PEVIVA用于毒理学研究


PEVIVA用于毒理学研究

使用非入侵的M30 Apoptosense® ELISA 评估肝脏毒性

 

  肝脏毒性是新药物研发过程中遇到的主要问题。肝脏与胃肠道关系密切,会代谢口服的药物。将近1000种药物被发现对肝脏有毒性。毒品对肝脏有毒性,也是禁止吸食毒品的常见原因。

  正如本网站其他部份描述的,与肝细胞凋亡相关的肝脏疾病导致血液循环中caspase-cleaved K18水平升高(见肝脏疾病的运用)出乎意料的是,对乙酰氨基酚诱导的肝脏毒性导致组织结合M30单抗的特异性增加。(Kasset al., 2003).

  对乙酰氨基酚处理的小鼠血液中发现caspase催化水解和未催化水解的K18。 (Antoineet al., 2009). 血清K18与肝脏毒性的时间进程有密切关系,比丙氨酸转氨酶的灵敏度更高。这些结果表明血液中的K18是评估肝脏毒理的有力工具。

» Brochure: M30 Apoptosense ELISA and M65 EpiDeath ELISA – Serum Biomarkers for Toxic Liver Injury


更多应用

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PEVIVA用于肿瘤研究


PEVIVA用于肿瘤研究

PEVIVA用于肿瘤研究

  人经常患的肿瘤包括肺癌,乳腺癌,前列腺癌和结肠癌。这些肿瘤细胞起源于上皮细胞,并且表达中间丝蛋白角蛋白18(K18, cytokeratin 18 或者CK18)。细胞发生凋亡时,K18被caspase催化水解成两部分。

  巨噬细胞识别和吞噬凋亡细胞。这点不是在所有肿瘤族中都会发生,caspase-cleaved K18也许会释放到细胞外和血液中。其他类型的细胞,比如淋巴细胞发生细胞凋亡时,不会产生K18水解的片段。Caspase-cleaved K18因此是检测血液样品时,监测肿瘤细胞凋亡的理想生物标记物。

  M30 Apoptosense® ELISA特异性检测凋亡肿瘤细胞释放的caspase-cleaved K18 (ccK18) 。 M30 Apoptosense® ELISA assay与配套使用检测总的K18。检测从死细胞中释放的caspase-cleaved K18 和总的K18的比值确定细胞死亡的模式(细胞凋亡或者细胞坏死) (Kramer et al., 2004), 请注意M30/M65比值).

 

使用K18血清标记物监测肿瘤治疗情况

  大多数临床使用的抗癌药物都会引起细胞凋亡。细胞凋亡也是新型肿瘤药物治疗的理想结果。M30 Apoptosense® ELISAM65® ELISA在肿瘤治疗过程中可用于监测肿瘤细胞。在24~72小时内,有效的肿瘤治疗可以诱导提高血液循环中caspase-cleaved 和/或者总K18 (Kramer et al., 2004Kramer et al., 2006). 这些血清/血浆中K18的升高与临床治疗的效果有关Hägg Olofsson et al., 2007).

PEVIVA用于肿瘤研究

 从动物模型到人


  M30 Apoptosense® ELISAM65® ELISA检测人,而不是小鼠/大鼠。 (Olofssonet al., 2009). 可以检测移植了人肿瘤移植物的小鼠血液,因为其实是检测人肿瘤细胞的K18。

  Peviva生物标记物供了肿瘤药物研发的整体概念。生物标记物可用于检测基于细胞的筛选(使用3-D培养的培养物,具体信息见 M30 CytoDeath™ ELISA), 动物模型和临床研究。

更多应用

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PEVIVA在其他领域的研究


PEVIVA在其他领域的研究

移植和抗宿主疾病

 

  所有同种异体造血细胞移植的受体会患有不同程度的抗宿主疾病(GVHD)。在移植病人术后管理方面,主要的临床问题是从GvHD损伤到不同的宿主组织不能区分GvHD活性(可能经得起免疫抑制治疗)。

  Blood (2007)发表的文章, Luft和他的同事指出血浆caspase-cleaved 角蛋白18 (文章中也被称为角蛋白18片段”CK18F”) 是GvHD引起的内源性上皮细胞凋亡的高灵敏,可定量的生物标志物。来自Peviva的M30 Apoptosense® ELISA检测CK18。

文献

»

T. Luft et al., Serum cytokeratin-18 fragments as   quantitative markers of epithelial apoptosis in liver and intestinal   graft-versus-host disease, Blood 110: 4535-4542, 2007

»

PJ. Martin, Cell biology comes to the bedside, Blood   110: 4135, 2007 (Editorial)


败血症

  败血症的临床综合征包括临床表现紊乱,跟病发的位置,是否存在感染和涉及宿主的临床综合征都有关。
  几种严重败血症(与急性器官功能失调相关的败血症)发病率和败血症休克(与血管相关的败血症)每年估计在300000到750000例。
  Roth et al. (2004) 证明与外科创伤病人还有健康人相比,败血症病人血清中的caspase-cleaved K18含量升高。目前还未确认这个结果的临床意义


文献

»

GA Roth et al., Elevated serum levels of epithelial cell   apoptosis-specific cytokeratin 18 neoepitope M30 in critically ill patients.,   Shock 22: 218–220, 2004

»

Hofer et al., Cell death serum biomarkers are early   predictors for survival in severe septic patients with hepatic dysfunction.   Critical Care 2009, 13:R93.

更多应用

相关资料


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Enzo白藜芦醇在代谢研究中的应用


Enzo白藜芦醇在代谢研究中的应用

Enzo白藜芦醇在代谢研究中的应用

 

 

 

白藜芦醇在代谢中的作用主要是抑制磷酸二酯酶4(PDE4)和激活sirtuin1。

白藜芦醇是一种天然化合物,广泛存在于各种水果和红葡萄酒中。美国国立卫生研究院的Sung-Jun  Park博士及其同事发现在小鼠骨骼肌肉中,抑制PDE4后,白藜芦醇会激活细胞内一系列反应,最终间接活化sirtuin 1 (Sirt1). (Park et  al, (2012) Cell 148(3):421-33).  注入白藜芦醇后可提高cAMP的水平,原因在于可以竞争性地抑制cAMP讲解PDEs。此外在代谢方面,使用白藜芦醇的优势是可以与PDE4的选择性抑制剂rolipram协同作用进行治疗(rolipram是PDE4选择性细胞膜通透性抑制剂),具体表现在预防由于饮食引起的糖尿病,增加线粒体功能、增强身体耐力与耐糖量。新的研究证明PDE4的抑制剂可以用于治疗代谢疾病(如2型糖尿病)、免疫和癌症,也可用于神经退行性疾病、如阿尔茨海默病等。

Enzo Life  Sciences提供大量与PDE4和Sirt1相关的抑制剂、重组蛋白和检测试剂盒等用于代谢与疾病的研究。

 


◆天然化合物


产品编号

产品名称

包装

特点

BML-FR104-0100

Resveratrol
白藜芦醇

100 mg

抗氧化剂, SIRT1 激活剂。

BML-FR104-0500

500 mg

BML-FR119-0010

Triacetyl resveratrol
三乙酰白藜芦醇

10 mg

白藜芦醇的前体药物,在体内通过酚醛羟基的乙酰化可以延长半衰期。

◆PDE IV抑制剂


产品编号

产品名称

包装

特点

BML-PD175-0050

Rolipram
咯利普兰

50 mg

Rolipram的R-型对映结构体对PDE IV的抑制作用更明显 Ki=.06  µM。

BML-PD175-0010

10 mg

BML-PD177-0005

R-(-)-Rolipram
R(-)-咯利普兰

5 mg

Rolipram的R-型对映结构体对PDE IV的抑制作用更明显 Ki=.06  µM。

BML-PD178-0005

S-(+)-Rolipram
S-(+)-咯利普兰

5 mg

Rolipram的S-型对映结构体对PDE IV的抑制作用较弱,效果约为R-Rolipram的十分之一。

BML-EI117-0100

RO-20-1724

100 mg

cAMP特定磷酸二酯酶的选择性细胞渗透抑制剂(PDE IV, IC50=2 µM)。

BML-EI117-1000

1 g

BML-PD130-0005

SQ 20009

5 mg

cAMP特定磷酸二酯酶的选择性细胞渗透抑制剂phosphodiesterase   (PDE IV,  IC50=2 µM)。

BML-PD130-0025

25 mg

BML-PD195-0005

Zardaverine
扎达维林

5 mg

PDE III和PDE IV的选择性抑制剂   (IC50s=2.5 and 1.1 µM)。

BML-PD195-0025

25 mg

◆重组蛋白


产品编号

产品名称

包装

特点

BML-SE523-0020

PDE4D (catalytic domain) (human), (recombinant)
重组人PDE4D(催化结构域)

20 μg

>90% purity by SDS-PAGE 

活性: 3500 nmol/min/mg

BML-SE521-0020

PDE4A (catalytic domain) (human), (recombinant)
PDE5A
催化结构域) (人), (重组)

20 μg

>90% purity by SDS-PAG

活性: 4800 nmol/min/mg 

BML-SE522-0020

PDE4B2 (catalytic domain) (human), (recombinant)
重组人PDE4B2(催化结构域)

20 μg

>90% purity by SDS-PAGE

活性: 10.2 μmol/min/mg.

BML-SE239-0100

SIRT1  (human), (recombinant) (His-tag)
重组人SIRT1(His-标签)

100 U

>50% pure by SDS-PAGE, 高活性

◆检测试剂盒

产品编号

产品名称

包装

特点

BML-AK800-0001

Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase assay kit
环核苷酸磷酸二酯酶检测试剂盒

96 wells

可用于抑制剂的筛选与酶动力学的测定。试剂盒中包含重组酶。

BML-AK555-0001

FLUOR DE LYS SIRT1 fluorometric drug discovery assay kit
Fluor-de-Lys SIRT1药物筛选试剂盒(荧光法)

96 wells

可用于抑制剂的筛选与酶动力学的测定。试剂盒中包含重组酶。

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

Enzo氧化应激研究


Enzo氧化应激研究

Enzo氧化应激研究

氧化应激是体内氧化与抗氧化作用失衡,上海金畔生物科技有限公司公司提供大量试剂(比如抗体、蛋白、spin标记)研究ROS、血红素加氧酶、谷胱甘肽、SOD、氧化脂肪酸和其他氧化应激分子。

 

ROS/RNS detection kit for  microscopy

联合使用三种特异性荧光探针,可同时检测机体多种氧化应激活性成分。采用实时定量法,可简单特异性检测游离NO量、进而检测NOS(一氧化氮合成酶)活性和总ROS(活性氧)水平,特别是活细胞中的超氧阴离子含量。

特点:

l      直接在活细胞中监测活性氧或者活性氮(ROS/RON)。

l       能区别超氧化物,一氧化氮和过氧亚硝基阴离子。

l       高灵敏度,高特异性和高准确性。

l       与不常用的组织培养基(酚红,FBS和BSA)兼容。

l       提供成套的试剂,包括ROS/RNS癿激动剂和拮抗剂。

l       严格生产,淘汰了非特异性产品。

       

右图:使用本试剂盒提供的激动剂和拮抗剂,显示HeLa细胞中过(氧化)亚硝酸盐和NO的生成情况。

实验证明,L-精氨酸和绿脓 菌素结合使用可生成大量的过(氧化)亚硝酸盐(绿色荧光),NO(红色

荧光)生成量极少,原因是NO和超氧化物发生反应。  




产品编号

品 名

包装

价格(RMB)

ENZ-51001-200

ROS/RnS Detection Kit

1 Kit

4,120

 

SPIN   TRAPS & SPIN探针

 

产品编号

品名

规格

价格(RMB)

ALX-430-093-M050

DEMPO

50mg

2,320

ALX-430-141-M010

BMPO(high purity)

10mg

1,720

ALX-430-119-M050

DIPPMO

50mg

2,440

ALX-430-090-M500

DMPO(high purity)

500mg

1,780

ALX-430-098-M010

EMPO

10mg

1,000

 

REDOX

 

产品编号

描述

规格

价格(RMB)

BML-2835-0500

含有80种具有抗氧化和促氧化作用的化合物。

1 Library

500ul/well

23,730

BML-2835-0100

1 Library

100ul/well

11,730

 

 

 

自噬研究用抗体

自噬研究用抗体

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

自噬研究用抗体自噬研究用抗体



◆兔抗大鼠 LC3


  LC3 是芽殖酵母自噬相关蛋白 Atg8 的哺乳类类似物。LC3 在细胞质上合成后,切除C末端形成 LC3-I。LC3-I 与 E1 样泛素连接酶 Atg7、E2 样泛素连接酶 Atg3 携带的磷脂结合形成 LC3-II。LC3-II 结合形成自噬膜型。因此,LC3 被用做自噬的标志物之一。本产品可同时识别 LC3-I、LC3-II。

● 形状:抗血清。不含防腐剂、稳定剂

 抗原:合成肽,与大鼠LC3B的氨基酸序列 5-18 相当

 特异性:与人、大鼠、小鼠 LC3B 反应

  实际稀释倍率:免疫细胞化学 1:200~500(共聚焦显微镜)

  Western blotting 1:500~5,000

 推荐稀释缓冲液:1% BSA in 20 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5), 0.15 mol/L NaCl,0.1% NaN3

   背景较高情况下,请使用加了 0.1% Tween20 的稀释缓冲液。

 

小鼠 MEF 提取液 Western blotting


自噬研究用抗体

用 SDS-PAGE 分离 MEF(小鼠胎儿成纤维细胞)提取液,转至 PVDF 膜后,将本品作为第一抗体,

进行 Western blotting。
Atg7+・・・野生型,Atg7-・・・Atg7 缺失型

一抗:本品(1:5,000)、室温、反应1小时

二抗:HRP 标记 山羊抗兔 IgG(1:20,000),室温、反应1小时

(数据提供:顺天堂大学医学部生化学 第一讲座 上野隆)

HeLa 细胞的荧光染色


自噬研究用抗体

样品:经多聚甲醛固定和毛地黄皂苷处理的 HeLa 细胞

封闭液:1% BSA和含1%正常羊血清的 20 mmol/LTris-HCl(pH7.5),0.15 mol/L NaCl,0.1% NaN3、30℃、反应1小时

一抗:本品(1:500)、30℃、反应1小时
二抗:Cy3 标记羊抗兔 IgG(1:2,000)、30℃、反应1小时
(数据提供:顺天堂大学大学院医学研究科研基地ー吉川美加)

产品编号

产品名称

规格

容量

010-22841

Anti Rat LC3, Rabbit        

免疫组化用

50 μL

 


◆兔抗 SQSTM1/A170/p62


  SQSTM1/A170/p62 是泛素结合蛋白,氧化应激反应依赖性表达。SQSTM1/A170/p62 的异常化,会导致骨代谢异常、肥胖、2型糖尿病等。近来有报道称 SQSTM1/A170/p62 可与自噬相关因子 LC3 结合,因此在诱导泛素/蛋白酶体系到自噬系的蛋白质分解方面备受关注。

 形状:大肠杆菌蛋白质吸收后,2倍稀释的抗血清。防腐剂含 0.1% 的 NaN3

 抗原:小鼠 SQSTM1(A170)的氨基酸序列 254-333 重组体(N末端含 T7tag,C末端含 His tag)

 特异性:与大小鼠 SQSTM1(A170/ZIP)反应;与人 SQSTM1(A170/ZIP)反应极弱。

 实际稀释倍率:Western blotting  1:200;

  免疫组织染色  1:1,000

  免疫荧光染色  1:1,000

 

小鼠 MEF 提取液的 Western blotting


自噬研究用抗体

固定:4%多聚甲醛

包埋:石蜡包埋 

染色:亲和素-生物素- 过氧化物酶素法

一抗:本品 1:1,000

二抗:生物素标记抗兔 IgG 

(数据提供:鸟取大学 中曾一裕)

产品编号

产品名称

规格

容量

018-22141

Anti SQSTM1/A170/p62, Rabbit

SQSTM1/A170/p62抗体

免疫组化用

100 μL



◆兔抗人Atg7


  Atg7 是自噬反应中形成自噬体所必须的基因之一。能与泛素样蛋白质 Atg8 和 Atg12 结合的 E1 样泛素连接酶。

 形状:抗血清。不含防腐剂和稳定剂

 抗原:与人 Atg7 的氨基酸序列 556-571 相当的合成肽

 特异性:与人、大鼠、小鼠的 Atg7 反应

 实际稀释倍率:Western blotting  1:1,000~5,000

 推荐稀释缓冲液:1% BSA in 20mmol/L Tris-HCl(pH 7.5), 0.15mol/L NaCl, 0.1% NaN3
  ※ 背景较高的情况下,请使用加入 0.1% Tween20 的稀释缓冲液。

自噬研究用抗体

用 SDS-PAGE 分离 MEF(小鼠胎儿成纤维细胞)的提取液,转至 PVDF 膜后,以本品为第一抗体,

进行 Western blotting。

Atg7+, Atg3+ ・・・野生型、Atg7- ・・・Atg7 缺失型、 Atg3- ・・・Atg3 缺失型
一抗:本品(1:1,000)、室温、反应1小时
二抗:HRP 标记山羊抗兔 IgG(1:20,000)、室温、反应1小时
(数据提供:顺天堂大学医学部生化学第一讲座 上野隆)


产品编号

产品名称

规格

容量

013-22831

Anti Human Atg7, Rabbit     

免疫组化用

50 μL

 


◆相关产品


自噬活性化因子


产品编号

生产商编号

产品名称

规格/制造商

容量

185-01721

Resveratrol

白藜芦醇

生化学用

100 mg

181-01723

500 mg

 


自噬抑制剂


产品编号 生产商编号 产品名称 规格/制造商 容量

038-17971

Chloroquine diphosphate

磷酸氯喹

生化学用

5 g

036-17972

25 g

054-08021

E 64d

细胞生物学用

1 mg

050-08023

5 mg

129-04861

LY-294002

生化学用

5 g

125-04863

10 g

123-04864

25 g

230-02341

(+)-Wortmannin

渥曼青霉素

细胞生物学用

2 mg

236-02343

10 mg


参考文献

1). Ishii, T., et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 226, 456(1996).

2). Ishii, T., et al.: J. Biol. Chem., 275, 16023(2000).

3). Komatsu, M., et al.: Cell, 131, 1149(2007).

4). Nakaso, K., et al.: Brain Res. Mol. Brain Res., 69, 155(1999).

5). Jiang,P.,et al.: Methods,75,13(2015).

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
010-22841 Anti Rat LC3, Rabbit 50 μL 免疫组化用
018-22141 Anti SQSTM1/A170/p62,   Rabbit 100 μL 免疫组化用
013-22831 Anti Human Atg7,   Rabbit  50 μL 免疫组化用

动物实验用研究试剂

动物实验用研究试剂

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

动物实验用研究试剂动物实验用研究试剂

◆实验研究用麻醉作用试剂


异氟醚以及七氟烷是对中枢神经起到麻痹作用的化合物。请用于实验研究。

注意!本产品是研究用试剂,不是医药品。请勿用作人以及动物的医疗用途。


异氟醚

七氟醚

实物图

动物实验用研究试剂

构造式

动物实验用研究试剂

动物实验用研究试剂

CAS号

26675-46-7

28523-86-6

分子量

C3H2CIF5O=184.49

C4H3F7O=200.05

导入时间

比异氟醚快

苏醒时间

比异氟醚快

组织侵袭(大脑)※1

比七氟醚高

气味

轻微刺激性气味

醚样气味


※1: Liang, G. et al.:Anesthesiology.,112,1325(2010).

欲了解相关产品请看相关资料页面


相关产品

产品编号

产品名称

中文名称

规格

包装

011-25791

Acepromazine Maleate

马来酸乙酰丙嗪

药理研究用

10 mg

017-25793

50 mg

015-25331

Atipamezole Hydrochloride

阿替美唑盐酸盐

药理研究用

10 mg

011-25333

50 mg

049-33321

Dexmedetomidine Hydrochloride

盐酸右美托咪定

药理研究用

1 mg

045-33323

10 mg

027-18741

Butorphanol Tartrate

酒石酸布托诺啡

生化学用

50 mg

023-18743

500 mg

135-13791

Midazolam

咪唑安定

生化学用

500 mg

139-17471

Medetomidine Hydrochloride

盐酸美托咪啶

药理研究用

1 mg

135-17473

10 mg

133-17474

100 mg

240-00941

Xylazine Hydrochloride

盐酸赛拉嗪

生化学用

1 g

246-00943

5 g

◆动物病理模型制备试剂

  

各种病理模型制备试剂。适用于动物实验。

病症

产品编号

产品名称

中文名称

规格

包装

统合失调症

136-16303

Methylazoxymethanol Acetate(MAM)

醋酸甲基偶氮甲酯

细胞生物学

20 mg

帕金森病

136-16381

1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Hydrochloride

1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐

细胞生物学

10 mg

大肠癌

011-20171

Azoxymethane

氧化偶氮甲烷

细胞生物学

100 mg

乳腺癌

042-02801

7,12-Dimethylbenz[a]anthracene

7,12-二甲基苯蒽

和光特级

1 g

肺癌·皮肤癌

147-03421

4-Nitroquinoline 1-Oxide

4-硝基喹啉-N-氧化物

和光特级

1 g

膀胱炎

160-05191

Protamine Sulfate, from Salmon

硫酸鱼精蛋白

1 g

168-05192

25 g

166-05193

5 g

162-05195

500 g

糖尿病

191-15151

Streptozotocin

链脲霉素

细胞生物学

100 mg

197-15153

500 mg

195-15154

1 g

191-15156

5 g

过敏症

012-24241

Aluminium Hydroxide Gel

氢氧化铝凝胶

免疫化学用

5 mL

炎症模型

033-09292

kappa-Carrageenan

κ-角叉菜聚糖

和光一级

25 g

039-09691

λ-Carrageenan

λ-卡拉胶

生化学用

5 g

037-09692

25 g

035-09693

100 g

肝炎

075-02051

D(+)-Galactosamine Hydrochloride

D(-)-氨基半乳糖盐酸盐

生化学用

100 mg

071-02053

1 g

079-02054

5 g

073-02052

25 g

肾小管损伤

117-00341

Kanamycin Sulfate

卡那霉素硫酸盐

生化学用

1 g

113-00343

5 g

115-00342

25 g

111-00344

100 g

肺动脉高压

138-17681

Monocrotaline

野百合碱

细胞生物学

500 mg

134-17683

1 g

肾小球损伤

160-23151

PuromycinDihydrochloride

嘌呤霉素二盐酸盐

生化学用

25 mg

166-23153

100 mg

164-23154

250 mg

自身免疫性疾病

165-27481

Pristane, Synthetic

姥鲛烷,化学合成

生化学用

5 mL

163-27482

25 mL

161-27483

100 mL

167-27485

500 mL



产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
099-06571 异氟醚
Isoflurane
250 mL 生化学用
095-06573 异氟醚
Isoflurane
1 L 生化学用
193-17791 七氟烷
Sevoflurane
250 mL 生化学用

microRNA和piRNA研究


microRNA和piRNA研究

 

AGO蛋白家族

AGO蛋白家族是指与以小分子RNA(small RNA)为介质的遗传基因发现控制机构有关的蛋白质群。基于氨基酸序列的相似性,AGO蛋白家族又分为AGO亚族与PIWI亚族,已发现在生殖细胞、干细胞(ES、iPS等)中有表达。

和光纯药公司推出了众多用于对miRNA和mRNA (存在于细胞和组织中的RISC的组成成分)进行功能分析的工具,这些工具不仅适用于对miRNA的分析,同时也适用于对靶标mRNA的分析。


AGO蛋白家族

AGO亚族

PIWI亚族

AGO1, AGO2, AGO3, AGO4

PIWIL1 / HIWI, PIWIL2 / HILI, PIWIL3,   PIWIL4 / HIWI2

AGO1, AGO2, AGO3, AGO4

PIWIL1 / MIWI, PIWIL2 / MILI, PIWIL4 /   MIWI2

RNA结合蛋白

microRNA、siRNA等

piRNA等

 


       1. microRNA研究
  (1)microRNA纯化试剂盒系列:
  (2)cDNA编码microRNA试剂盒的制备
  (3)抗体

●       2. piRNA研究


【和光产品信息】

1. microRNA研究

microRNA(简称miRNA)是一种长约22个nt(核苷酸)的内源性RNA分子,通过与靶标mRNA的互补配对,可抑制mRNA的裂解和翻译,从而在动植物体内发挥重要的调控作用。据推测,在人体和鼠体内存在上千种miRNA,因此对于miRNA的各种研究(例如对功能不明的新型miRNA的鉴定以及对与特定疾病相关的miRNA功能的说明等)迅速发展成为一大研究领域。近来,血清中存在miRNA这一重大事实的发现,开创了利用miRNA作为生物标志物进行包括癌症在内的疾病治疗的医学未来。一般认为,microRNA发挥作用的方式如下: 先在细胞中经过多个阶段发育成熟,再与蛋白质结合生成蛋白质复合物“RISC”(“RNA诱导沉默复合物”),然后与RISC主要组成部分AGO亚族蛋白结合,最后再与靶标mRNA结合,从而达到降解mRNA链或抑制翻译的目的。

人体中存在4种AGO亚族蛋白(hAgo1~hAgo4),可泛表达基因信息,但表达水平因类型而异。在AGO亚族蛋白中,只有AGO2具备对靶标RNA裂解的切割酶活性,因此是一种十分具表达水平的蛋白质,可在miRNA合成途径中发挥至关重要的作用。由于RISC能够与AGO蛋白抗体发生免疫沉淀,因此可从RISC沉淀物中回收miRNA;而且进一步研究表明,靶标miRNA为共沉淀剂,因此免疫沉淀成法为研究miRNA功能的基本方法。

鉴于上述情况,和光纯药特别推出了众多对miRNA功能进行分析的工具,其中主要为利用抗AGO抗体的miRNA研究工具。通过组合使用上述工具,即可实现对miRNA和mRNA(存在于细胞和组织中的RISC的组成成分)的综合分析— miRNA分析和靶标mRNA分析。


(1) microRNA纯化试剂盒系列:

一种基于利用AGO蛋白抗体的免疫沉淀方法

特点:

  • 1)适用于内源性AGO蛋白的免疫沉淀法

  • 2)miRNA与AGO蛋白结合的纯化性能高

  • 3)其他RNA(如rRNA(核糖体)和RNA的降解片段)的污染度低

  • 4)适用于microRNA的高效克隆以及纯化microRNA成分的微阵列技术(测定基因表达谱的方法和技术)

  • microRNA提取试剂盒,人/鼠AGO1(10次反应;和光Cat.No.:291-70201)

  • microRNA提取试剂盒,人AGO2(10次反应;和光Cat.No.:292-66701)

  • microRNA提取试剂盒,鼠AGO2(10次反应;和光Cat.No.:292-67301)

  • microRNA提取试剂盒,人AGO3(10次反应;和光Cat.No.:297-70301)

2)cDNA编码microRNA试剂盒的制备

和光纯药microRNA克隆试剂盒可以用于制备cDNA编码microRNA,只需在microRNA片段制备后的1.5日之内即可完成克隆过程。该试剂盒中含有从虾中提取的碱性磷酸酶(SAP),能与其中的耐热性单链DNA连接酶(另售)和原改良接头发生连接反应。与传统方法(利用从细菌中提取的碱性磷酸酶和T4 RNA连接酶)相比,克隆效率显著提高。

特点:

  • 1) 耐热性连接酶能够实现接头的准确连接,从而提高克隆效率

  • 2) 适用于microRNA克隆以形成二级结构

  • 3) 操作简单,只需在1.5日之内即可生成cDNA编码microRNA

  • 和光microRNA克隆试剂盒(8次反应;和光Cat.No.:290-66501)
    接头连接高效、准确、简捷

  • 耐热性单链DNA连接酶重组体解决方案(200个单位(和光Cat.No.:298-65103);500个单位(和光Cat.No.:292-65101)

  • 和光靶标mRNA克隆试剂盒(10次反应;和光Cat.No.:298-68001)
    和光纯药生产的靶标mRNA克隆试剂盒用于借助微量mRNA实现cDNA扩增,尤其是利用AGO IP RNA片段实现microRNA靶标mRNA克隆。扩增后的cDNA将成为microRNA的靶标mRNA。    

     

特点:

  • 1)方法简易

  • 2)具备实现微量mRNA扩增的性能

  • 3)cDNA扩增方式不依赖于mRNA的长度

  • 4)适用于microRNA靶标mRNA的研究

  • 和光PCR纯化试剂盒(30次反应(和光Cat.No.:298-67901)
    和光纯药生产的PCR纯化试剂盒,用于在利用RT-PCR或PCR完成DNA合成后的仅10分钟内去除在各种分子生物学试验反应缓冲液中形成的引物、引物二聚体、dNTP(三磷酸脱氧核苷酸)以及诸如DNA聚合酶、限制性内切酶等多种酶。

  • THUNDER Taq Gold DNA聚合酶(不含镁离子的缓冲液)
    (250个单位;和光Cat.No.:317-07081):PCR(聚合酶链式反应)用耐热性DNA聚合酶
    建议采用THUNDER Taq Gold DNA聚合酶(不含镁离子的缓冲液)来抑制非特异性扩增。THUNDER Taq Gold DNA聚合酶用于PCR的热启动,在进入PCR循环前,在95℃的温度下经过10分钟的热处理后被活化。由于利用THUNDER Taq Gold DNA聚合酶(不含镁离子的缓冲液)方式实现扩增后的DNA片段是一种腺嘌呤的3'末端, 因此能够直接插入到T载体中。


(3) 抗体

  • AGO1抗体、单克隆抗体(1F2)
     (50 μL(和光Cat.No.:018-22401))〈用于蛋白质印迹法〉

  • AGO1抗体、单克隆抗体(2A7)
     (50 μL(和光Cat.No.:015-22411))〈用于免疫沉淀法〉

  • 抗人AGO2抗体、单克隆抗体(4G8)
     (50 μL(和光Cat.No.:011-22033);100 μL(和光Cat.No.:015-22031)
     〈用于蛋白质印迹法、免疫沉淀法以及免疫细胞化学染色法〉

  • 抗小鼠AGO2抗体、单克隆抗体(2D4) 
     (50 μL(和光Cat.No.:014-22023);100 μL(和光Cat.No.:018-22021) 
     〈用于蛋白质印迹法、免疫沉淀法以及免疫细胞化学染色法〉

  • 抗人AGO3抗体、单克隆抗体(1C12) 
     (50 μL(和光Cat.No.:018-23241))〈用于免疫沉淀法〉



2. piRNA研究

  • 与Piwi蛋白相作用的RNA称为piRNAs

  • PIWIL1抗体、单克隆抗体(2C12)
    (100 μL (和光Cat.No.:017-23451))〈用于免疫沉淀法〉

特点:

  • 1) 可免疫沉淀内在性PIWIL1蛋白质。(5~10 µg浓度为10%的蛋白G微珠)

  • 2) 可免疫沉淀PIWI1结合piRNA。

  • 3) 可在人、鼠的组织和细胞中使用。

使用例:


(1) 小鼠精巢中内源性PIWIL1的免疫沉淀(IP)-1


microRNA和piRNA研究

Lane 1: NEC14 cells, mouse IgG IP分级 (1/2 vol.)
Lane 2: NEC14 cells, 2C12 IP分级 (1/2 vol.)
Lane 3:小鼠 精巢 IgG IP分级 (1/2 vol.)
Lane 4:小鼠精巢, 2C12 IP分级 (1/2 vol.)

Cell number: 1 x 107 cells
组织(小鼠精巢)重量 25mg
第一抗体(蛋白质印迹)
  Anti PIWIL1 polyclonal antibody 
    (gifted from Dr. Miyagawa, Osaka Univ.) 
    This antibody is not available from Wako. 

(2) 小鼠精巢中内源性PIWIL1的免疫沉淀(IP)-2


microRNA和piRNA研究

Lane M:分子量Marker
Lane 1:小鼠IgG IP分级 (1/2 vol.)
Lane 2: 2C12 IP分级 (1/2 vol.)
组织(小鼠精巢)重量 25mg
第一抗体(蛋白质印迹)
  Anti PIWIL1 polyclonal antibody 
    (gifted from Dr. Miyagawa, Osaka Univ.) 
    This antibody is not available from Wako.




(3) PIWIL1结合piRNA的精制


microRNA和piRNA研究

Lane M:分子量Marker
Lane 1:小鼠IgG IP RNA 分级 (1/2 vol.)
Lane 2: 2C12 IP RNA 分级 (1/2 vol.)

组织(小鼠精巢)重量 25mg 8P)

microRNA(简称miRNA)是一种长约22个nt(核苷酸)的内源性RNA分子,通过与靶标mRNA的互补配对,可抑制mRNA的裂解和翻译,从而在动植物体内发挥重要的调控作用。据推测,在人体和鼠体内存在上千种miRNA,因此对于miRNA的各种研究(例如对功能不明的新型miRNA的鉴定以及对与特定疾病相关的miRNA功能的说明等)迅速发展成为一大研究领域。近来,血清中存在miRNA这一重大事实的发现,开创了利用miRNA作为生物标志物进行包括癌症在内的疾病治疗的医学未来。一般认为,microRNA发挥作用的方式如下: 先在细胞中经过多个阶段发育成熟,再与蛋白质结合生成蛋白质复合物“RISC”(“RNA诱导沉默复合物”),然后与RISC主要组成部分AGO亚族蛋白结合,最后再与靶标mRNA结合,从而达到降解mRNA链或抑制翻译的目的。
人体中存在4种AGO亚族蛋白(hAgo1~hAgo4),可泛表达基因信息,但表达水平因类型而异。在AGO亚族蛋白中,只有AGO2具备对靶标RNA裂解的切割酶活性,因此是一种最具表达水平的蛋白质,可在miRNA合成途径中发挥至关重要的作用。由于RISC能够与AGO蛋白抗体发生免疫沉淀,因此可从RISC沉淀物中回收miRNA;而且进一步研究表明,靶标miRNA为共沉淀剂,因此免疫沉淀成法为研究miRNA功能的基本方法。
鉴于上述情况,和光纯药特别推出了众多对miRNA功能进行分析的工具,其中主要为利用抗AGO抗体的miRNA研究工具。通过组合使用上述工具,即可实现对miRNA和mRNA(存在于细胞和组织中的RISC的组成成分)的综合分析— miRNA分析和靶标mRNA分析。


(1) microRNA纯化试剂盒系列:

一种基于利用AGO蛋白抗体的免疫沉淀方法

特点:

  • 1)适用于内源性AGO蛋白的免疫沉淀法

  • 2)miRNA与AGO蛋白结合的纯化性能高

  • 3)其他RNA(如rRNA(核糖体)和RNA的降解片段)的污染度低

  • 4)适用于microRNA的高效克隆以及纯化microRNA成分的微阵列技术(测定基因表达谱的方法和技术)

  • microRNA提取试剂盒,人/鼠AGO1(10次反应;和光Cat.No.:291-70201)

  • microRNA提取试剂盒,人AGO2(10次反应;和光Cat.No.:292-66701)

  • microRNA提取试剂盒,鼠AGO2(10次反应;和光Cat.No.:292-67301)

  • microRNA提取试剂盒,人AGO3(10次反应;和光Cat.No.:297-70301)

2)cDNA编码microRNA试剂盒的制备

和光纯药microRNA克隆试剂盒可以用于制备cDNA编码microRNA,只需在microRNA片段制备后的1.5日之内即可完成克隆过程。该试剂盒中含有从虾中提取的碱性磷酸酶(SAP),能与其中的耐热性单链DNA连接酶(另售)和原改良接头发生连接反应。与传统方法(利用从细菌中提取的碱性磷酸酶和T4 RNA连接酶)相比,克隆效率显著提高。

特点:

  • 1) 耐热性连接酶能够实现接头的准确连接,从而提高克隆效率

  • 2) 适用于microRNA克隆以形成二级结构

  • 3) 操作简单,只需在1.5日之内即可生成cDNA编码microRNA

  • 和光microRNA克隆试剂盒(8次反应;和光Cat.No.:290-66501)
    接头连接高效、准确、简捷

  • 耐热性单链DNA连接酶重组体解决方案(200个单位(和光Cat.No.:298-65103);500个单位(和光Cat.No.:292-65101)

  • 和光靶标mRNA克隆试剂盒(10次反应;和光Cat.No.:298-68001)
    和光纯药生产的靶标mRNA克隆试剂盒用于借助微量mRNA实现cDNA扩增,尤其是利用AGO IP RNA片段实现microRNA靶标mRNA克隆。扩增后的cDNA将成为microRNA的靶标mRNA。    

     

特点:

  • 1)方法简易

  • 2)具备实现微量mRNA扩增的性能

  • 3)cDNA扩增方式不依赖于mRNA的长度

  • 4)适用于microRNA靶标mRNA的研究

  • 和光PCR纯化试剂盒(30次反应(和光Cat.No.:298-67901)
    和光纯药生产的PCR纯化试剂盒,用于在利用RT-PCR或PCR完成DNA合成后的仅10分钟内去除在各种分子生物学试验反应缓冲液中形成的引物、引物二聚体、dNTP(三磷酸脱氧核苷酸)以及诸如DNA聚合酶、限制性内切酶等多种酶。

  • THUNDER Taq Gold DNA聚合酶(不含镁离子的缓冲液)
    (250个单位;和光Cat.No.:317-07081):PCR(聚合酶链式反应)用耐热性DNA聚合酶
    建议采用THUNDER Taq Gold DNA聚合酶(不含镁离子的缓冲液)来抑制非特异性扩增。THUNDER Taq Gold DNA聚合酶用于PCR的热启动,在进入PCR循环前,在95℃的温度下经过10分钟的热处理后被活化。由于利用THUNDER Taq Gold DNA聚合酶(不含镁离子的缓冲液)方式实现扩增后的DNA片段是一种腺嘌呤的3'末端, 因此能够直接插入到T载体中。


(3) 抗体

  • AGO1抗体、单克隆抗体(1F2)
     (50 μL(和光Cat.No.:018-22401))〈用于蛋白质印迹法〉

  • AGO1抗体、单克隆抗体(2A7)
     (50 μL(和光Cat.No.:015-22411))〈用于免疫沉淀法〉

  • 抗人AGO2抗体、单克隆抗体(4G8)
     (50 μL(和光Cat.No.:011-22033);100 μL(和光Cat.No.:015-22031)
     〈用于蛋白质印迹法、免疫沉淀法以及免疫细胞化学染色法〉

  • 抗小鼠AGO2抗体、单克隆抗体(2D4) 
     (50 μL(和光Cat.No.:014-22023);100 μL(和光Cat.No.:018-22021) 
     〈用于蛋白质印迹法、免疫沉淀法以及免疫细胞化学染色法〉

  • 抗人AGO3抗体、单克隆抗体(1C12) 
     (50 μL(和光Cat.No.:018-23241))〈用于免疫沉淀法〉



2. piRNA研究

  • PIWIL1抗体、单克隆抗体(2C12)
    (100 μL (和光Cat.No.:017-23451))〈用于免疫沉淀法〉

特点:

  • 1) 可免疫沉淀内在性PIWIL1蛋白质。(5~10µg浓度为10%的蛋白G微珠)

  • 2) 可免疫沉淀PIWI1结合piRNA。

  • 3) 可在人、鼠的组织和细胞中使用。

使用例:


(1) 小鼠精巢中内源性PIWIL1的免疫沉淀(IP)-1


microRNA和piRNA研究

Lane 1: NEC14 cells, mouse IgG IP分级 (1/2 vol.)
Lane 2: NEC14 cells, 2C12 IP分级 (1/2 vol.)
Lane 3:小鼠 精巢 IgG IP分级 (1/2 vol.)
Lane 4:小鼠精巢, 2C12 IP分级 (1/2 vol.)

Cell number: 1 x 107 cells
组织(小鼠精巢)重量 25mg
第一抗体(蛋白质印迹)
  Anti PIWIL1 polyclonal antibody 
    (gifted from Dr. Miyagawa, Osaka Univ.) 
    This antibody is not available from Wako. 







(2) 小鼠精巢中内源性PIWIL1的免疫沉淀(IP)-2


microRNA和piRNA研究

Lane M:分子量Marker
Lane 1:小鼠IgG IP分级 (1/2 vol.)
Lane 2: 2C12 IP分级 (1/2 vol.)
组织(小鼠精巢)重量 25mg
第一抗体(蛋白质印迹)
  Anti PIWIL1 polyclonal antibody 
    (gifted from Dr. Miyagawa, Osaka Univ.) 
    This antibody is not available from Wako.




(3) PIWIL1结合piRNA的精制


microRNA和piRNA研究

Lane M:分子量Marker
Lane 1:小鼠IgG IP RNA 分级 (1/2 vol.)
Lane 2: 2C12 IP RNA 分级 (1/2 vol.)
组织(小鼠精巢)重量 25mg









代谢组学研究工具


代谢组学研究工具

代谢组学研究工具

代谢组学研究工具

代谢研究的重点在于更好地理解基础生物学机制,包括代谢的调节及其在肥胖症、糖尿病、心血管疾病和肿瘤等代谢紊乱中的作用机制。虽然代谢涉及一系列复杂的生化反应,但是Enzo Life Sciences 为广大科研人员带来简单新颖的解决方案,助力您的代谢组学研究!

 

◆优点


●  超高活性的葡萄糖调节酶, 例如脂联素

●  Enzo 检测试剂盒,用于脂肪生成的诱导和检测

●  高灵敏度的 ELISA 试剂盒,用于代谢标志物的定量检测

●  独特的Mito-ID 检测试剂盒,用于线粒体毒性的检测

●  其它更多相关产

 


Adipogenesis Assay Kit 可对脂肪细胞的分化进行人工确认。


代谢组学研究工具




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产品名称

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Adipogenesis assay kit

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5 x 24 wells

ALX-522-059-C050

Adiponectin (mouse), (recombinant)

   重组小鼠脂联素

50 μg

ALX-209-250-T020

Annexin V (human), (recombinant) (FITC   conjugate)  

    重组人Annexin V(FITC标记)

20 tests

ALX-209-250-T100

Annexin V (human), (recombinant) (FITC   conjugate)

       Annexin V (人), (重组) (FITC 标记)

100 tests

ALX-209-250-T300

Annexin V (human), (recombinant) (FITC   conjugate)

          Annexin V (人), (重组) (FITC 标记)

300 tests

BML-PI134-0001

TAPI-1

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BML-PI135-0001

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1 mg

ALX-522-008-C050

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ENZ-51044-K100

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细胞自噬研究


细胞自噬研究

细胞自噬研究




自噬是溶酶体介导的胞内降解途径,是真核细胞受到恶劣环境( 比如营养缺乏) 威胁时,引发的降解和细胞内容物再循环的过程。各种细胞质中的成分,包括细胞器、聚集蛋白小体和“长寿”蛋白,被双层膜的自噬小体包裹,随后与溶酶体融合,从而被降解。自噬对细胞内环境稳态和能量平衡非常重要,可调控多种生理刺激,如营养缺乏、缺氧、内质网应激,以及免疫和激素刺激等。越来越多的证据表明自噬功能的失常与多种疾病相关,包括癌症、神经退行性疾病、糖尿病、自身免疫性疾病和心血管疾病。只有对自噬有更深入地研究才能更好发展自噬靶向治疗,为人类造福。

细胞自噬研究

ELISA 法定量检测自噬标记物——NBR1 和p62

 

NBR1 和p62 这两个蛋白的功能类似于支架蛋白,在自噬过程中起着转运和降解蛋白的功能。NBR1 和p62 ELISA 试剂盒可以灵敏地定量检测人、大鼠、小鼠细胞裂解液中自噬标记物NBR1 和p62 的含量。此试剂盒具有如下优点:

●   灵敏度高,可检测低至66 pg/mL 的NBR1 和低至100 pg/mL 的p62。

●   操作简便,可节省您的宝贵时间,减少错误。

   结果比Western Blot 更可靠。

●   适用于高通量筛选。



使用p62 ELISA 试剂盒检测自噬标记物


细胞自噬研究             细胞自噬研究

                                         图A                                                                图B


细胞自噬研究

                              图C


自噬诱导药物处理人乳腺癌细胞。经药物处理6 小时和12 小时后,细胞裂解,使用p62 ELISA 试剂盒定量检测、p62 抗体和LC3-II 抗体进行免疫印迹。经药物处理后,自噬标记物表达水平有变化,p62 蛋白水平降低(A 和B 图),LC3-II 水平上升(C 图)。


产品编号

产品名称

规格

ADI-900-211

NBR1 ELISA Kit

NBR1酶联免疫试剂盒

1×96孔

ADI-900-212

p62 ELISA Kit

P62酶联免疫试剂盒

1×96孔



高灵敏度自噬抗体 & 纯化蛋白


Enzo 提供多种纯化蛋白和抗体( 针对多肽、全蛋白、部分蛋白、修饰多肽和修饰蛋白的单克隆抗体及多克隆抗体)。很多抗体带有酶或荧光标记,大大扩大它们的应用范围,包括WB、FC、IHC、ICC、IF 和IP 等。

产品编号

产品名称

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产品名称

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ADI-900-138

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ADI-900-133

Bcl-2

ADI-900-152

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gsk-3β

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ADI-EKS-715

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ADI-EKS-895

HSP90α

热休克蛋白90α(人)ELISA试剂盒

ADI-900-123A

Phospho gsk-3β

磷酸化糖原合成酶激酶-3βELISA试剂盒

ALX-850-057

p53

AG-45A-0029

SIPR1

AG-45A-0030

SIRT2

ADI-960-070

p53/MDM2

P53/ MDM2复合体酶联免疫检测套装

 



自噬化合物库


SCREEN-WELL®  Autophagy Library 是研究促自噬和抗自噬分子的有力工具。化合物库中包含96 种已知的自噬诱导剂或者抑制剂,可作用于与自噬相关的蛋白或受体,包括:mTOR/PI3K、cAMP、热休克蛋白、钙调蛋白、表观遗传调控蛋白、细胞骨架等。


产品编号

产品名称

规格

BML-2837-0500

Autophagy Library

SCREEN-WELL® 自噬化合物库

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BML-2837-0100

1 Library

100 μL/well

 


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