标签归档：fitc

FITC(Synonyms: 异硫氰酸荧光素酯 Fluorescein 5-isothiocyanate)

发表于由

FITC;(Synonyms: 异硫氰酸荧光素酯; Fluorescein 5-isothiocyanate) 纯度: 98.77%

FITC (Fluorescein 5-isothiocyanate) 是一种用于胺标记的荧光探针。FITC 是对 pH 和 Cu2+ 敏感的荧光染料。

FITCamp;;(Synonyms: 异硫氰酸荧光素酯; Fluorescein 5-isothiocyanate)

FITC Chemical Structure

CAS No. : 3326-32-7

规格 价格 是否有货 数量
Free Sample (0.1-0.5 mg) ; Apply now ;
10;mM;*;1 mL in DMSO ￥550 In-stock
100 mg ￥500 In-stock
500 mg ￥990 In-stock
1 g ￥1683 In-stock
5 g ; 询价 ;
10 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

FITC 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Bioactive Compound Library Plus

生物活性

FITC (Fluorescein 5-isothiocyanate) is a fluorescence probe for the labeling of amines. FITC is a pH- and Cu2+-sensitive fluorescence dye[1][2].

体外研究
(In Vitro)

Annexin V-FITC/PI is employed to detect chondrocyte apoptosis[1]. The PEI-modified CDs are conjugated with fluorescein isothiocyanate (FITC) to fabricate CDs-FITC composites[2].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
分子量

389.38

Formula

C21H11NO5S
CAS 号

3326-32-7
中文名称

异硫氰酸荧光素酯；荧光素-5-异氰酸酯
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

-20deg;C, protect from light, stored under nitrogen

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)
溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 83.33 mg/mL (214.01 mM; Need ultrasonic)

H2O : < 0.1 mg/mL (insoluble)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.5682 mL 12.8409 mL 25.6819 mL
5 mM 0.5136 mL 2.5682 mL 5.1364 mL
10 mM 0.2568 mL 1.2841 mL 2.5682 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)。-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用； 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH₂O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: 2.08 mg/mL (5.34 mM); Suspended solution; Need ultrasonic

    此方案可获得 2.08 mg/mL (5.34 mM) 的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中，再用生理盐水定容至 10 mL，完全溶解，澄清透明
*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献

  • [1]. Gao SG, et al. Phosphorylation of osteopontin has proapoptotic and proinflammatory effects on human knee osteoarthritis chondrocytes. Exp Ther Med. 2016 Nov;12(5):3488-3494. Epub 2016 Oct 5.

    [2]. Zhu X, et al. Ratiometric, visual, dual-signal fluorescent sensing and imaging of pH/copper ions in real samples based on carbon dots-fluorescein isothiocyanate composites. Talanta. 2017 Jan 1;162:65-71
Cell Assay
[1]

The frequency of chondrocyte apoptosis is measured by flow cytometry with Annexin V-fluorescein isothiocyanate (FITC) and propidium iodide. A total of 1×104 treated chondrocytes are collected from each group, washed in cold PBS and incubated with Annexin V-FITC and PI at room temperature for 15 min in the dark on ice. These samples are then analyzed using a fluorescence-activated cell sorter. Cell Quest software is used to analyze the percentage of apoptosis. All tests are repeated in triplicate.

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
参考文献

  • [1]. Gao SG, et al. Phosphorylation of osteopontin has proapoptotic and proinflammatory effects on human knee osteoarthritis chondrocytes. Exp Ther Med. 2016 Nov;12(5):3488-3494. Epub 2016 Oct 5.

    [2]. Zhu X, et al. Ratiometric, visual, dual-signal fluorescent sensing and imaging of pH/copper ions in real samples based on carbon dots-fluorescein isothiocyanate composites. Talanta. 2017 Jan 1;162:65-71

FITC-Dextran (MW 10000)(Synonyms: 荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 10000))

发表于由

FITC-Dextran (MW 10000);(Synonyms: 荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 10000))

FITC-Dextran (MW 10000) 是由 FITC 偶联葡聚糖形成的一种标记物 (10 kDa)。FITC-Dextran 是由不同长度的支链葡萄糖分子组成的被标记的多糖，可根据所使用的葡聚糖的大小来测定血脑屏障的溶质、离子和蛋白质渗透性。

FITC-Dextran (MW 10000)amp;;(Synonyms: 荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 10000))

FITC-Dextran (MW 10000) Chemical Structure

CAS No. : 60842-46-8

规格 价格 是否有货 数量
5 mg ￥500 In-stock
10 mg ￥850 In-stock
50 mg ￥2500 In-stock
100 mg ; 询价 ;
200 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

FITC-Dextran (MW 10000) 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Bioactive Compound Library Plus

生物活性

FITC-Dextran (MW 10000) is a marker consisting of coupling fluorescein-isothiocyanate to dextran (10 kDa). FITC-Dextran are polysaccharides comprised of varying lengths of branched glucose molecules and can be used to determine solute, ion and protein permeability of the blood-brain barrier (BBB) based on the size of the dextran used[1][2][3].

分子量

10000.00(Average)

CAS 号

60842-46-8
中文名称

荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 10000)
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

4deg;C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)
溶解性数据
In Vitro:;

H2O : 50 mg/mL (Need ultrasonic)
参考文献

  • [1]. Natarajan R, et al. Fluorescein Isothiocyanate (FITC)-Dextran Extravasation as a Measure of Blood-Brain Barrier Permeability. Curr Protoc Neurosci. 2017 Apr 10;79:9.58.1-9.58.15.

    [2]. Hoffmann A, et al. High and Low Molecular Weight Fluorescein Isothiocyanate (FITC)-Dextrans to Assess Blood-Brain Barrier Disruption: Technical Considerations. Transl Stroke Res. 2011 Mar;2(1):106-11.

    [3]. Eriksson I, et al. Analysis of Lysosomal pH by Flow Cytometry Using FITC-Dextran Loaded Cells. Methods Mol Biol. 2017;1594:179-189.

FITC-Dextran (MW 4000)(Synonyms: 荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 4000))

发表于由

FITC-Dextran (MW 4000);(Synonyms: 荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 4000))

FITC-Dextran (MW 4000) 是由 FITC 偶联葡聚糖形成的一种标记物 (4 kDa)。FITC-Dextran 是由不同长度的支链葡萄糖分子组成的被标记的多糖，可根据所使用的葡聚糖的大小来测定血脑屏障的溶质、离子和蛋白质渗透性。

FITC-Dextran (MW 4000)amp;;(Synonyms: 荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 4000))

FITC-Dextran (MW 4000) Chemical Structure

CAS No. : 60842-46-8

规格 价格 是否有货 数量
5 mg ￥700 In-stock
10 mg ￥1100 In-stock
50 mg ; 询价 ;
100 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

FITC-Dextran (MW 4000) 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Bioactive Compound Library Plus

生物活性

FITC-Dextran (MW 4000) is a marker consisting of coupling fluorescein-isothiocyanate to dextran (4 kDa). FITC-Dextran are polysaccharides comprised of varying lengths of branched glucose molecules and can be used to determine solute, ion and protein permeability of the blood-brain barrier (BBB) based on the size of the dextran used[1][2][3].

分子量

4000.00(Average)

CAS 号

60842-46-8
中文名称

荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(MW 4000)
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

4deg;C, protect from light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (protect from light)
溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 16.67 mg/mL (Need ultrasonic)

H2O : 16.67 mg/mL (Need ultrasonic)

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用； 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: 1.67 mg/mL (Infinity mM); Clear solution; Need ultrasonic

    此方案可获得 1.67 mg/mL (Infinity mM) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 16.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH₂O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: 1.67 mg/mL (Infinity mM); Suspended solution; Need ultrasonic

    此方案可获得 1.67 mg/mL (Infinity mM) 的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 16.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中，再用生理盐水定容至 10 mL，完全溶解，澄清透明
  • 3.

    请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 90% corn oil

    Solubility: 1.67 mg/mL (Infinity mM); Clear solution; Need ultrasonic

    此方案可获得 1.67 mg/mL (Infinity mM) 的澄清溶液，此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 16.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献

  • [1]. Natarajan R, et al. Fluorescein Isothiocyanate (FITC)-Dextran Extravasation as a Measure of Blood-Brain Barrier Permeability. Curr Protoc Neurosci. 2017 Apr 10;79:9.58.1-9.58.15.

    [2]. Hoffmann A, et al. High and Low Molecular Weight Fluorescein Isothiocyanate (FITC)-Dextrans to Assess Blood-Brain Barrier Disruption: Technical Considerations. Transl Stroke Res. 2011 Mar;2(1):106-11.

    [3]. Eriksson I, et al. Analysis of Lysosomal pH by Flow Cytometry Using FITC-Dextran Loaded Cells. Methods Mol Biol. 2017;1594:179-189.

荧光染料FITC-C6-DEVD-FMK

发表于由

荧光染料Dye Reagents FITC-C6-DEVD-FMK;

FITC-C6-DEVD-FMK 是一种 Caspase-3 荧光标记抑制剂。可用于检测哺乳动物细胞凋亡中的活性 caspase-3。Z-DEVD-FMK 是一种特异性 caspase-3 抑制剂。

FITC-C6-DEVD-FMK

FITC-C6-DEVD-FMK Chemical Structure

规格 是否有货
100 mg ; 询价 ;
250 mg ; 询价 ;
500 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

生物活性

FITC-C6-DEVD-FMK, a fluorescently labeled caspase-3 inhibitor, can be used for detection of active caspase-3 in mammalian cells undergoing apoptosis. FITC-C6-DEVD-FMK provides a convenient means for sensitive detection of activated caspase-3 in living cells. Z-DEVD-FMK is a specific caspase-3 inhibitor[1].

分子量

994.99

Formula

C46H51FN6O16S
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.
参考文献

  • [1]. Kanthasamy AG, et al. A novel peptide inhibitor targeted to caspase-3 cleavage site of a proapoptotic kinase protein kinase C delta (PKCdelta) protects against dopaminergic neuronal degeneration in Parkinson’s disease models. Free Radic Biol Med. 2006 Nov

荧光染料FITC-C6-LEHD-FMK

发表于由

荧光染料Dye Reagents FITC-C6-LEHD-FMK;

FITC-C6-LEHD-FMK 是一种 caspase-9 荧光标记抑制剂。可用于检测哺乳动物细胞凋亡中的活性 caspase-9。Z-DEVD-FMK 是一种特异性 caspase-9 抑制剂。

FITC-C6-LEHD-FMK

FITC-C6-LEHD-FMK Chemical Structure

规格 是否有货
100 mg ; 询价 ;
250 mg ; 询价 ;
500 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

生物活性

FITC-C6-LEHD-FMK, a fluorescently labeled caspase-9 inhibitor, can be used for detection of active caspase-9 in mammalian cells undergoing apoptosis. FITC-C6-DEVD-FMK provides a convenient means for sensitive detection of activated caspase-9 in living cells. Z-LEHD-FMK is a specific caspase-9 inhibitor[1].

分子量

1031.07

Formula

C49H55FN8O14S
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.
参考文献

  • [1]. Ozoren N, et, al. The caspase 9 inhibitor Z-LEHD-FMK protects human liver cells while permitting death of cancer cells exposed to tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand. Cancer Res. 2000 Nov 15; 60(22): 6259-65.

荧光染料Geldanamycin-FITC

发表于由

荧光染料Dye Reagents Geldanamycin-FITC;

Geldanamycin-FITC 是一种格尔达霉素荧光探针，可用于 HSP90 抑制剂的荧光偏振分析。Geldanamycin-FITC 也可用于细胞表面 HSP90 的检测。

Geldanamycin-FITCamp;;

Geldanamycin-FITC Chemical Structure

规格 是否有货
500 μg 询价

* Please select Quantity before adding items.

生物活性

Geldanamycin-FITC, a Geldanamycin fluorescent probe, can be used in a fluorescence polarization assay for HSP90 inhibitors. Geldanamycin-FITC also can be used for detection of cell surface HSP90[1][2][3].

IC50 Target[1]

HSP90

;

体外研究
(In Vitro)

The HSP90 inhibitor Geldanamycin, when conjugated with FITC (GA–FITC) is cell-membrane impermeable, binding only cell surface HSP90 and inhibiting its functions but having no effect on cytosolic HSP90[3].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
分子量

1034.18

Formula

C55H63N5O13S
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.
参考文献

  • [1]. Kim J, et al. Development of a fluorescence polarization assay for the molecular chaperone Hsp90. J Biomol Screen. 2004;9(5):375‐381.

    [2]. Posfai D, et al. Identification of Hsp90 Inhibitors with Anti-Plasmodium Activity. Antimicrob Agents Chemother. 2018;62(4):e01799-17. Published 2018 Mar 27.

    [3]. Imai T, et al. Heat shock protein 90 (HSP90) contributes to cytosolic translocation of extracellular antigen for cross-presentation by dendritic cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011;108(39):16363‐16368.

荧光染料6-FITC(Synonyms: 6-异硫氰酸荧光素; 6-Fluorescein Isothiocyanate)

发表于由

荧光染料Dye Reagents 6-FITC;(Synonyms: 6-异硫氰酸荧光素; 6-Fluorescein Isothiocyanate)

6-FITC (6-Fluorescein Isothiocyanate) 是荧光素衍生物，广泛应用于流式细胞仪等。

6-FITC(Synonyms: 6-异硫氰酸荧光素; 6-Fluorescein Isothiocyanate)

6-FITC Chemical Structure

CAS No. : 3326-31-6

规格 价格 是否有货
10;mM;*;1 mL in DMSO ￥2046 询问价格 货期
100 mg ￥1860 询问价格 货期
500 mg ￥5580 询问价格 货期

* Please select Quantity before adding items.

6-FITC 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Bioactive Compound Library Plus
  • Anti-Cancer Compound Library

生物活性

6-FITC (6-Fluorescein Isothiocyanate) is a derivative of fluorescein used in wide-ranging applications including flow cytometry.

分子量

389.38

Formula

C21H11NO5S
CAS 号

3326-31-6
中文名称

6-异硫氰酸荧光素；6-异硫氰酸荧光素酯
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

-20deg;C, protect from light, stored under nitrogen

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)
溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : ≥ 35 mg/mL (89.89 mM)

* “≥” means soluble, but saturation unknown.

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.5682 mL 12.8409 mL 25.6819 mL
5 mM 0.5136 mL 2.5682 mL 5.1364 mL
10 mM 0.2568 mL 1.2841 mL 2.5682 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)。-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。

5(6)-FITC(Synonyms: Fluorescein 5(6)-isothiocyanate Fluorescein isothiocyanate 5- and 6- isomers)

发表于由

5(6)-FITC;(Synonyms: Fluorescein 5(6)-isothiocyanate; Fluorescein isothiocyanate 5- and 6- isomers) 纯度: 98.31%

5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) 是一种胺活性衍生物的荧光染料，具有广泛的应用，作为抗体和其他探针标记，用荧光显微镜，流式细胞仪、免疫荧光方法如 ELISA 和 Western 印迹实验。

5(6)-FITCamp;;(Synonyms: Fluorescein 5(6)-isothiocyanate; Fluorescein isothiocyanate 5- and 6- isomers)

5(6)-FITC Chemical Structure

CAS No. : 27072-45-3

规格 价格 是否有货 数量
Free Sample (0.1-0.5 mg) ; Apply now ;
10;mM;*;1 mL in DMSO ￥616 In-stock
100 mg ￥560 In-stock
500 mg ￥2200 In-stock
1 g ; 询价 ;
5 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

5(6)-FITC 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Bioactive Compound Library Plus

生物活性

5(6)-FITC (Fluorescein 5(6)-isothiocyanate) is an amine-reactive derivative of fluorescein dye that has wide-ranging applications as a label for antibodies and other probes, for use in fluorescence microscopy, flow cytometry and immunofluorescence-based assays such as Western blotting and ELISA.

分子量

389.38

Formula

C42H22N2O10S2
CAS 号

27072-45-3
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

4deg;C, protect from light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (protect from light)
溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : ≥ 156 mg/mL (400.64 mM)

* “≥” means soluble, but saturation unknown.

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.5682 mL 12.8409 mL 25.6819 mL
5 mM 0.5136 mL 2.5682 mL 5.1364 mL
10 mM 0.2568 mL 1.2841 mL 2.5682 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用； 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂：;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH₂O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液

*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献

  • [1]. Goding JW. Conjugation of antibodies with fluorochromes: modifications to the standard methods. J Immunol Methods. 1976;13(3-4):215-26.

    [2]. Der-Balian GP, et al. Fluorescein labeling of Fab’ while preserving single thiol. Anal Biochem. 1988 Aug 15;173(1):59-63.

    [3]. Smith LM, et al. Fluorescence detection in automated DNA sequence analysis. Nature. 1986 Jun 12-18;321(6071):674-9.

KPL荧光标记二抗种类繁多，如何选择？

发表于由

一般来讲，偶联到二抗上的探针主要有酶（辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），荧光基团（FITC, RRX, TR, PE, Rhodamine）和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验，对于Western Blot和ELISA，最常用的二抗是酶标二抗；而细胞或组织标记实验（细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术）中通常使用荧光标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号，可以使Biotin/Avidin检测系统。其中荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多，目前常用于荧光标记二抗的主要有以下几种：

  • 异硫氰酸荧光素-Fluorescein Isothiocyanate (FITC)

FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4，较大吸收光波长为490～495nm，较大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用最广泛的荧光素。由于FITC是小分子化合物，每一个抗体可标记几个FITC分子，IgM通常用小分子的荧光素标记，如FITC、Cy3/5、Texas Red等。FITC荧光二抗主要优点是人眼对黄绿色较为敏感，通常切片标本中的绿色荧光少于红色。然而FITC的缺点是淬灭快，因此要和抗淬灭剂一起使用。

  • 四甲基异硫氰酸罗丹明-Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC)，Rhodamine Red-X(RRX), Texas Red(TR)

这些罗丹明的衍生物耦联基团具有不同的吸收波长 (550, 570, 596nm)和较大发射波长（570, 590, 620nm）。在使用装有氪氩灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记的实验时，RRX尤其有用，可以和Cy2(或者FITC)和Cy5一起使用，因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间，而且和这两者覆盖都很少，氪氩灯激发光为488nm，598nm和647nm，分别是Cy2(FITC), RRX和Cy5的理想激发波长。因为FITC和PE可以被氩灯的488nm波长激发, 在流式细胞仪中用FITC作双标，另一种用藻红蛋白（PE）耦联基团要比罗丹明好。TRITC为罗丹明的衍生物，呈紫红色粉末，较稳定，较大吸收光波长为 550nm，较大发射光波长为620nm，呈现橙红色荧光，与FITC的绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。因TRITC荧光淬灭慢，也可用于单独标记染色。

  • 菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5)

Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光波长为510nm的绿色可见光。Cy2和FITC使用相同的滤波片。由于Cy2比FITC在光下更稳定，要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。Cy3耦联基团激发光的较大波长为550nm，最强发射光为570nm。因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。Cy3在氩光灯（514nm或528nm）下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯（543nm）或者汞灯（546nm）下则约75％。Cy3可以和荧光素一起作双标。Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。Cy5耦联基团的激发波长较大650nm，发光波长较大670nm。在氪氩灯（647nm）下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下（633nm）为63％。Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。由于它的较大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜，在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。使用传统的表面荧光显微镜时，不推荐使用Cy5。

  • 藻红蛋白或藻胆色素蛋白-Phycoerythrin(PE)

存在于被称为藻红的多聚微粒中，位于叶绿素的反应中心，在自然结构中，藻红蛋白吸收光能，吸收后转化成能量，供其发育生长。当藻红蛋白被分离和纯化后，其蛋白质变得具有很强的荧光，能吸收不同波长的光，发出亮红色的荧光，此时不再接受任何外来的光，也不能转移光能。藻红蛋白PE的吸收波长范围较广，较大的吸收波长为566nm，较大的发射波长为574nm。藻红蛋白作为荧光标记物具有以下优点：首先具有强的长波长激发和发射荧光，可避免来自其他生物材料荧光的干扰；并且具有极高的发射量子产率；另外PE具有非常高的水溶性而且与许多生物学或合成材料的多位点稳定交联。

注：由于观察荧光需要一定波长的激发光，必须根据实验室已有的仪器可发光的波段进行选择。另外注意多标记中对探针色彩区分程度的要求，例如，若丹明红-X (RRX)和德克萨斯红(TR)荧光素的区别就比四甲基若丹明（TRITC）或者Cy3的区别明显。如果对灵敏度有更高的要求，则Cy3和Cy5就比其他的荧光团探针要亮。

上海金畔生物科技有限公司代理的全球知名二抗和底物生产厂商Seracare（KPL）提供丰富的荧光标记二抗，可检测抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类等物种；另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。小编下面汇总了部分常用荧光二抗：

FITC

TRITC

Cy3

Cy5

PE

抗人

5230-0425

–

5230-0355

5230-0370

–

抗小鼠

5230-0427

5230-0336

5230-0364

5230-0376

–

抗大鼠

5230-0301

–

5230-0361

–

–

抗豚鼠

5230-0303

–

–

–

–

抗兔

5230-0426

5230-0332

5230-0359

5230-0372

–

抗猪

5230-0297

–

–

–

–

抗山羊

5230-0294

–

5230-0358

5230-0371

–

抗鹿

5230-0329

–

–

–

–

抗火鸡

5230-0327

–

–

–

–

抗鸡

5230-0325

–

–

5230-0379

–

抗鸭

5230-0326

–

–

–

–

抗马

5230-0320

–

–

–

–

抗猫

5230-0317

–

–

–

–

抗狗

5230-0314

–

–

–

–

抗牛

5230-0293

–

–

–

–

链和亲霉素

5270-0028

–

5270-0022

5270-0023

5270-0021

如对产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录官方网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

荧光标记二抗的选择-FITC/Rhodamine/Texas Red/Cy/PE/AMCA

发表于由

一般来讲，耦联到二抗上的探针主要有酶（辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），荧光基团（FITC, RRX, TR, PE, Rhodamine）和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA，最常用的二抗是酶标二抗；而细胞或组织标记实验（细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术）中通常使用荧光标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号，可以使用Biotin/Avidin检测系统。其中荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多，目前常用于荧光标记二抗有以下几种：

【异硫氰酸荧光素-Fluorescein Isothiocyanate (FITC)荧光标记二抗】

FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4，较大吸收光波长为490～495nm，较大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用最广泛的荧光素。由于FITC是小分子化合物，每一个抗体可标记几个FITC分子，IgM通常用小分子的荧光素标记，如FITC、Cy3/5、Texas Red等。FITC荧光二抗主要优点是人眼对黄绿色较为敏感，通常切片标本中的绿色荧光少于红色。然而FITC的较大缺点是淬灭快，因此要和抗淬灭剂一起使用。

【四甲基异硫氰酸罗丹明-Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC)，Rhodamine Red-X(RRX), Texas Red(TR)荧光标记二抗】

这些罗丹明的衍生物耦联基团具有不同的吸收波长 (550, 570, 596nm)和较大发射波长（570, 590, 620nm）。尽管TRITC经常和FITC一起在双标记实验中使用，使用RRX和TR可以得到更好的颜色区分。在使用装有氪氩灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记的实验时，RRX尤其有用，可以和Cy2(或者FITC)和Cy5一起使用，因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间，而且和这两者覆盖都很少。氪氩灯激发光为488nm，598nm和647nm，分别是Cy2(FITC), RRX和Cy5的理想激发波长。因为FITC和PE可以被氩灯的488nm波长激发, 在流式细胞仪中用FITC作双标，另一种用藻红蛋白（PE）耦联基团要比罗丹明好。TRITC为罗丹明的衍生物，呈紫红色粉末，较稳定。较大吸收光波长为 550nm，较大发射光波长为620nm，呈现橙红色荧光，与FITC的绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢，也可用于单独标记染色。

【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5)】

Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。Cy2和FITC使用相同的滤波片。由于Cy2比FITC在光下更稳定。要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。Cy3耦联基团激发光的较大波长为550nm，最强发射光为570nm。因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。

Cy3在氩光灯（514nm或528nm）下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯（543nm）或者汞灯（546nm）下则约荧光标记二抗的选择-FITC/Rhodamine/Texas Red/Cy/PE/AMCA荧光标记二抗的选择-FITC/Rhodamine/Texas Red/Cy/PE/AMCA荧光标记二抗的选择-FITC/Rhodamine/Texas Red/Cy/PE/AMCA75％。Cy3可以和荧光素一起作双标。Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。Cy5耦联基团的激发波长较大650nm，发光波长较大670nm。在氪氩灯（647nm）下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下（633nm）为63％。Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。由于它的较大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。使用传统的表面荧光显微镜时，不推荐使用Cy5。

【藻红蛋白或藻胆色素蛋白-Phycoerythrin(PE)荧光标记二抗】

存在于被称为藻红的多聚微粒中，位于叶绿素的反应中心，在自然结构中，藻红蛋白吸收光能，吸收后转化成能量，供其发育生长。当藻红蛋白被分离和纯化后，其蛋白质变得具有很强的荧光，能吸收不同波长的光，发出亮红色的荧光，此时不再接受任何外来的光，也不能转移光能。藻红蛋白PE的吸收波长范围较广，较大的吸收波长为566nm，较大的发射波长为574nm。藻红蛋白作为荧光标记物具有以下优点：首先具有强的长波长激发和发射荧光，可避免来自其他生物材料荧光的干扰；并且具有极高的发射量子产率；另外PE具有非常高的水溶性而且与许多生物学或合成材料的多位点稳定交联。

【Aminomethylcoumarin Acetate (AMCA)】

耦联的AMCA吸收光波长较大为350nm，发荧光则为450nm。对于荧光显微镜来说，AMCA可以用汞灯来激发，用紫外滤板来观察。由于AMCA的信号相对较弱，单标实验中不推荐使用AMCA。AMCA和荧光素的荧光波长只有很小的重叠范围，而和发出长波长荧光的荧光基团没有或者只有极少的重叠，因此它最常用于多标记实验中，比如免疫荧光显微镜和流式细胞仪。由于人眼不能很好的检测蓝色荧光，在多标记的实验中，AMCA耦联的二抗应当被用于检测大量的抗原。AMCA和荧光素一样很快淬灭，使用抗淬灭剂可以减轻。且由于肉眼不能很好的检测AMCA所激发的蓝色荧光，因而AMCA耦联的二抗更适用于检测大量存在的抗原。如果使用在流式细胞仪中，AMCA可以用汞灯或者水冷却的氩光灯激发，因为它们发出的光线是在光谱的紫外区。

注：由于观察荧光需要一定波长的激发光，必须根据实验室已有的仪器可发光的波段进行选择。另外，多标记中对探针色彩区分程度的要求。例如，若丹明红-X (RRX)和德克萨斯红(TR)荧光素的区别就比四甲基若丹明（TRITC）或者Cy3的区别明显。如果对灵敏度有更高的要求，则Cy3和Cy5就比其他的荧光团探针要亮。

上海金畔生物科技有限公司备有全面的二抗现货产品并能提供最完整的二抗产品线。主要二抗品牌为全球较大的二抗和底物生产厂商KPL以及前沿抗体生产商 ProteinTech。针对荧光标记二抗，有FITC、TRITC、Rhodamine、PE、Cy3/5、AMCA、Dylight等多种荧光标记二抗；按照检测物种分，有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类二抗；另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。

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