Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Leuconostoc mescenteroides 葡萄糖5-磷酸脱氢酶(嗜柠檬酸明串球菌) 品牌:FUJIFILM Wako


Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Leuconostoc mescenteroides

葡萄糖5-磷酸脱氢酶(嗜柠檬酸明串球菌)

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:9001-40-5
储存条件:-20℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

079-02451

for Biochemistry 500 U

Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Leuconostoc mescenteroides                                                      葡萄糖5-磷酸脱氢酶(嗜柠檬酸明串球菌)            品牌:FUJIFILM Wako

替代品:077-06531


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* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动,恕不另行通知,确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Yeast 葡萄糖6-磷酸脱氢酶(酵母由来) 品牌:FUJIFILM Wako


Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Yeast

葡萄糖6-磷酸脱氢酶(酵母由来)

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:9001-40-5
储存条件:-20℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

076-02461

for Biochemistry 500 U

Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Yeast                                                      葡萄糖6-磷酸脱氢酶(酵母由来)            品牌:FUJIFILM Wako

替代品:070-06543


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Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Yeast 葡萄糖5-磷酸脱氢酶(酵母由来) 品牌:FUJIFILM Wako


Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Yeast

葡萄糖5-磷酸脱氢酶(酵母由来)

品牌:FUJIFILM Wako
CAS No.:9001-40-5
储存条件:-20℃
纯度:
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

072-02463

for Biochemistry 100 U

Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase, from Yeast                                                      葡萄糖5-磷酸脱氢酶(酵母由来)            品牌:FUJIFILM Wako

替代品:070-06543


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


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日本同仁化学Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264| DOJINDO

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品,欢迎访问官网了解更多信息

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264
葡萄糖检测试剂盒
Glucose Assay Kit-WST
商品信息
储存条件:0-5度保存,避光防潮
运输条件:室温

特点:

 

● 细胞上清液和细胞样品均适用

● 稳定性好

●可使用酶标仪高通量筛选

下载说明书
SDS下载
代谢宣传资料
葡萄糖乳酸检测

选择规格:
50 tests
200 tests

现货

代谢

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264
Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

产品解说
活动进行中
试剂盒内含
概述
原理
操作步骤
制作葡萄糖标准曲线
实验例
常见问题Q&A
参考文献

产品解说

 

活动进行中

订购满5000元,200元礼品等你拿

凑单关联产品TOP5

NO.1.    Lactate Assay Kit-WST     乳酸检测

NO.2.    Glucose Uptake Probe-Green    葡萄糖摄取检测

NO.3.    Cell Counting Kit-8     细胞增殖毒性检测  

NO.4.    FerroOrange    细胞亚铁离子检测

NO.5.    Liperfluo    细胞脂质过氧化物检测

 

试剂盒内含

50 tests 200 tests
Dye Mixture ×1 ×1
葡萄糖标准品(10 mmol/l)(红盖) 150 μl×1 600 μl×1
酶(绿盖) ×1 ×1
Assay Buffer 3.5 ml×1 14 ml×1
Reconstitution Buffer(蓝盖) 350 μl×1 1.4 ml×1

概述

葡萄糖是一种提供体内能量来源的最重要的物质,也是一种主要能量代谢指标。它不仅是糖尿病和肥胖研究的糖代谢指标,在癌症研究中,也常和乳酸一起作为体内细胞代谢的检测指标。最新的研究表明,抑制与葡萄糖代谢和脂质代谢有关的酶的活性,可以抑制癌细胞的生长。

葡萄糖检测试剂盒(Glucose Assay Kit-WST)可以定量检测能量代谢的底物-葡萄糖,通过测定WST反应的吸光度来定量细胞培养基上清液中的葡萄糖。检测限可达浓度为0.02 mmol/l的葡萄糖,适合用96孔板检测,可以同时检测多个样品。

原理

*本试剂盒可以检测细胞上清液的葡萄糖的含量,通过检测WST甲赞的吸光度来测定。另外,试剂盒里有葡萄糖标准液,可以制作标准曲线,测定样品中的葡萄糖浓度。

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

*要测定细胞上清液以外的样品,请事先查看常见问题FAQ“是否有检测细胞上清液以外的实验例?”。

操作步骤

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

制作葡萄糖标准曲线

可以用试剂盒中的葡萄糖标准液制作出葡萄糖标准曲线,然后通过标准曲线求出样品中的葡萄糖浓度。当葡萄糖浓度在0.5 mmol/l以上时,可以通过稀释样品进行检测。

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

实验例

用Phloretin抑制葡萄糖的摄取

1. 制备所需浓度Phloretin的Jurkat细胞悬液 (5×105 cells/ml,在RPMI培养基中含有10%的胎牛血清和1%的青霉素-链霉素)。

2. 在6孔板中接种1×106 cells/孔的细胞悬液,在37℃,5% CO2培养箱中过夜培养。

3. 将细胞悬液转移到锥形管中,在1,500 rpm离心5 min。

4. 吸取100 µl上清液至1.5 ml微型管中,用超纯水稀释30倍。

5. 按照葡萄糖标准液的制备方法制备葡萄糖标准液。

6. 在96孔板中分别加入50 µl的样品或葡萄糖标准液。

7. 在每孔中加入50 µl工作液。

8. 在37℃培养箱中培养30 min。

9. 用酶标仪检测450 nm处的吸光度,根据葡萄糖的标准曲线计算样品的葡萄糖浓度。

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

Phloretin抑制葡萄糖的摄取

实验证实,细胞培养基上清液中的葡萄糖摄入量减少与Phloretin (一种葡萄糖转运抑制剂)浓度之间有依存关系。

常见问题Q&A

Q1:是否可以检测2-Deoxy-D-glucose?
A1:可以检测2-Deoxy-D-glucose。
Q2:Working Solution的稳定性如何?
A2:Working   Solution无法保存,请现配现用。由于对光不稳定,因此配制后请避光,在室温和避光条件下可保存4小时(当Working   Solution在曝光下,溶液颜色会由红色变为橙色,背景升高)。
Q3:当有还原性物质存在时是否还可以用这个试剂盒检测?
A3:如果样品中含有还原性的物质,则也会和WST染料发生显色,此时无法准确定量葡萄糖浓度。实验中如遇到以上情况,可以设定药物对照(不含细胞含药物的培养基+试剂)作为背景对照,并从标准曲线和样品的吸光度中减去它。
Q4:是否有检测细胞上清液以外的实验例?
A4:有测定细胞内葡萄糖的实验例。操作详情,请参考常见问题FAQ“Q5”。其他的样品没有实验例。
Q5:是否可以检测细胞内葡萄糖?
A5:细胞内葡萄糖也可以检测,请参考下面的样品制备步骤。
 

请准备「0.1%Triton X-100水溶液」和「滤膜(分子量:10KD )」

(1)将细胞*1悬液收于1.5 ml微量管中。

※测定所需的细胞数,需要根据细胞种类进行调整。
HepG2细胞和Jurkat细胞的测量结果如下图所示
(2)在300×g下离心5分钟,去除上清液。
(3)加入300 µl PBS,重悬细胞,在300×g下离心5分钟,除去上清液。
(4)加入250 µl细胞溶解液*2(0.1%Triton-X),裂解细胞后,在12,000×g离心5分钟。
(5)将操作(4)的上清液200 µl转移到超滤膜过滤管(分子量:10K)中,以12,000×g离心10分钟。
※当测定样品为n=3时,总共需要150 µl以上(50 µl×3)。
※离心后的滤液不超过150 µl时,请延长离心时间。
(6)将通过操作(5)得到的滤液作为测定样品。
然后按照使用说明书,测定葡萄糖浓度。
※测定试样在标准曲线范围内(0-0.5 mmol/l)内,请适当用细胞溶解液稀释,用于测定。
*1 为了检测0.02 mmol/l以上的葡萄糖,HepG2细胞数量为1×105cells以上,Jurket细胞需要2×106 cells以上的细胞数量。
*2 细胞溶解液中含有SDS会抑制显色,因此不能使用含有SDS的缓冲液。

 

Q6:一个试剂盒可以检测样品的数量。
A6:制备标准曲线和样品(n=3)时,可以检测的样品数量如下所示。

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

标准曲线:8个点(0, 0.0157, 0.0313, 0.0625, 0.125, 0.25, 0.5, 1 mmol/l)(n=3)

Glucose Assay Kit-WST试剂盒货号:G264

96孔板排列示意图(n=3)

Q7:可以测量L-Glucose吗?
A7:本产品用于β-D-Glucose测量,不能测量L-Glucose。

参考文献

No 检测对象 文献
1 小鼠血清 Increased levels of Aβ42 decrease the lifespan of ob/ob mice with dysregulation of microglia and astrocytes, FASEB   J., 2019,DOI: 10.1096/fj.201901028RR
2 链霉菌 Enhancement of metabolic flux toward ε-poly-l-lysine biosynthesis by targeted inactivation of concomitant polyene macrolide biosynthesis in Streptomyces albulus, J. Biosci.Bioeng., 2020,DOI: 10.1016/j.jbiosc.2019.12.002
3 HCT116细胞 Serine racemase enhances growth of colorectal cancer by producing pyruvate from serine, Nat. Metab., 2020, 2(1), 81
4 P388白血病细胞 2-Deoxy-D-glucose enhances the anti-cancer effects of idarubicin on idarubicin-resistant P388 leukemia cell, Oncol. Lett., 2020, 20(1), 962-966
5 小鼠精子细胞 Macrophage ubiquitin‑specific protease 2 contributes to motility, hyperactivation,   capacitation, and in vitro fertilization activity of mouse sperm, Cellular and Molecular Life Sciences, 2020, doi:   10.1007/s00018-020-03683-9

 

*要测定细胞培养上清液以外的样品,请事先查看常见问题FAQ“是否有除检测细胞上清液以外的样品检测实验例”。

日本同仁化学Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03| DOJINDO

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品,欢迎访问官网了解更多信息

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03
葡萄糖摄取检测试剂盒
葡萄糖代谢、葡萄糖摄取
商品信息
储存条件:0-5°C
运输条件:常温

特点:

 

● 检测灵敏度高

● 操作简便,用时短

● 可以用荧光酶标仪做高通量筛选

● 荧光染料泄露少,数据重现性高

下载说明书
葡萄糖摄取检测

选择规格:
1 set

现货

数据重现性高

葡萄糖检测试剂盒(点击查看)

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

产品解说
产品概述
产品优势
相关产品区别
实验例
常见问题Q&A
规格性状

产品解说

 

产品概述

产品概述

细胞通过摄入各种各样的营养物质并在胞内的代谢作用下产生能量。营养物代谢的过程随着细胞外环境、细胞状态、细胞种类的不同亦不尽相同。近年来的研究发现,营养代谢不仅与能量的产生密切相关,还与基因表达等各种各样的细胞调节机制有关。葡萄糖是最重要的一种营养物质,细胞摄取葡萄糖的过程对于研究和理解细胞机能非常重要。细胞摄取葡萄糖的评价方法主要是放射性同位素示踪法。但是由于放射性同位素示踪法操作繁杂,泛用性并不高。另外,还有一种使用2-Deoxy-D-glucose(2-DG)的酶循环法,该方法虽然可以进行孔板检测,但是无法用于荧光显微镜和流式细胞仪观察。因此,最近常用的方法是通过葡萄糖类似物2-NBDG的荧光检测法1)。然而,2-NBDG也有荧光强度弱、灵敏度低的问题,而且被细胞摄取的2-NGDG还有从细胞中向外泄漏的情况出现。同仁化学研究新开发的荧光葡萄糖类似物Glucose Uptake Probe-Red是一种比2-NBDG灵敏度更高的葡萄糖摄取能力检测试剂。而且使用本试剂盒中包含的Washing and Imaging (WI) Solution可以抑制探针从细胞内泄漏,得到重现性更高的实验数据。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

产品优势

与传统方向相比的优势! 4大特征

Glucose Uptake Probe-Red是红色荧光染料,可以与红色野外其他颜色的荧光染料共染色。另外,由于采用高亮度的荧光染料,相较于传统方法(2-NBDG)可以在更短时间内进行高灵敏度检测。

① 与其他荧光染料的共染色

可以根据实验需求,选择其他荧光染料与Glucose Uptake Probe进行共染色,一次检测多个指标。下图是用Glucose Uptake Probe Red与脂肪滴(绿色:Lipi-Green货号LD02)共染色脂肪细胞分化而来的3T3-L1细胞的荧光图像。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

<观测条件>

细胞: 3T3-L1

检测条件:

Glucose Uptake Probe-Red:Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

Lipi-Green:Ex = 450-490 nm; Em = 500-550 nm

② 可用荧光显微镜或流式细胞仪检测

Glucose Uptake Probe-Red除了荧光显微镜和流式细胞仪以外还可以用荧光酶标仪进行检测。下面是A549细胞的葡萄糖摄取能力的检测结果,可以明显观察到高浓度葡萄糖对Glucose Uptake Probe-Red摄入的抑制作用。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

细胞:A549

检测条件

Glucose Uptake Assay Kit-Red:Ex = 545 nm, Em = 605 nm

 

③ 快速检测

使用高亮度的Glucose Uptake Probe-Blue,即使使用2-NBDG完全相同的实验步骤,也可以大幅缩短实验时间。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

操作的前处理、染色(进入细胞内的过程)的步骤只需要清洗3次,非常简便。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

 

④  减少荧光染料的泄漏

使用试剂盒附带的WI Solution清洗细胞,可以抑制染料进入细胞后的泄漏,得到重现性更高的数据。详细的实验数据请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green 货号UP02的页面。

与传统法的比较

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

*以上结果源自A549细胞实验的结果,其他细胞系的向胞外泄露的时间可能不同。

相关产品区别

与Glucose Assay Kit的不同点

Glucose Uptake Probe-Green和Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)的不同点。

 

1.Glucose Assay Kit-WST可以定量检测细胞上清液中葡萄糖的消费量。

Glucose Uptake Assay Kit无法定量检测葡萄糖。

 

2.Glucose Uptake Assay Kit-Green可短时间内检测葡萄糖摄取能力的差值。

Glucose Assay Kit-WST无法在短时间内检测葡萄糖量的变化。

 

详细的实验数据请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green 货号UP02 的页面。

实验例

实验例1:Cytochalasin B对葡萄糖摄取的抑制作用

HepG2细胞经过葡萄糖转运蛋白抑制剂Cytochalasin B处理后,使用本试剂盒对葡萄糖摄取能力的抑制作用进行高灵敏度观察。

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

(Scale Bar: 50 μm)

 

<观测条件>

细胞:HepG2细胞

使用培养基:MEM (5.5 mmol/l Glucose)

培养条件:5 µmol/l Cytochalasin B / MEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS), 37℃, 24 h

染色条件:Glucose Uptake Probe (500倍稀释)/DMEM(0 mol/l Glucose), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜;

Glucose Uptake Assay Kit-Blue: Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Green: Ex = 450-490 nm; Em = 500-550 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Red: Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

实验例2:Insulin(胰岛素)对细胞葡萄糖摄取能力的促进

胰岛素对脂肪细胞(adipocyte)的葡萄糖摄取能力的影响通过本试剂盒进行高灵敏度检测。

 

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

(Scale Bar: 50 μm)

 

<观测条件>

细胞:mouse adipocyte

使用培养基:DMEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS)

刺激条件:0 or 1 µmol/l Insulin / DMEM (0 mmol/l Glucose , serum free), 37℃, 15 min

染色条件:Glucose Uptake Probe-Green (500倍稀释) /DMEM (0 mmol/l Glucose, serum free), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜;

Glucose Uptake Assay Kit-Blue: Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Green: Ex = 450-490 nm; Em = 500-550 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Red: Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

常见问题Q&A

Q1: Glucose Uptake Probe-Red具体是通过哪种葡萄糖转运蛋白进入细胞的?
A:对于具体的每一种葡萄糖转运蛋白的特异性目前还没有详细的数据。
Q2: Glucose Uptake Probe-Red被细胞摄入后,会被分解或代谢掉吗?
A:染料的荧光部分非常稳定,实验范围内的操作不会造成分解。另外,类葡萄糖的部位,从结构上考虑可能会被Hexokinase(己糖激酶)磷酸化,除此以外应该不会参加任何代谢反应。
Q3: Glucose Uptake Probe-Red被活细胞摄入后,可以进行细胞固定的操作吗?
A:由于荧光探针会从细胞内漏出,染色后无法进行细胞固定。
Q4: 用荧光酶标仪检测时候,对孔板有什么特别要求吗?
A:需要使用荧光检测用的细胞培养板。
Q5:Probe working solution可以长期保存吗?
A:Probe working solution无法长期保存,请现配现用。Probe stock solution冷冻可以保存一个月。
Q6: 无法观察到荧光信号变化的时候,应该怎么办?
A:预实验的时候可以先从稀释浓度(x250~x1,000)、染色时间(5 min~1 h)范围内进行摸索。
Q7: 荧光背景高的时候,应该怎么办?
A:可能是由于有未被细胞摄入的残留荧光染料。请用WI Solution再多进行一次清洗操作。
Q8: 用WI solution清洗之后,荧光染料可以在细胞内停留多长时间?
A:一般在室温下可以保持在细胞内1 h左右,不同的细胞种类,时间可能会有一定差别。
Q9: 可以对葡萄糖进行定量检测吗?
A:本产品不能用于葡萄糖的定量检测。如果需要定量检测培养基中的葡萄糖的消耗量或者细胞内的葡萄糖量,可以使用同仁化学研究所的Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)。
Q10: 可以对被细胞摄入的染料进行定量吗?
A:不可以对细胞摄入的染料进行定量。本试剂盒是葡萄糖摄取能力强弱或增减的检测试剂盒。
Q11: 如果无法通过葡萄糖的竞争性抑制细胞探针的摄取,该如何解决?
A:竞争性抑制是否发生取决于每个细胞中的葡萄糖转运蛋白的表达水平和类型。(例如:HepG2细胞)Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

在这种情况下,使用2-脱氧葡萄糖(2-DG)进行预处理可能会在葡萄糖竞争抑制方面产生差异。 请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green(产品代码:UP02)的使用示例。

2-DG预处理对探针摄取的抑制和葡萄糖竞争性抑制(HepG2细胞)

1.将细胞接种在培养皿或微孔板中,并在5% CO₂培养箱(37°C)中培养过夜。

2.除去培养基[DMEM (10% FBS,高葡萄糖)]后,加入50 mmol/l 2-DG/培养基,并 在5% CO₂培养箱(37℃)中培养细胞2小时。

3.清洗细胞两次。

4.加入预热的DMEM(无葡萄糖,无血清)并将细胞在5%CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

5.除去上清液后,加入预热的探针溶液并在5% CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

6.除去上清液后,用冷却的WI溶液(1x)洗涤细胞两次。

7.除去上清液后,加入冷却后的WI溶液(1x),并在室温下培养 5分钟。

8.除去上清液后,加入冷却的WI溶液(1x)。 9.荧光显微镜下观察细胞。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

Q12: 目前有过检测实例的细胞有哪些?
Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03
Q13: 以下为不同细胞添加抑制剂后,葡萄糖摄取能力检测实验。
Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Red货号:UP03

规格性状

            Glucose Uptake Probe-Red                           ×1

WI Solution (50X)                                   5 ml ×1

供参考的可测次数

每个试剂盒大约可检测12枚35 mm dish或1枚96孔板

日本同仁化学Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02| DOJINDO

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Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02
葡萄糖摄取检测试剂盒
葡萄糖代谢、葡萄糖摄取
商品信息
储存条件:0-5°C
运输条件:常温

特点:

 

● 检测灵敏度高

● 操作简便,用时短

● 可以用荧光酶标仪做高通量筛选

● 荧光染料泄露少,数据重现性高

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产品文献
代谢宣传资料
相关资料
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葡萄糖摄取检测

选择规格:
1 set

现货

灵敏度高

酶标仪多样品检测

数据重现性高

葡萄糖检测试剂盒(点击查看)

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

产品解说
活动进行中
产品概述
产品优势
与传统法的比较
相关产品区别
实验例
常见问题Q&A
规格性状
参考文献

产品解说

 

活动进行中

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凑单关联产品TOP5

NO.1.    Cell Viability Assay Kit – Luminescent Detection    细胞增殖/毒性检测-发光法(CCK-L)

NO.2.    Caspase-3 Assay Kit-Colorimetric-    细胞凋亡检测

NO.3.    Cell Counting Kit-8     细胞增殖毒性检测  

NO.4.    DALGreen – Autophagy Detection    细胞自噬检测

NO.5.    FerroOrange    细胞亚铁离子检测

 

产品概述

细胞通过摄入各种各样的营养物质并在胞内的代谢作用下产生能量。营养物代谢的过程随着细胞外环境、细胞状态、细胞种类的不同亦不尽相同。近年来的研究发现,营养代谢不仅与能量的产生密切相关,还与基因表达等各种各样的细胞调节机制有关。葡萄糖是最重要的一种营养物质,细胞摄取葡萄糖的过程对于研究和理解细胞机能非常重要。细胞摄取葡萄糖的评价方法主要是放射性同位素示踪法。但是由于放射性同位素示踪法操作繁杂,泛用性并不高。另外,还有一种使用2-Deoxy-D-glucose(2-DG)的酶循环法,该方法虽然可以进行孔板检测,但是无法用于荧光显微镜和流式细胞仪观察。因此,最近常用的方法是通过葡萄糖类似物2-NBDG的荧光检测法1)。然而,2-NBDG也有荧光强度弱、灵敏度低的问题,而且被细胞摄取的2-NGDG还有从细胞中向外泄漏的情况出现。同仁化学研究新开发的荧光葡萄糖类似物Glucose Uptake Probe-Green是一种比2-NBDG灵敏度更高的葡萄糖摄取能力检测试剂。而且使用本试剂盒中包含的Washing and Imaging (WI) Solution可以抑制探针从细胞内泄漏,得到重现性更高的实验数据。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

产品优势

与传统方向相比的优势! 4大特征

由于采用高亮度的荧光染料,相较于传统方法(2-NBDG)可以在更短时间内进行高灵敏度检测。

① 高灵敏度

2-NBDG在水中的荧光强度很低,而本试剂盒采用的荧光染料可以进行高灵敏度的葡萄糖摄取能力检测。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

<观测条件>

细胞: A549细胞

检测仪器:荧光显微镜

检测滤光片:GFP (Ex: 470 /40 nm; Em: 525 /50 nm)

② 快速检测

使用高亮度的Glucose Uptake Probe-Green,即使使用2-NBDG完全相同的实验步骤,也可以大幅缩短实验时间。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

操作的前处理、染色(进入细胞内的过程)的步骤只需要清洗3次,非常简便

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

③  荧光酶标仪的多样品检测

2-NBDG很难用于荧光酶标仪的检测,而本试剂盒可用于荧光酶标仪的高通量筛选实验。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

<检测条件>

细胞:A549细胞

Ex: 488 nm; Em: 520 nm

④  减少荧光染料的泄漏

使用试剂盒附带的WI Solution清洗细胞,可以抑制染料进入细胞后的泄漏,得到重现性更高的数据。

使用HBSS清洗细胞时

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

使用WI Solution清洗细胞时

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

(Scale Bar: 50 μm)

<观测条件>

细胞:A549细胞

检测仪器:荧光显微镜

检测滤光片:GFP (Ex: 470 /40 nm; Em: 525 /50 nm)

与传统法的比较

        Glucose Uptake Probe-Green和2-NBDG都可以用于荧光显微镜和流式细胞仪的检测。而相比较于2-NBDG的激发波长,Glucose Uptake Probe-Green对于488 nm的激发光以及GFP, FITC滤光片的适用度更高。

产品名 荧光

显微镜

荧光

酶标仪

流式

细胞仪

染料滞留时间 荧光特性
Glucose Uptake Assay Kit-Green 1 h※ λex: 507 nm, λem: 518 nm
2-NBDG × 30 min以下※ λex: 465 nm, λem: 540 nm

※A549细胞的检测结果,不同的细胞种类,染料的滞留时间可能会有差异。

相关产品区别

与Glucose Assay Kit的不同点

Glucose Uptake Probe-Green和Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)的不同点。

1.Glucose Assay Kit-WST可以定量检测细胞上清液中葡萄糖的消耗量。

Glucose Uptake Assay Kit无法定量检测葡萄糖。

2.Glucose Uptake Assay Kit-Green可短时间内检测葡萄糖摄取能力的差值。

Glucose Assay Kit-WST无法在短时间内检测葡萄糖量的变化。

Glucose Assay Kit-WST与本试剂盒的差别,通过下面的检测实例来说明。

实验例:用葡萄糖摄取抑制剂(Cytochalasin B)处理的HepG2细胞的葡萄糖消费量和葡萄糖摄取能力的检测。

实验的流程和检测结果:

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

实验例

实验例1:Cytochalasin B对葡萄糖摄取的抑制作用

HepG2细胞经过葡萄糖转运蛋白抑制剂Cytochalasin B处理后,使用本试剂盒对葡萄糖摄取能力的抑制作用进行高灵敏度观察以及数值化的检测。

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

(Scale Bar: 50 μm)

<观测条件>

细胞:HepG2细胞

使用培养基:MEM (5.5 mmol/l Glucose)

培养条件:5 µmol/l Cytochalasin B / MEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS), 37℃, 24 h

染色条件:Glucose Uptake Probe (500倍稀释)/DMEM (0 mol/l Glucose), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜; 滤光片:GFP (Ex: 470 /40 nm; Em: 525 /50 nm)

荧光酶标仪

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

<检测条件>

Ex: 488 nm; Em: 520 nm

实验例2:Insulin(胰岛素)对细胞葡萄糖摄取能力的促进

胰岛素对脂肪细胞(adipocyte)的葡萄糖摄取能力的影响通过本试剂盒进行高灵敏度检测。

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

(Scale Bar: 50 μm)

<观测条件>

细胞:mouse adipocyte

使用培养基:DMEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS)

刺激条件:0 or 1 µmol/l Insulin / DMEM (0 mmol/l Glucose , serum free), 37℃, 15 min

染色条件:Glucose Uptake Probe-Green (500倍稀释) /DMEM (0 mmol/l Glucose, serum free), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜; 滤光片:GFP (Ex: 470 /40 nm; Em: 525 /50 nm)

荧光酶标仪检测

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

<检测条件>

Ex: 488 nm; Em: 520 nm

※由于脂肪细胞的特性,很难在孔板上均匀分布,所以实验数据会有一些孔间差。

<实验操作>

1.脂肪细胞分别接种到不同的ibidi 96孔板中,过夜培养。

2.用不含葡萄糖的DMEM培养基清洗细胞2次后,加入不含葡萄糖的培养基(0 or 1 μmol/l Insulin)。

3.在37℃下培养15 min。

4.加入用不含葡萄糖的培养基500倍稀释的Probe solution, 37℃下培养15 min。

5.用预冷至4℃的WI Solution(1x)清洗3次后,再次添加WI Solution(4℃)。

6.分别用荧光显微镜和荧光酶标仪检测。

实验例3:前脂肪细胞和细胞脂肪细胞的葡萄糖摄取能力的比较

使用本试剂盒对前脂肪细胞(preadipocyte)和脂肪细胞(adipocyte)的葡萄糖摄取能力进行高灵敏度检测。

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

(Scale Bar: 50 μm)

<观测条件>

细胞:preadipocyte, adipocyte

使用培养基:DMEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS)

染色条件:Glucose Uptake Probe-Green (500倍稀释) /DMEM (0 mmol/l Glucose, serum free), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜; 滤光片:GFP (Ex: 470 /40 nm; Em: 525 /50 nm)

荧光酶标仪检测

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

<检测条件>

Ex: 488 nm; Em: 520 nm

※由于脂肪细胞的特性,很难在孔板上均匀分布,所以实验数据会有一些孔间差。

<实验操作>

1.前脂肪细胞和脂肪细胞分别接种到不同的ibidi 96孔板中,过夜培养。

2.用不含葡萄糖的DMEM培养基清洗细胞2次后,加入不含葡萄糖的培养基。

3.在37℃下培养15 min。

4.加入用不含葡萄糖的培养基500倍稀释的Probe solution, 37℃下培养15 min。

5.用预冷至4℃的WI Solution(1x)清洗3次后,再次添加WI Solution(4℃)。

6.分别用荧光显微镜和荧光酶标仪检测。

 

实验例4:饥饿培养引起的细胞自噬和葡萄糖摄取变化

用自噬体染料DAPRed和自噬溶酶体染料DALGreen染色HeLa细胞后,用不含氨基酸的培养基培养3小时诱导细胞自噬。通过DAPRed和DALGreen的荧光强度增高确认细胞发生了细胞自噬,另外通过使用Glucose Uptake Probe-Blue发现细胞摄取葡萄糖的能力上升。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

(Scale Bar: 50 μm)

 

<检测条件>

荧光显微镜

Blue: Ex = 340-380 nm, Em = 435-485 nm

Green: Ex = 450-490 nm, Em = 500-550 nm

Red: Ex = 533-557 nm, Em = 570-640 nm

常见问题Q&A

Q1: Glucose Uptake Probe-Green具体是通过哪种葡萄糖转运蛋白进入细胞的?
A:对于具体的每一种葡萄糖转运蛋白的特异性目前还没有详细的数据。
Q2:目前有过检测实例的细胞有哪些?
A:目前的检测实例细胞系请参考下表:
细胞种类 Probe stock solution

的稀释倍率

染色时间
人肺腺癌细胞 A549 x 500 15 min
人肝癌细胞 HepG2 x 500 15 min
前脂肪细胞 preadipocyte(3T3-L1) x 500 15 min
脂肪细胞 adipocyte(3T3-L1) x 500 15 min
恶性黑色肿瘤细胞 MO5 x 500 15 min
小鼠成肌细胞 C2C12 x 500 5 min
人星形胶质瘤细胞 U-251 MG x 500 15 min
人子宫颈癌细胞 HeLa x 500 15 min
小鼠肺癌细胞 3LL x 50000 15 min
T细胞 CD4+ T cell x 50, x500 15 min
小鼠巨噬细胞 J774.1 x 500 15 min
线虫 N2 x 500 90 min
Q3:Glucose Uptake Probe-Green被细胞摄入后,会被分解或代谢掉吗?
A:染料的荧光部分非常稳定,实验范围内的操作不会造成分解。另外,类葡萄糖的部位,从结构上考虑可能会被Hexokinase(己糖激酶)磷酸化,除此以外应该不会参加任何代谢反应。
Q4:Glucose Uptake Probe-Green被活细胞摄入后,可以进行细胞固定的操作吗?
A:由于荧光探针会从细胞内漏出,染色后无法进行细胞固定。
Q5:用荧光酶标仪检测时候,对孔板有什么特别要求吗?
A:需要使用荧光检测用的细胞培养板。
Q6:Probe working solution可以长期保存吗?
A:Probe working solution无法长期保存,请现配现用。Probe stock solution冷冻可以保存一个月。
Q7:无法观察到荧光信号变化的时候,应该怎么办?
A:预实验的时候可以先从稀释浓度(x250~x1,000)、染色时间(5 min~1 h)范围内进行摸索。
Q8:荧光背景高的时候,应该怎么办?
A:可能是由于有未被细胞摄入的残留荧光染料。请用WI Solution再多进行一次清洗操作。
Q9:Glucose Uptake Probe-Green对细胞有毒性吗?
A:使用同仁化学研究所的Cell Counting Kit-8(货号:CK04)对A549细胞的Glucose Uptake Probe-Green细胞毒性进行了检验,没有发现细胞毒性的产生。
Q10:用WI solution清洗之后,荧光染料可以在细胞内停留多长时间?
A:一般在室温下可以保持在细胞内1 h左右,不同的细胞种类,时间可能会有一定差别。
Q11:可以对葡萄糖进行定量检测吗?
A:本产品不能用于葡萄糖的定量检测。如果需要定量检测培养基中的葡萄糖的消耗量或者细胞内的葡萄糖量,可以使用同仁化学研究所的Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)。

 

Q12:可以对被细胞摄入的染料进行定量吗?
A:不可以对细胞摄入的染料进行定量。本试剂盒是葡萄糖摄取能力强弱或增减的检测试剂盒。
Q13:如果无法通过葡萄糖的竞争性抑制细胞探针的摄取,该如何解决?
A:竞争性抑制是否发生取决于每个细胞中的葡萄糖转运蛋白的表达水平和类型。(例如:HepG2细胞)Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

在这种情况下,使用2-脱氧葡萄糖(2-DG)进行预处理可能会在葡萄糖竞争抑制方面产生差异。 请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green(产品代码:UP02)的使用示例。

2-DG预处理对探针摄取的抑制和葡萄糖竞争性抑制(HepG2细胞)

1.将细胞接种在培养皿或微孔板中,并在5% CO₂培养箱(37°C)中培养过夜。

2.除去培养基[DMEM (10% FBS,高葡萄糖)]后,加入50 mmol/l 2-DG/培养基,并 在5% CO₂培养箱(37℃)中培养细胞2小时。

3.清洗细胞两次。

4.加入预热的DMEM(无葡萄糖,无血清)并将细胞在5%CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

5.除去上清液后,加入预热的探针溶液并在5% CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

6.除去上清液后,用冷却的WI溶液(1x)洗涤细胞两次。

7.除去上清液后,加入冷却后的WI溶液(1x),并在室温下培养 5分钟。

8.除去上清液后,加入冷却的WI溶液(1x)。

9.荧光显微镜下观察细胞。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

Q14: 以下为不同细胞添加抑制剂后,葡萄糖摄取能力检测实验。
Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Green货号:UP02

规格性状

            Glucose Uptake Probe-Green  ×1

WI Solution (50X)   5 ml ×1

供参考的可测次数

每个试剂盒大约可检测12枚35 mm dish或1枚96孔板

参考文献

编号 文献 IF
1 Enhanced   aerobic denitrification performance with Bacillus licheniformis via secreting   lipopeptide biosurfactant lichenysin, Chemical Engineering   Journal,2022,434:134686 2022 13.3
2 Genetically   engineered probiotics as catalytic glucose depriver for tumor starvation   therapy 2023 10.8
3 Remodeling   on adipocytic physiology of organophosphorus esters in mature adipocytes 2022 9.9
4  Simple Fluorescence Assay for Cystine Uptake   via the xCT in Cells Using Selenocystine and a Fluorescent Probe, ACS   Sensors,2021, 6(6):2125-2128 2021 7.7
5 N-Caffeoyltryptophan   enhances adipogenic differentiation in preadipocytes and improves glucose   tolerance in mice 2023 3.7

日本同仁化学Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01| DOJINDO

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Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01
葡萄糖摄取检测试剂盒
葡萄糖代谢、葡萄糖摄取
商品信息
储存条件:0-5°C
运输条件:常温

特点:

 

● 检测灵敏度高

● 操作简便,用时短

● 可以用荧光酶标仪做高通量筛选

● 荧光染料泄露少,数据重现性高

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葡萄糖摄取检测

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数据重现性高

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Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

产品解说
产品概述
产品优势
相关产品区别
实验例
常见问题Q&A
规格性状

产品解说

 

产品概述

细胞通过摄入各种各样的营养物质并在胞内的代谢作用下产生能量。营养物代谢的过程随着细胞外环境、细胞状态、细胞种类的不同亦不尽相同。近年来的研究发现,营养代谢不仅与能量的产生密切相关,还与基因表达等各种各样的细胞调节机制有关。葡萄糖是最重要的一种营养物质,细胞摄取葡萄糖的过程对于研究和理解细胞机能非常重要。细胞摄取葡萄糖的评价方法主要是放射性同位素示踪法。但是由于放射性同位素示踪法操作繁杂,泛用性并不高。另外,还有一种使用2-Deoxy-D-glucose(2-DG)的酶循环法,该方法虽然可以进行孔板检测,但是无法用于荧光显微镜和流式细胞仪观察。因此,最近常用的方法是通过葡萄糖类似物2-NBDG的荧光检测法1)。然而,2-NBDG也有荧光强度弱、灵敏度低的问题,而且被细胞摄取的2-NGDG还有从细胞中向外泄漏的情况出现。同仁化学研究新开发的荧光葡萄糖类似物Glucose Uptake Probe-Blue是一种比2-NBDG灵敏度更高的葡萄糖摄取能力检测试剂。而且使用本试剂盒中包含的Washing and Imaging (WI) Solution可以抑制探针从细胞内泄漏,得到重现性更高的实验数据。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

产品优势

与传统方向相比的优势! 4大特征

Glucose Uptake Probe-Blue是蓝色荧光染料,可以轻松得与其他颜色的荧光染料共染色。另外,由于采用高亮度的荧光染料,相较于传统方法(2-NBDG)可以在更短时间内进行高灵敏度检测。

① 与其他荧光染料的共染色

可以根据实验需求,选择其他荧光染料与Glucose Uptake Probe进行共染色,一次检测多个指标。下图是用Glucose Uptake Probe Blue与脂肪滴(红色:Lipi-Red 货号LD03)共染色脂肪细胞分化而来的3T3-L1细胞的荧光图像。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

<观测条件>

细胞: 3T3-L1

检测条件:

Glucose Uptake Probe-Blue:Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Lipi-Red:Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

② 可用荧光显微镜或流式细胞仪检测

下面是分别使用不含葡萄糖的培养基以及高葡萄糖浓度的培养基培养A549细胞并用Glucose Uptake Probe-Blue进行染色的实验结果。可以观察到高浓度葡萄糖对Glucose Uptake Probe-Blue摄入的抑制作用。结果分别用荧光显微镜和流失细胞仪进行检测。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

细胞:A549

检测条件

Glucose Uptake Assay Kit-Blue:Ex = 340-380 nm, Em = 435-485 nm

③ 快速检测

使用高亮度的Glucose Uptake Probe-Blue,即使使用2-NBDG完全相同的实验步骤,也可以大幅缩短实验时间。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

操作的前处理、染色(进入细胞内的过程)的步骤只需要清洗3次,非常简便。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

④  减少荧光染料的泄漏

使用试剂盒附带的WI Solution清洗细胞,可以抑制染料进入细胞后的泄漏,得到重现性更高的数据。详细的实验数据请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green 货号UP02的页面。

 

与传统法的比较

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

*以上结果源自A549细胞实验的结果,其他细胞系的向胞外泄露的时间可能不同。

相关产品区别

与Glucose Assay Kit的不同点

Glucose Uptake Probe-Green和Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)的不同点。

 

1.Glucose Assay Kit-WST可以定量检测细胞上清液中葡萄糖的消费量。

Glucose Uptake Assay Kit无法定量检测葡萄糖。

 

2.Glucose Uptake Assay Kit-Green可短时间内检测葡萄糖摄取能力的差值。

Glucose Assay Kit-WST无法在短时间内检测葡萄糖量的变化。

 

详细的实验数据请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green 货号UP02的页面。

实验例

实验例1:Cytochalasin B对葡萄糖摄取的抑制作用

HepG2细胞经过葡萄糖转运蛋白抑制剂Cytochalasin B处理后,使用本试剂盒对葡萄糖摄取能力的抑制作用进行高灵敏度观察。

 

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

(Scale Bar: 50 μm)

 

<观测条件>

细胞:HepG2细胞

使用培养基:MEM (5.5 mmol/l Glucose)

培养条件:5 µmol/l Cytochalasin B / MEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS), 37℃, 24 h

染色条件:Glucose Uptake Probe (500倍稀释)/DMEM (0 mol/l Glucose), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜;

Glucose Uptake Assay Kit-Blue: Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Green: Ex = 450-490 nm; Em = 500-550 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Red: Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

实验例2:Insulin(胰岛素)对细胞葡萄糖摄取能力的促进

胰岛素对脂肪细胞(adipocyte)的葡萄糖摄取能力的影响通过本试剂盒进行高灵敏度检测。

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

(Scale Bar: 50 μm)

 

<观测条件>

细胞:mouse adipocyte

使用培养基:DMEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS)

刺激条件:0 or 1 µmol/l Insulin / DMEM (0 mmol/l Glucose , serum free), 37℃, 15 min

染色条件:Glucose Uptake Probe-Green (500倍稀释) /DMEM (0 mmol/l Glucose, serum free), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜;

Glucose Uptake Assay Kit-Blue: Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Green: Ex = 450-490 nm; Em = 500-550 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Red: Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

 

实验例:饥饿培养诱导细胞自噬以及葡萄糖摄取能力的变化

用自噬体染色试剂DAPRed和自噬溶酶体染色试剂DALGreen染色HeLa细胞后,再用不含氨基酸的培养基饥饿培养3小时诱导细胞自噬。通过荧光显微镜观察发现DAPRed和DALGreen的荧光强度增强,证明细胞自噬的发生,另外通过Glucose Uptake Probe-Blue观察到细胞摄取葡萄糖的能力上升。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

<检测条件>

Blue: Ex = 340-380 nm, Em = 435-485 nm

Green: Ex = 450-490 nm, Em = 500-550 nm

Red: Ex = 533-557 nm, Em = 570-640 nm

Scale bar: 50 μm

常见问题Q&A

Q1:Glucose Uptake Probe-Blue具体是通过哪种葡萄糖转运蛋白进入细胞的?
A:对于具体的每一种葡萄糖转运蛋白的特异性目前还没有详细的数据。
Q2:Glucose Uptake Probe-Blue被细胞摄入后,会被分解或代谢掉吗?
A:染料的荧光部分非常稳定,实验范围内的操作不会造成分解。另外,类葡萄糖的部位,从结构上考虑可能会被Hexokinase(己糖激酶)磷酸化,除此以外应该不会参加任何代谢反应。
Q3: Glucose Uptake Probe-Blue被活细胞摄入后,可以进行细胞固定的操作吗?
A:由于荧光探针会从细胞内漏出,染色后无法进行细胞固定。
Q4:Probe working solution可以长期保存吗?
A:Probe working solution无法长期保存,请现配现用。Probe stock solution冷冻可以保存一个月。
Q5: 无法观察到荧光信号变化的时候,应该怎么办?
A:预实验的时候可以先从稀释浓度(x250~x1,000)、染色时间(5 min~1 h)范围内进行摸索。
Q6:荧光背景高的时候,应该怎么办?
A:可能是由于有未被细胞摄入的残留荧光染料。请用WI Solution再多进行一次清洗操作。
Q7: 用WI solution清洗之后,荧光染料可以在细胞内停留多长时间?
A:一般在室温下可以保持在细胞内1 h左右,不同的细胞种类,时间可能会有一定差别。
Q8:可以对葡萄糖进行定量检测吗?
A:本产品不能用于葡萄糖的定量检测。如果需要定量检测培养基中的葡萄糖的消耗量或者细胞内的葡萄糖量,可以使用同仁化学研究所的Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)。
Q9: 可以对被细胞摄入的染料进行定量吗?
A:不可以对细胞摄入的染料进行定量。本试剂盒是葡萄糖摄取能力强弱或增减的检测试剂盒。
Q10: 如果无法通过葡萄糖的竞争性抑制细胞探针的摄取,该如何解决?
A:竞争性抑制是否发生取决于每个细胞中的葡萄糖转运蛋白的表达水平和类型。(例如:HepG2细胞)Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

在这种情况下,使用2-脱氧葡萄糖(2-DG)进行预处理可能会在葡萄糖竞争抑制方面产生差异。请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green(产品代码:UP02)的使用示例。

2-DG预处理对探针摄取的抑制和葡萄糖竞争性抑制(HepG2细胞)

1.将细胞接种在培养皿或微孔板中,并在5% CO₂培养箱(37°C)中培养过夜。

2.除去培养基[DMEM (10% FBS,高葡萄糖)]后,加入50 mmol/l 2-DG/培养基,并在5% CO₂培养箱(37℃)中培养细胞2小时。

3.清洗细胞两次。

4.加入预热的DMEM(无葡萄糖,无血清)并将细胞在5%CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

5.除去上清液后,加入预热的探针溶液并在5% CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

6.除去上清液后,用冷却的WI溶液(1x)洗涤细胞两次。

7.除去上清液后,加入冷却后的WI溶液(1x),并在室温下培养 5分钟。

8.除去上清液后,加入冷却的WI溶液(1x)。

9.荧光显微镜下观察细胞。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

Q11: 目前有过检测实例的细胞有哪些?
Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

Q12: 以下为不同细胞添加抑制剂后,葡萄糖摄取能力检测实验。
Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

规格性状

            Glucose Uptake Probe-Blue  ×1

WI Solution (50X)   5 ml ×1

供参考的可测次数

每个试剂盒大约可检测12枚35 mm dish或1枚96孔板

Quercetin-3-O-β-D-glucose-7-O-β-D-gentiobiosiden(Synonyms: Quercetin-3-O-beta-D-glucose-7-O-beta-D-gentiobioside)

天然产物 黄酮类 Flavonoids

Quercetin-3-O-β-D-glucose-7-O-β-D-gentiobiosiden (Synonyms: Quercetin-3-O-beta-D-glucose-7-O-beta-D-gentiobioside) 纯度: 98.97%

Quercetin-3-O-β-D-glucose-7-O-β-D-gentiobiosiden 是来自于Quercetin 的一种黄酮。

Quercetin-3-O-β-D-glucose-7-O-β-D-gentiobiosiden(Synonyms: Quercetin-3-O-beta-D-glucose-7-O-beta-D-gentiobioside)

Quercetin-3-O-β-D-glucose-7-O-β-D-gentiobiosiden Chemical Structure

CAS No. : 60778-02-1

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生物活性

Quercetin-3-O-β-D-glucose-7-O-β-D-gentiobiosiden is a flavonoid from Quercetin.

分子量

788.66

Formula

C33H40O22

CAS 号

60778-02-1

中文名称

槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

-20°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

溶解性数据
In Vitro: 

DMSO : 100 mg/mL (126.80 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.2680 mL 6.3399 mL 12.6797 mL
5 mM 0.2536 mL 1.2680 mL 2.5359 mL
10 mM 0.1268 mL 0.6340 mL 1.2680 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% saline

    Solubility: ≥ 10 mg/mL (12.68 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 10 mg/mL (12.68 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 100.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 10 mg/mL (12.68 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 10 mg/mL (12.68 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 100.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
*以上所有助溶剂都可在 Shanghai Jinpan Biotech Co Ltd 网站选购。

D-Glucose(Synonyms: 葡萄糖; Glucose; D-(+)-Glucose; Dextrose)

天然产物 糖类和糖苷 Saccharides and Glycosides

D-Glucose;(Synonyms: 葡萄糖; Glucose; D-(+)-Glucose; Dextrose) 纯度: ge;98.0%

D-Glucose (Glucose) 是一种单糖,是生物学中的重要碳水化合物。D-Glucose 是碳水化合物的甜味剂,是一般代谢的关键组成部分,并作为与细胞代谢状态以及生物和非生物应激反应有关的关键信号分子。

D-Glucose(Synonyms: 葡萄糖; Glucose;  D-(+)-Glucose;  Dextrose)

D-Glucose Chemical Structure

CAS No. : 50-99-7

规格 价格 是否有货 数量
Free Sample (0.1-0.5 mg) ; Apply now ;
500 mg ¥400 In-stock
1 g ¥500 In-stock
5 g ¥800 In-stock
10 g ; 询价 ;
50 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

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bull;相关化合物库:

  • Natural Product Library Plus
  • Drug Repurposing Compound Library Plus
  • FDA-Approved Drug Library Plus
  • FDA-Approved Drug Library Mini
  • Bioactive Compound Library Plus

生物活性

D-Glucose (Glucose), a monosaccharide, is an important carbohydrate in biology. D-Glucose is a carbohydrate sweetener and critical components of the general metabolism, and serve as critical signaling molecules in relation to both cellular metabolic status and biotic and abiotic stress response[1].

IC50 Target

Microbial Metabolite

;

Human Endogenous Metabolite

;

Clinical Trial

分子量

180.16

Formula

C6H12O6

CAS 号

50-99-7

中文名称

葡萄糖;右旋糖

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式
Powder -20deg;C 3 years
4deg;C 2 years
In solvent -80deg;C 6 months
-20deg;C 1 month
溶解性数据
In Vitro:;

H2O : ≥ 50 mg/mL (277.53 mM)

* “≥” means soluble, but saturation unknown.

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 5.5506 mL 27.7531 mL 55.5062 mL
5 mM 1.1101 mL 5.5506 mL 11.1012 mL
10 mM 0.5551 mL 2.7753 mL 5.5506 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

参考文献
  • [1]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [2]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [3]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [4]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [5]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [6]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [7]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [8]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [9]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [10]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [11]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [12]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [13]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [14]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [15]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [16]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [17]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

    [18]. Jin Jiaojiao, et al. D-glucose, D-galactose, and D-lactose non-enzyme quantitative and qualitative analysis method based on Cu foam electrode. Food Chem. 2015 May 15;175:485-93.

D-Glucose 6-phosphate(Synonyms: D-葡萄糖-6-磷酸)

天然产物 糖类和糖苷 Saccharides and Glycosides

D-Glucose 6-phosphate;(Synonyms: D-葡萄糖-6-磷酸) 纯度: ge;98.0%

D-Glucose 6-phosphate 称 6-磷酸葡萄糖,是葡萄糖经过磷酸化 (在第 6 号碳) 之后生成的分子。它是生物细胞中的常见分子,参与磷酸戊糖途径与糖酵解等生化途径。

D-Glucose 6-phosphate(Synonyms: D-葡萄糖-6-磷酸)

D-Glucose 6-phosphate Chemical Structure

CAS No. : 56-73-5

规格 价格 是否有货 数量
Free Sample (0.1-0.5 mg) ; Apply now ;
50 mg (1 M * 192 μL in Water) ¥800 In-stock
100 mg (1 M * 384 μL in Water) ¥1300 In-stock

* Please select Quantity before adding items.

生物活性

D-Glucose 6-phosphate is a glucose sugar phosphorylated at the hydroxy group on carbon 6.

IC50 Target

Human Endogenous Metabolite

;

体外研究
(In Vitro)

This dianion is very common in cells as the majority of glucose entering a cell will become phosphorylated in this way.

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

260.14

Formula

C6H13O9P

CAS 号

56-73-5

中文名称

D-葡萄糖-6-磷酸

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

Solution, -20deg;C, 2 years

溶解性数据
In Vitro:;

H2O : 250 mg/mL (961.02 mM; Need ultrasonic)

参考文献
  • [1]. Olsen BB, et al. Linked Hexokinase and Glucose-6-Phosphatase Activities Reflect Grade of Ovarian Malignancy. Mol Imaging Biol. 2018 Jul 9.