片:4位滤光片轮
标配:GFP & RFP
多种滤片可选。
控制:软件全自动控制
平台:精确的X,Y,Z电动位移平台
轨距:  X=100mm, Y=100mm, Z=100mm
步进精度:  X=10µm, Y= 10µm, Z=1µm
控制:软件控制的操纵杆
聚焦:  操纵杆控制

BioLite 多波长光源

——通过连接光纤,将落射光源通入暗箱
BioLite是为BioSpectrum和EC3系统的活体动物、植物研究而设计的,同时可用
于多色荧光Western blots蛋白印迹成像和定量分析.
Biolite多波长光源是一个功率为150瓦的石英卤素光源,通过连接光纤,将落射
光通入暗箱,为活体动植物的发光源以及多色荧光western blots提供了直接的
激发光源.其闭合的光路稳定的控制着光谱的输出,因此提供了更优的信噪比和
重复性良好的测定结果.

BioLite具有6位的机械调光器,可以变化光强度.
设有8位滤光片轮,用户可根据实验需要选配不同发射波长的滤光片应用于不同
荧光染料.
BioLite多波长光源可通过VisionWorksLS多功能软件进行全自动控制.

iBox Scientia 小动物活体成像系统UVP凝胶成像分析系统

iBox Scientia 小动物活体成像系统UVP凝胶成像分析系统

iBox Scientia 小动物活体成像系统UVP凝胶成像分析系统

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:英文
生产厂家:

  • 产品概览
  • 技术参数
  • 订购信息
  • 相关资料
  • 相关产品

主要特征
◆ 多款CCD可供用户选择搭配,适用于所有成像实验对摄像系统的要求
◆ F 1.2  保证大进光量和高成像速度
◆ 自动调焦,软件控制进行焦距、光圈、滤光片和放大缩小等功能调节
◆ 暗箱密闭性非常好,给化学发光成像提供了最佳条件
◆ 凝胶视窗,装有保护玻璃,无需开门便可快速观察样品
◆ USB接口,使数据快捷而简便传输
◆ 当暗箱门打开,安全保险机制自动关闭透射仪,保证无紫外泄露
◆ 样品台可以由软件控制上下调节,寻找最佳拍摄效果,同时可以记录上次拍摄位置
◆ 提供最好的重现性
◆ 根据不同发射波长要求,采取了五位滤片轮设计,由软件控制滤光片的变换 
◆ 可选配外接卤素光源,配置不同的激发光滤光片用于不同荧光成像分析

 

VisionWorksLS图像采集和分析软件
VisionWorks  LS是一套成熟的图像采集及分析软件,其中包含多种工具使拍摄化学发光,荧光,或者比色实验 (染色胶、菌落、斑点和膜)的图像更加简单快捷.

功能包括:
◆ 多种图像拍摄方式一键式图像拍摄、连续拍摄、动态模式拍摄
◆ 图像优化,添加注释
◆ 1D分析、密度分析和菌落计数
◆ 多用户权限设置,保证软件数据安全
◆ 用户可自定义模板与参数设定
◆ 生成报告
◆ 符合FDA 21 CFR Part 11 方式表达
◆ 数据报告可直接生成Excel电子表格 

分析功能的应用:

◆ 1D 电泳凝胶分析                
◆ Dot blot 分析
◆ 活体动物及植物分析          
◆ 菌落计算
◆ 分子量定量                          
◆ GFP 表达分析
◆ 蛋白定量分析                      
◆ PCR 基因表达
◆ PCR 定量                            
◆ TLC 分析
◆ Western blot 密度分析

◆  多功能的暗室,光密性非常好,给化学发光成像提供了最佳条件
◆  变焦镜头 F1.2   12.5-75mm ,通过软件可完全自动控制镜头的光圈,缩放以及聚焦
◆  binning功能:有效整合像素,提高灵敏度
◆  软件控制光源选择,包括顶置反射白光、紫外365nm、蓝光光源460-470nm
◆  软件控制五位滤光轮设计标配三个滤光片
◆  EtBr溴化乙锭   570 – 640nm
◆  SYBR Green      515 – 570nm波长
◆  SYBR Gold       485 – 655nm
◆  标配有超薄自发光白光屏,可折叠且高度可调
◆  屉式紫外透照台,可选配:单波长、双波长、三波长透照台
◆  防紫外观察窗,无须开启暗箱就可以观察到样品情况,更直观,更安全
◆  VisionWorksLS专业图像分析软件,同时可对系统进行全自动控制

BioLite 多波长光源

——通过连接光纤,将落射光源通入暗箱
BioLite是为BioSpectrum和EC3系统的活体动物、植物研究而设计的,同时可用
于多色荧光Western blots蛋白印迹成像和定量分析.
Biolite多波长光源是一个功率为150瓦的石英卤素光源,通过连接光纤,将落射
光通入暗箱,为活体动植物的发光源以及多色荧光western blots提供了直接的
激发光源.其闭合的光路稳定的控制着光谱的输出,因此提供了更优的信噪比和
重复性良好的测定结果.

BioLite具有6位的机械调光器,可以变化光强度.
设有8位滤光片轮,用户可根据实验需要选配不同发射波长的滤光片应用于不同
荧光染料.
BioLite多波长光源可通过VisionWorksLS多功能软件进行全自动控制.

ChemiDoc-It Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

ChemiDoc-It Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

美国UVP ChemiDoc-It Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:美国UVP
生产厂家:美国UVP

  • 产品概览
  • 技术参数
  • 订购信息
  • 相关资料
  • 相关产品

◆   超光密闭的暗箱设计为化学发光和生物发光成像提供了最适和的环境
◆   样品平台配有数字计数器,高度可精确调节高度,方便重现观察情况
◆   防散射样品台 使光散射产生的影响降低到最小
◆   暗箱配有顶置白光光源
◆   具有顶部白光灯
◆   配有VisionWorksTMLS图像采集及分析软件

 

VisionWorksLS图像采集和分析软件
VisionWorks  LS是一套成熟的图像采集及分析软件,其中包含多种工具使拍摄化学发光,荧光,或者比色实验 (染色胶、菌落、斑点和膜)的图像更加简单快捷.

功能包括:

◆  多种图像拍摄方式一键式图像拍摄、连续拍摄、动态模式拍摄
◆  图像优化,添加注释
◆  1D分析、密度分析和菌落计数
◆  多用户权限设置,保证软件数据安全
◆  用户可自定义模板与参数设定
◆  生成报告
◆  符合FDA 21 CFR Part 11 方式表达
◆  数据报告可直接生成Excel电子表格 

分析功能的应用:
◆  1D 电泳凝胶分析            
◆  Dot blot 分析
◆  活体动物及植物分析      
◆  菌落计算
◆  分子量定量                      
◆  GFP 表达分析
◆  蛋白定量分析                   
◆  PCR 基因表达
◆  PCR定量                          
◆  TLC 分析
◆  Western blot 密度分析

◆  光密封设计的暗箱提供了最优的条件
◆  化学发光专用的F0.95 固定镜头,最佳的透光度,可提供最优的信号灵敏度。
◆  大开门设计
◆  binning功能:有效整合像素,提高灵敏度
◆  顶置反射白光
◆  样品台特点,高度连续可调,可多次重现观察情况    
◆  杂交面积最大可达21×26cm  非反射样品台降低了光散射产生的可能性
◆  VisionWorksLS专业图像分析软件

BioDoc- It Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

BioDoc- It Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

BioDoc- It Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:美国UVP
生产厂家:美国UVP

  • 产品概览
  • 技术参数
  • 订购信息
  • 相关资料
  • 相关产品

主要特点
◆  新的高分辨率CCD相机
◆  8英寸LCD触摸显示屏技术,可选取最佳角度观察图像
◆  前置式USB接口用于保存图像
◆  通过网络或FTP传输图像
◆  滑出式托盘方便滤光片的去放更换
◆  均匀的顶置LED白光照明 用于白光或色度样品的成像
◆  系统采用三开门设计,用户可直接在暗箱内进行切胶
◆  紫外透照台,可选配:单波长、双波长、三波长透照台
◆  紫外保护功能,门打开时UV 安全开关自动关闭紫外灯

 

成像面板
◆  预览 – 实时预览
◆  拍照 –  捕捉图像
◆  保存 – 保存所拍的图像TIFF图像,JPG或JPEG文件格式
◆  打印 – 连接打印机 可将图片打印保存
◆  日期 –  所拍摄图片显示日期
◆  曝光警告 –开启曝光过度警告
◆  菜单 – 主机设置及信息

◆  CCD:220 FluorCam
◆  类型:单色
◆  有效像素:130万,1280 × 1024
◆  CCD的位深度:12位  文件位深度:16位
◆  变焦镜头: F1.2, 8-48mm 专业手动变焦镜头
◆  8寸触摸屏  通过触摸屏控制图像预览、拍摄
◆  内置电脑,预装正版Windows XP操作系统
◆  白光光源:顶置LED白光
◆  滤光片:抽屉式设计滤光片槽,标配EtBr滤片 
◆  抽屉式紫外透照台,可选配:单波长、双波长、三波长透照台21×26cm
◆  系统采用三开门设计,无须开门即可切胶,更方便、 更安全。
◆  防紫外观察窗,无须开启暗箱就可以观察到样品情况
◆  数据接口:USB 2.0,配1G USB存储器通过USB或连接网络传输数据。
◆  VisionWorksLS专业图像分析软件

尺寸:
对外与相机:30.7“x 14.2”x 13.3“D类(780 x 361 x338毫米)
暗室内部:13.8“x 11.0”高(35 x 28厘米)

EC3 Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

EC3 Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

EC3 Imaging SystemUVP凝胶成像分析系统

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:美国UVP
生产厂家:UVP

  • 产品概览
  • 技术参数
  • 订购信息
  • 相关资料
  • 相关产品

功能包括:
◆  多种图像拍摄方式一键式图像拍摄、连续拍摄、动态模式拍摄
◆  图像优化,添加注释
◆  1D分析、密度分析和菌落计数
◆  多用户权限设置,保证软件数据安全
◆  用户可自定义模板与参数设定
◆  生成报告
◆  符合FDA 21 CFR Part 11 方式表达
◆  数据报告可直接生成Excel电子表格 

 

分析功能的应用:

◆  1D 电泳凝胶分析              
◆  Dot blot 分析
◆  活体动物及植物分析         
◆  菌落计算
◆  分子量定量                        
◆  GFP 表达分析
◆  蛋白定量分析                    
◆  PCR 基因表达
◆  PCR定量                           
◆  TLC 分析
◆  Western blot 密度分析

◆   多功能的暗室,光密性非常好,给化学发光成像提供了最佳条件
◆   专业手动变焦镜头 F1.2   12.5-75mm
◆   光源选择,包括顶置反射白光、紫外254nm、365nm 顶部光源用于检测不透光样品 如:照片、纸张、杂交膜,扩大了仪器的应用范围
◆   五位滤光轮设计标配四个滤光片
       EtBr溴化乙锭 、SYBR Green 、  SYBR Gold 、考马斯兰       
◆   标配有超薄自发光白光屏,可折叠且高度可调
◆   抽屉式紫外透照台,可选配:单波长、双波长、三波长透照台
◆   紫外安全门设置,开门即自动关闭紫外光源,保护实验人员安全
◆   防紫外观察窗,无须开启暗箱就可以观察到样品情况,更直观,更安全
◆   VisionWorksLS专业图像分析软件

Jobin Yvon DynaMycTM 荧光寿命成像显微镜

Jobin Yvon DynaMycTM 荧光寿命成像显微镜

Jobin Yvon DynaMycTM 荧光寿命成像显微镜

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:中文
生产厂家:Jobin Yvon
需求数量:

  • 产品概览
  • 技术参数
  • 订购信息
  • 相关资料
  • 相关产品

Jobin Yvon DynaMycTM 荧光寿命成像显微镜

DynaMycTM 荧光寿命成像显微镜
 
产品介绍:

 

                       DynaMycTM 荧光寿命成像显微镜

     全自动系统,带有光纤耦合、共焦头单元和单光子计数模块       
     荧光寿命<100ps-10us
     标配测量波长200-680nm,可选250-850nm TBX快速检测器
     可配置PicoBrite高频率激光器,连续–脉冲
     成熟的数据采集和分析软件
     可选用冷冻荧光照相机

Ap3, SHG成像染料 无荧光性新型SHG成像用染料

Ap3, SHG成像染料
无荧光性新型SHG成像用染料

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

无荧光性新型SHG成像用染料Ap3, SHG成像染料                              无荧光性新型SHG成像用染料

Ap3, SHG成像染料

Ap3是一种无荧光性SHG染料,在SHG信号成像中不会发出障碍性荧光。它与常规的荧光性膜染色染料不同,可以只观察细胞膜的信号,因此能够用于分析细胞膜的准确位置。另外,由于SHG信号强度和膜电位相关,因此还能用于膜电位的成像。

  

本产品仅供科研用,不可作其他用途。

本产品基于庆应义塾大学 医学部药理学教室以及筑波大学 数理物质系(学际物质科学研究中心)的研究成果,由funakoshi进行商品化并销售。

※ Nuriya M., et al, Nat. Commun., 7:11557 (2016).

庆应义塾大学医学部 药理学教室 塗谷老师的相关采访文章,请点击此处

使用SHG专用染料对细胞膜现象进行成像

利用双光子现象之二次谐波产生(Second Harmonic Generation: SHG)

在显微镜下测量细胞膜形态和变化

庆应义塾大学 医学部药理学教室 塗谷睦生 老师

【背景】

细胞膜分隔细胞内外,可以作为在其周边产生的电信号和化学信息的传递场所,因此在细胞间和细胞内的信息传递中起着十分重要的作用。但是,由于其结构的精细和复杂性等,难以进行生理学上的分析。研究发现,对细胞膜具有高亲和力的染料在细胞膜中会发出强烈的SHG信号,由于该信号会根据膜电位而变化,因此研究认为,SHG成像在细胞膜的标记及其电位变化的分析等方面非常有效。

 

【无荧光性SHG专用染料Ap3】

Ap3是为了SHG成像而开发和合成的一种新型的无荧光性SHG专用染料,使用这种染料可实现观察其他荧光染料的同时观测。利用这一点,使用Ap3进行SHG成像可以观察到响应神经活动引起的膜电位变化,同时通过钙敏感性染料的荧光成像,还可以观察到膜附近钙浓度的变化。研究表明,使用Ap3进行的成像,由于光照射引起的信号衰减和细胞毒性非常低。因此利用Ap3能够可视化细胞膜,捕捉膜电位的变化,还可能同时对荧光蛋白的动态和报告荧光染料的信号变化进行长时间成像。因而使用Ap3对脑细胞、包括肌细胞在内的其他兴奋性细胞的生理学分析,或使用各种系统的离子通道的功能分析等的应用方面备受期待。

 

【展望】

除上述以外,SHG成像还可以对细胞膜的损伤和脂质成分,以及核酸或蛋白等生物分子的结构变化等多种生命现象进行高灵敏度检测。利用具有这种特殊能力的普通多光子显微镜系统,即可轻松地进行SHG成像,而且通过扩展专用染料的应用性,相信SHG成像作为生命科学领域研究中的新型工具会有更进一步的发展。

◆特点


● Ap3是SHG成像的专用染料。除 SHG信号外,不会发出荧光

 Ap3无荧光性, SHG成像的同时还能进行钙成像等荧光性成像的多模式成像

 Ap3是一种光稳定性高的化合物

 Ap3具有极低的光毒性,对细胞的损伤小

 推荐光源:钛蓝宝石激光(波长标准:950 nm)

 

在SHG成像中,需要双光子激发显微镜、SHG信号用滤光片(例如465-485 nm的带通滤光片)

在SHG成像的观察中,物镜的另一侧(正置显微镜时为下方)需要检测系统。另外,在检测系统一侧建议使用具有光电倍增管(PMT)的显微镜。


操作方法要点

1. 在玻璃底培养皿中培养细胞;

2. 向细胞中添加终浓度为20 μM的Ap3溶液;

3. 使用双光子激发显微镜进行观察。

应用实例1


■ Ap3的SHG信号和无荧光性

Ap3, SHG成像染料                              无荧光性新型SHG成像用染料

950 nm激光照射时,通过Ap3可观察到 SHG 信号,但未观察到荧光信号。



■ 脑切片中SHG成像的膜电位变化

Ap3, SHG成像染料                              无荧光性新型SHG成像用染料

A:电压固定时SHG信号的膜电位敏感性

B:动作电位依赖性SHG信号变化(左)和通过膜片钳测量的电位变化(右)

Nuriya M., et al, Nat. Commun., 7:11557 (2016).

■ 同时测量脑切片中SHG成像的膜电位变化和荧光成像的钙浓度

Ap3, SHG成像染料                              无荧光性新型SHG成像用染料

在脑切片中反复施加动作电位时(左;比例尺20 mV,5 s),观察Ap3的SHG信号和荧光性钙检测试剂Rhod-2的双光子荧光信号(TPF)(右)。在成像中同时测量的膜电位变化和钙浓度变化。

Nuriya M., et al, Nat. Commun., 7:11557 (2016).

◆应用实例2


■ 比较多模式双光子显微镜下的细胞膜选择性SHG成像和细胞膜荧光成像

Ap3, SHG成像染料                              无荧光性新型SHG成像用染料

用Ap3对表达细胞膜观察用膜锚定GFP的细胞进行染色,同时可视化在950 nm飞秒激光照射下GFP的双光子荧光(TPF,绿色)和Ap3的SHG(洋红色)信号。

由于GFP信号不仅从细胞膜,还会从囊泡等许多细胞内的膜结构中发出强烈的荧光,因此难以准确地识别出细胞膜的位置。与之相对的,Ap3的 SHG 信号只能从细胞膜发出,从而可以实现细胞膜的选择性成像和位点的准确识别。

Mizuguchi T., et al, iScience., Nov 30 ; 9 :359~366 (2018).

■ 分析多模式双光子显微镜下细胞膜正下方的囊泡动态和肌动蛋白

Ap3, SHG成像染料                              无荧光性新型SHG成像用染料

在表达GFP标记肌动蛋白的细胞中,分别用红色荧光标记Dextran染色胞吞后的囊泡,用Ap3染色细胞膜,同时利用多模式双光子显微镜进行可视化。

Ap3的SHG信号具有细胞膜特异性,而且可以与荧光信号完全分离,因此能够通过Ap3的SHG信号准确识别细胞膜的位置,从而准确地测量从细胞膜到肌动蛋白骨架的距离。

Mizuguchi T., et al, iScience., Nov 30 ; 9 :359~366 (2018).

■ 分析多模式双光子显微镜下质膜正下方的囊泡动态和微管蛋白

Ap3, SHG成像染料                              无荧光性新型SHG成像用染料

在经过微管蛋白可视化试剂染色的细胞中,分别用红色荧光标记Dextran标记胞吞后的囊泡,用Ap3标记细胞膜,利用多模式双光子显微镜进行可视化。

Ap3的SHG信号具有细胞膜特异性,而且可以与荧光信号完全分离,因此能够通过Ap3的SHG信号准确识别细胞膜的位置,而且可以测量从细胞膜到微管,以及细胞膜正下方囊泡移动的准确距离。

Mizuguchi T., et al, iScience., Nov 30 ; 9 :359~366 (2018).

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
FDV-0008 Ap3, SHG Imaging Dye
Ap3, SHG成像染料
1 mg

LipiDye Ⅱ 高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

LipiDye Ⅱ
高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

LipiDye Ⅱ

LipiDye II 是一款可用于长时间活细胞成像的高灵敏度优质脂滴染料试剂。此外,它还具有脂滴特异性高、毒性低和光稳定性高的优点。适用于以天数为单位的长时间观察、脂滴融合和分解过程的活细胞成像以及使用超高分辨率显微镜的超微小脂滴可视化。

LipiDye II 是LipiDye(#FDV-0010)的改良版试剂,关于LipiDye 的产品信息,请点击此处查看。

 

 本产品基于名古屋大学 变革生命分子研究所 山口茂弘教授、多喜正泰特任准教授的研究结果,由funakoshi株式会社进行商品化并销售

※ 本产品仅供研究用,请勿用于研究以外用途。

 

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

使用LipiDye II染色脂肪细胞和非脂肪细胞的案例

◆关于脂滴(Lipid droplet)和LipiDye

脂滴(Lipid droplet)是在脂肪细胞(Adipocyte)中发现的大型中性脂肪的结块,主要成分是甘油三酯(Triglyceride)和甾醇酯(Sterol Ester)的单分子层结构体(图1)。脂滴被认为是储存细胞内中性脂质的细胞器,并且有较多肥胖和疾病相关的报道。最近,除了脂肪细胞,还在肝细胞、平滑肌细胞、神经胶质细胞等各种细胞中发现了脂滴。这些发现明确了其不仅仅是作为中性脂质的储存场所,还有抑制代谢和调节基因表达等各种功能。对各种细胞中的脂滴进行观察发现,非脂肪细胞的脂滴在1 μm以下,与脂肪细胞中的10~100 μm的脂滴相比较小(图2)。因此,可以利用成像来检测活细胞中非脂肪细胞的微小脂滴的试剂备受期待,但目前Nile Red等现有试剂会观察到脂滴以外的染色试剂(信噪比低),不适用于活细胞成像,观察微小脂滴仅限于电子显微镜观察。

而LipiDye 是一款可以显示高S/N比率的脂滴染色试剂,虽然检测1 μm以下的小脂滴的效果优异,但从光稳定性的观点来看,长时间活细胞成像的效果不佳。而LipiDye II 是名古屋大学 变革生命分子研究所(ITbM)的山口教授、多喜特任准教授为了解决上述问题而研发的新型脂滴检测试剂(参考文献中的名称为LAQ1),光稳定性非常高,毒性低,适合用于长时间稳定的活细胞成像。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

图1:脂滴的模式图及脂肪细胞(adipocyte)中可见的大型脂滴

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

图2:不同细胞类型中脂滴的成像图例

◆特点

● 不仅可以选择性浓缩脂滴,还会响应疏水性环境而发出荧光,因此可以抑制细胞质等的部分发光,对脂滴有着高信噪比(S/N比)

● 可检测非脂肪细胞中的小型脂滴(小于1 μm)

● 光稳定性高,长时间活细胞成像效果优异

● 由于不会褪色,可用于脂滴分解过程中的荧光观察

● 在推荐的使用浓度(0.1~1 μM)中几乎不显示细胞毒性。在已添加试剂的状态下,脂肪细胞分化过程的观察记录最长达8天

● 活细胞、固定细胞都可使用。也适用于活细胞染色后再固定处理的情况

● 也适用于STED超高分辨率显微镜。可观察到约200 nm(半峰全宽)的脂滴

◆关于荧光波长(激发/发射波长)

激发/发射波长:400~500 nm/490~600 nm

 虽然最大吸收为410~420 nm,但也可用450~500 nm范围的光源激发。详情请参考下方的激发/发射光谱数据

 可用800 nm激光进行双光子激发。详情请参考下方利用双光子显微镜观察小胶质细胞

 可进行多重染色,但需要注意波长的选择。请使用激发光在500 nm以上的染料。若使用在450 nm以下的范围内激发的普通蓝色荧光染料,可能

※ 会同时激发本试剂。

■ 光源示例

 激发光

 405 nm、 445 nm、 458 nm、 473 nm、 488 nm
 * 用488   nm激光也可以激发,但与405~473 nm激光相比所获得的荧光强度较弱,建议根据不同的实验目的对观察条件进行验证。

 光源+滤光片

 可利用一般的FITC或GFP滤片。

 STED超高分辨率显微镜

 推荐激发光:473   nm激光,STED光:660 nm激光

◆LipiDye与其他试剂相比的优点

试剂名称

颜色

激发光的波长

活细胞的染色

固定细胞的染色

光稳定性

延时成像

多重染色

S/N比率

LipiDye II

绿色荧光

400~500 nm

非常高

超长时间

可(注意波长的选择)

LipiDye

绿色荧光

400~470 nm

短时间

可(注意波长的选择)

Nile Red

红色荧光

~510 nm

不适合

不适合

荧光染料B

绿色荧光

~480 nm

可 

脂滴染色试剂A

红色绿色荧光

——

不可

未知

不可

Oil Red O

红色染料

——

不可

——

不可

——

◆参考文献

"Fused Thiophene-S,S-dioxide-Based Super-Photostable Fluorescent Marker for Lipid Droplets."

Taki, M., et al., ACS Mater. Lett., 3(1), 42~49 (2021)

◆参考数据

激发/发射光谱

LipiDye II是溶剂环境响应型荧光染料(Solvatochromic dye),会根据周围的分子极性改变荧光波长。吸收光谱几乎不受溶剂的影响,可观察到在380~500 nm的吸收(图A)。

 

● 推荐激发光:405 nm、445 nm、458 nm、473 nm激光

● 可使用的激发光:488 nm激光(由于荧光强度弱,建议根据不同的实验对使用浓度等进行验证。)

 

另外,荧光光谱依赖于溶剂极性,在甲苯和二氯甲烷等疏水性环境下会显示强烈的蓝~绿色荧光,但在乙腈、DMSO和水溶液等高极性环境下,极性越大,最大荧光就会转移至长波长一侧,对荧光强度的抑制就越明显(图B)。根据这个特性,可观察到脂滴在疏水性环境下的特异性绿色荧光。

用LipiDye II对细胞染色,用显微镜光谱扫描脂滴部分,评估脂滴的荧光,约在500 nm附近可观察到最大的荧光光谱(图C)。

 图A~图C的灰色阴影区域为推荐激发/荧光波长。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

光稳定性

用4%多聚甲醛固定处理3T3-L1脂肪细胞,再分别用新产品LipiDye II、旧款产品LipiDye 和传统的荧光染料B染色,之后使用共聚焦激光显微镜反复进行Z-stack成像(激发473 nm/荧光:490~540 nm),观察荧光强度的变化。在Z-stack成像中,每拍摄一次可获取10张2 μm的图像。传统染料B经过约5次的Z-stack成像后衰减明显,而相比之下,旧款产品LipiDye虽然有耐光性,但也观察到了缓慢的衰减,在经过50次的Z-stack成像后荧光衰减至60%左右。

而在本试剂LipiDye II中,即使经过50次(共计500次的光照射),其荧光强度也几乎不发生变化。显示了LipiDye II具有非常高的光稳定性,适用于长时间的延时成像(包括Z-stack成像)。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

细胞毒性

使用不同浓度的LipiDye II 处理 3T3-L1脂肪细胞,然后使用MTT Assay评估24 h后的细胞活性。本试剂的推荐使用浓度为0.1~1 μM,但至少在5 μM内未观察到细胞毒性。在10 μM以上才观察到细胞毒性。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

活细胞和固定细胞染色

用LipiDye II对活细胞状态下的3T3-L1脂肪细胞染色,然后在活细胞中进行荧光观察(左图)。之后,用4%多聚甲醛固定细胞,清洗后在固定状态下再次进行荧光观察(右图)。固定前后几乎未观察到荧光信号的变化。表明了本试剂除了可用于活细胞染色,也可兼容固定细胞的免疫染色。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

LipiDye®染色的活细胞和经PFA固定后的荧光强度的对比

◆应用数据

在各种细胞中的染色

LipiDye II(1 μm)分别染色3T3-L1、HepG2、COS-7、HeLa细胞,在共聚焦激光显微镜下观察绿色荧光(激发473 nm/荧光490~540 nm)(比例尺:20 μm)。在HepG2中,为使脂滴形成,用脂肪酸处理了1天。在HeLa细胞中可清晰地观察到1 μm以下的小脂滴(参考Hela细胞放大图像(右侧),比例尺:5 μm)。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

内质网(ER)标记及其多色成像

用LipiDye II(1 μm)对表达内质网(ER)驻留红色荧光蛋白(ER-mKO1)的COS-7细胞进行染色,使用共聚焦激光显微镜进行荧光观察(LipiDye II:激发473 nm/荧光490~540 nm,ER-mKO1:激发559 nm/荧光570~620 nm)。可以观察到COS-7细胞内部的小脂滴(<1 μm),并且大部分驻留于内质网结构的内侧(参考右侧的放大图,比例尺:1 μm)。该结果表明内质网中存在脂滴的生物合成。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

长时间观察脂肪细胞的分化过程

用LipiDye II在共聚焦激光显微镜下观察活细胞中诱导前脂肪细胞3T3-L1分化为脂肪细胞时,成熟脂滴的状态8天(激发473 nm/荧光490~540 nm)。前2天在含LipiDye II的分化培养基中培养3T3-L1细胞,之后每隔两天更换至含LipiDye II(1 μm)的维持培养基中,荧光观察共计8天。即使用LipiDye II进行长时间的处理,也没有细胞毒性和对脂肪细胞分化产生影响,可以观察到脂滴成熟的过程。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

活细胞成像中新生脂滴的动态行为分析

利用长时间延时成像(Z-stack成像),观察在诱导前脂肪细胞3T3-L1分化为脂肪细胞时新生脂滴的动态行为约24 h(共聚焦激光显微镜:激发473 nm/荧光490~540 nm,每10 min拍摄一次,Z-stack 20张/次)。向预先已经用LipiDye II染色的前脂肪细胞中添加分化培养基(含有LipiDye II),然后立即开始延时成像。分化诱导后约10 h,开始看到小脂滴的出现(650 min,白色箭头),可以观察到各脂滴在相互作用的同时,不断成长的状态(950~1450 min,黄色箭头)。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

观察脂滴分解·新生过程随着时间的变化

向分化诱导的3T3-L1细胞中添加腺苷酸环化酶激活剂Forskolin(10 μM)和磷酸二酯酶抑制剂IBMX(100 nM),观察在使用了LipiDye II的延时成像(Z-stack)中脂滴随着三酰基甘油的分解而缩小的过程(共聚焦激光显微镜:激发473 nm/荧光490~540 nm,800 min,每4 min拍摄一次,Z-stack 15张/次)。从图中可以看到原本的大脂滴(请参见白色箭头)随着时间的推移逐渐变小。另外,可以看到随着时间的推移又产生了许多小脂滴(黄色三角形)。

结果表明,LipiDye II具有非常高的光稳定性,无需担心褪色;并有着高信噪比,可以观察到微小的新生脂滴,因此可以定量观察脂滴的增减。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

利用STED超高分辨率显微镜可视化微小脂滴

用LipiDye II(1 μm)染色Hela细胞,使用激光共聚焦显微镜(Confocal)(激发473 nm/荧光490~540 nm)和STED超高分辨率显微镜(激发473 nm + STED 660 nm/荧光500~640 nm)对微小脂滴进行观察。STED观察图像显示的是经过反卷积处理的数据。从图中可以发现在共聚焦激光显微镜下较为模糊的微小脂滴,在STED显微镜中非常清晰,半峰全宽(FWHM)约为120 nm。

    关于STED显微镜的观察条件及分析方法,请见参考文献。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

利用双光子显微镜观察小胶质细胞

向大鼠原代培养小胶质细胞中添加LipiDye II(1 μm),染色过夜后,用4%PFA固定,然后在双光子显微镜下进行观察。可见LipiDye II使用双光子激发法也可以激发,可以检测原代培养小胶质细胞中尺寸各异的脂滴。

LipiDye Ⅱ                              高灵敏度脂滴长时间成像荧光染料

(数据提供:Dr. Hyun Beom Choi以及 Dr. Brian MacVicar, The University of British Columbia)

第一代产品点击此处查看


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
FDV-0027 LipiDye II ( Live Imaging)
LipiDye II(脂滴活细胞成像试剂)
0.1 mg

BioAct 体内成像工具 In Vivo Imaging Tools

BioAct 体内成像工具
In Vivo Imaging Tools

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

BioAct 体内成像工具BioAct 体内成像工具                              In Vivo Imaging Tools

In Vivo Imaging Tools



活体光学成像是一种通过实时可视化小动物来监测生物信息的方法,可应用于药物开发、癌细胞检测和治疗反应监测等临床前研究阶段。荧光技术无放射性,半衰期长,便于多通道使用,而且其相关设备及仪器构造比放射性设备简单。由于以上这些特点,荧光技术应用于体内成像领域的研究近年已取得了积极的进展。

BioActs 提供的近红外(NIR)荧光染料波长范围为700~900 nm,无因生物物质自发荧光而引起的噪声,并且由于波长较长,可作为活体光学成像中的有效显像剂。

NpFlamma® HGC 系列


NpFlamma®HGC 是基于壳聚糖纳米粒开发的近红外 (NIR) 荧光造影剂。由于 NpFlamma® HGC 系列药剂的主要成分——壳聚糖是生物衍生材料,因此没有毒性问题,具有半衰期长、光稳定性好和可溶于水等优点。

产品名称

产品编号

激发波长/发射波长(nm)

NpFlamma® HGC 648

BCT-PNC1201

648 / 675 nm

NpFlamma® HGC 675

BCT-PNC1401

675 / 698 nm

NpFlamma® HGC 749

BCT-PNC1301

750 / 782 nm

NpFlamma® HGC 774

BCT-PNC1601

777 / 802 nm

NpFlamma® HGC ICG

BCT-PNC1501

785 / 821 nm


BioAct 体内成像工具                              In Vivo Imaging Tools

图:使用 NpFlamma® HGC 染料进行有效肿瘤成像

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
BCT-PNC1201-T010 NpFlamma HGC 648 10 tests
BCT-PNC1201-T050 NpFlamma HGC 648 50 tests
BCT-PNC1201-T250 NpFlamma HGC 648 250 tests
BCT-PNC1401-T010 NpFlamma HGC 675 10 tests
BCT-PNC1401-T050 NpFlamma HGC 675 50 tests
BCT-PNC1401-T250 NpFlamma HGC 675 250 tests
BCT-PNC1301-T010 NpFlamma HGC 749 10 tests
BCT-PNC1301-T050 NpFlamma HGC 749 50 tests
BCT-PNC1301-T250 NpFlamma HGC 749 250 tests
BCT-PNC1601-T010 NpFlamma HGC 774 10 tests
BCT-PNC1601-T050 NpFlamma HGC 774 50 tests
BCT-PNC1601-T250 NpFlamma HGC 774 250 tests
BCT-PNC1501-T010 NpFlamma HGC ICG 10 tests
BCT-PNC1501-T050 NpFlamma HGC ICG 50 tests
BCT-PNC1501-T250 NpFlamma HGC ICG 250 tests

AkaLumine-HCl(TokeOni) 实现生物体内部深处成像

AkaLumine-HCl(TokeOni)
实现生物体内部深处成像

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

实现生物体内部深处成像AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像

AkaLumine-HCl(TokeOni



  AkaLumine-HCl 是一种发光峰值在 670-680 nm处的荧光素类似物。它适用于活体深部的体内成像,因为它的峰值范围在近红外(NIR)窗内,不易受水和血红蛋白吸收峰影响。

  进行成像实验时敬请使用 AkaLumine-HCl。


AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像


数据提供:

东京工业大学 生命理工学院 生命理工学系 生命工程专业 口丸高弘助教·近藤科江教授

电力通信大学研究生院 信息科学与工程 基础科学与工程专业 牧昌次郎助教

 

◆特点


● 近红外发光底物:λmax 675 nm。

● 不易受水和血红蛋白光吸收的影响,非常适合用于活体成像实验。

● 比传统产品 AkaLumine 的溶解度高 50 倍以上。



◆结构及光谱

AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像

图1. AkaLumine-HCL 结构式

AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像

图2. D-luci(D-荧光素)及 AkaLumine-HCl 在含有 LLC/luc 皮下肿瘤的小鼠体内各基质中的发光光谱图



◆实验方案示例


 制备AkaLumine-HCl溶液

 ・在水或生理盐水中溶解

 (例)制备100 mM Akalumine-HCl(用水稀释)。使用时再次稀释3)
 ・请现配现用


 移植了Akaluc(荧光素酶)表达细胞的小鼠肺部生物发光成像 3)

 在PBS中以10,000 cells/mL的密度悬浮Akaluc表达HeLa细胞
●  
●  将100 μL(1,000 cells)的悬浮液注射到小鼠的尾静脉中

 ↓ 10 min后

 麻醉小鼠,给药30 mM AkaLumine-HCl

 

 获取活体发光图像


 Akaluc表达小鼠的神经元响应监测3)
 用腺相关病毒使Akaluc在小鼠纹状体中表达

 
 以小鼠体重750 nmol/g 向小鼠静脉给药AkaLumin-HCl。

 
 获取生物发光图像



◆使用了小鼠的活体成像实验数据

AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像


图3. 在含有 LLC/luc 皮下肿瘤的小鼠腹腔内使用 100 μL 底物 D-luci 及 AkaLumine-HCl,15 分钟后对所得的发光图像及肿瘤发光强度进行定

           分析(n=4,*P<0.05)。对小鼠使用 D-luci 并获得发光图像后4小时,对同一实验对象使用 AkaLumine HCl,得到如图所示的发光

           图像。



◆细胞的体外成像实验数据


AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像


图4. 将各种底物浓度的 D-luci 及 AkaLumine-HCl 添加至表达萤火虫荧光素酶(luc,firefly luciferase)的小鼠鼠肺癌细胞(LLC/luc)内,

           得到的发光图像及发光强度定量分析结果。(n=3,*P<0.05)

使用人工发光成像系统AkaBLI的应用实例


AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像

(A) 小鼠纹状体中的发光信号


使用腺相关病毒(AAV)将人工酶Fluc和Akaluc导入小鼠纹状体。两周以后向小鼠腹腔内给药人工底物D-luciferin(100 mM)和AkaLumine-HCl(30 mM),头部观察的结果显示,使用AkaBLI(AkaLumine-HCl和Akaluc的组合)的小鼠能观测到高度的发光。

(B)自由行动小鼠・狨猴纹状体的发光信号


使用AAV将AkaLuc导入小鼠・狨猴纹状体中。根据以下条件分别给药AkaLumine-HCl,在它们自由行动的情况下进行观察。

小鼠:AkaLumine –HCl(75 nmol/g)通过静脉给药

狨猴:AkaLumine –HCl(75 nmol/g)通过腹腔给药

图5. 左:头部的观察结果;右:相对发光强度

(D-luciferin/Fluc和Akalumin-HCl/Akaluc)条形图

AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像

AkaLumine-HCl(TokeOni)                              实现生物体内部深处成像

Akaluc的表现部位:纹状体(小鼠脑)

Akaluc的表达部位:纹状体(狨猴脑)


图6. 小鼠(左)和狨猴(右)的自由行动观察

数据来源:

国立研究开发法人理化学研究所

脑神经科学研究中心细胞功能探索技术研究小组 岩野智教授、宮脇敦史教授



◆产品列表


产品编号

产品名称

规格

容量

012-26701

AkaLumine盐酸盐
AkaLumine n-Hydrochloride(AkaLumine-HCl)

生化学用

1 mg

018-26703

10 mg

◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

容量

035-22991

腔肠荧光素h
(Coelenterazine h)

生化学用

1 mg

031-22993

10 mg

039-22994

50 mg

035-22996

100 mg

099-06571

异氟醚
(Isoflurane)

生化学用

250 mL

095-06573

1 L

193-17791

七氟醚

生化学用

250 mL

011-25791

马来酸乙烯丙嗪
(Acepromazine Maleate)

药理研究用

10 mg

017-25793

50 mg

015-25331

阿替美唑盐酸盐
(Atipamezole Hydrochloride)

药理研究用

10 mg

011-25333

50 mg

049-33321

盐酸右美托咪定
(Dexmedetomidine Hydrochloride)

药理研究用

1 mg

045-33323

10 mg

021-19001

酒石酸布托啡诺
(Butorphanol Tartrate)

生化学用

50 mg

027-19003

500 mg

135-13791

咪达唑仑

生化学用

500 mg

139-17471

美托咪定盐酸盐
(Medetomidine Hydrochloride)

药理研究用

1 mg

135-17473

10 mg

133-17474

100 mg


欲了解更多应用,请点击此处下载宣传单页

参考文献


1)

Iwano, S. et al.:Tetrahedron,69, 3847(2013).

2)

Kuchimaru, T. , Iwano, S. , Kiyama, M. , Mitsumata, S. , Kadonosono, T. , & Niwa, H. , et al. (2016). A luciferin analogue generating near-infrared bioluminescence achieves highly sensitive deep-tissue imaging. Nature Communications, 7, 11856.


3)

Iwano, S. , Sugiyama, M. , Hama, H. , Watakabe, A. , Hasegawa, N. , & Kuchimaru, T. , et al. (2018). Single-cell bioluminescence imaging of deep tissue in freely moving animals. Science, 359(6378), 935-939.