培养细胞冻存液COS banker系列
可用于iPS细胞的冷冻保存！
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可用于iPS细胞的冷冻保存！
培养细胞冻存液COS banker系列
COS banker是不含血清和牛来源化合物的安全培养细胞冻存液。
COS banker II是为了保存过继免疫淋巴细胞而开发的淋巴细胞冻存液。
◆特点
● 可以冷冻保存iPS细胞。
● 无需稀释使用。
● 复苏后的细胞存活率优异。
● "COS banker"不含动物的血清以及其他动物源成分。＊1
● 为了防止其中的DMSO腐蚀PET容器，特意采用玻璃装瓶。
*1 "COS banker II"含有GMP级人血清白蛋白的稳定剂。
◆实验步骤
1. 以转速1200 rpm/5 min对处于对数期*2的细胞进行离心操作，然后收集大约5×105~1×107个离心后的细胞。
2. 向细胞沉淀中添加1mL本产品，进行重悬后放进冻存管中，在-80°C冷冻保存。
3. 用液氮储存时，细胞请预先在-80°C下冷冻1天以上。
4. 复苏操作请在37°C的恒温水浴锅中快速进行。
*2 冻存的细胞需位于对数期，这点对于提高复苏后的存活率至关重要。
◆规格
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产品名称 |
COS banker |
COS banker II |
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产品编号 |
COS-CFM01 |
COS-CFM02 |
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产品包装 |
120mL |
120mL |
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成分 |
含DMSO（含量不公开） |
含DMSO（含量不公开） |
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储存方法 |
低温避光保存（2~8°C） |
低温避光保存（2~8°C） |
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有效期 |
生产后2年 |
生产后2年 |
◆质量控制
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检查项目 |
测试方法 |
标准 |
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无菌性 |
TGC、SCD以及培养法（日本药典） |
不生长 |
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内毒素 |
动力学比色法（日本药典） |
0.3 EU/ｍL 以下 |
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细胞保存性 |
冷冻7天后重新复苏的细胞生存 |
与对照冻存液相同 |
◆使用例子
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COS banker |
iPS细胞（Dotcom）、 |
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Daudi（人伯基特淋巴瘤）、HeLa S3（人宫颈癌）、 |
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K562（人慢性骨髓性白血病）、Raji（人伯基特淋巴瘤）、 |
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MOLT-4（人急性淋巴细胞白血病 : T- 细胞）、 |
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CTLL-2（小鼠T : IL-2 依赖性）、NIH/3T3（小鼠胎儿）、 |
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PC-12（大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤）、CHO-K1（中国仓鼠卵巢）、 |
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Vero细胞（非洲绿猴肾来源细胞株）、 |
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MDCK细胞（犬肾小管上皮细胞来源的细胞株） |
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MCF-7（人乳癌） 、HepG2（人肝癌）、 |
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P3U1（小鼠骨髓瘤）、成纤维细胞、 |
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表皮角化细胞、血管内皮细胞、杂交瘤、SF9（昆虫细胞） |
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COS banker II |
人末梢血来源活化淋巴细胞、 |
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Daudi细胞、Raji细胞、K652细胞、 |
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Molt-4F细胞、CTLL-2细胞、MCF-7（人乳癌）、 |
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HepG2（人肝癌）、P3U1（小鼠骨髓瘤）、 |
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成纤维细胞、表皮角质形成细胞、血管内皮细胞、 |
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杂交瘤、CHO细胞（中国仓鼠卵巢来源细胞株）、 |
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MDCK细胞（犬肾小管上皮细胞来源的细胞株）、HeLa（人宫颈癌）、SF9（昆虫细胞） |
◆iPS细胞
【冷冻保存程序（缓慢冻结法）】
● 用CTK溶液回收细胞
● 离心（1000 rpm，5分钟），除去上清液
● 添加COS banker，重悬细胞
● 分装到冻存管中
● 将冻存管放入冻存盒中。
● 置于-80℃的超低温冰箱中
● 次日将冻存管移至液氮中
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图1 iPS细胞（Dotcom）的冻存结果
左：复苏后第二天、 右：复苏后第六天
◆人淋巴细胞
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图2 （左图）不同细胞冻存液的细胞存活率比较
添加0.5 mL细胞（活细胞浓度 3×106 cells/mL）至冻存管，并储存在-80°C中。一周/一个月/两个月后复苏（在37°C恒温水槽中孵育90秒，剩余的冷冻细胞摇晃融解），测量存活率。
灰：一周后、 蓝：一个月后、 黑：2个月后
图3（右图）复苏后的细胞增殖情况
复苏冻存了一周的淋巴细胞，将各个培养基的活细胞浓度调至20×104 cells/mL，在水浴锅中培养。对第5天及第6天的活细胞进行计数。
◆产品列表
COS banker
不含血清和牛来源化合物的安全培养细胞冻存液。
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产品编号 |
制造商 |
产品名称 |
包装 |
|
COS-CFM01 |
KOJ |
COS banker [Cell Freezing Medium] (chemical defined) |
120 mL |
COS banker II
为了保存过继免疫淋巴细胞而开发的淋巴细胞冻存液。
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产品编号 |
制造商 |
产品名称 |
包装 |
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COS-CFM02 |
KOJ |
COS banker II [Cell Freezing Medium] |
120 mL |
胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。克隆培养用高糖效果较好，常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。DMEM培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。