PD-1（人）ELISA试剂盒 PD-1 (human) ELISA Kit

发表于2024年4月8日由Whatman官网

PD-1（人）ELISA试剂盒
PD-1 (human) ELISA Kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

PD-1 (human) ELISA Kit

PD-1 (人) ELISA试剂盒

◆规格/处理

产品细节
别名	CD279；细胞程序性死亡蛋白1
产品规格	套
性能
应用	定量ELISA
特异性	在血清，血浆和细胞培养上清液中检测可溶性的人PD-1（sPD-1）。
交叉反应	人
数量	1×96 wells
灵敏度	1.6 pg/mL
检测范围	3.125 ~200 pg/mL
样品类型	细胞培养上清液、血浆、血清
分析类型	夹心法
检测类型	比色法
其他产品数据	UniProt link Q15116: PD-1 (human)
登记号	Q15116
运输和处理
运输	冰袋（BI）
短期储存	+4°C
长期储存	+4°C
建议保存方法	●　标准品配制后，分装好并储存在-20°C。　●　避免反复冻融。　●　微孔板和试剂使用前应回温至室温。
使用/稳定性	有效期为生产后的12个月。请参阅ELISA试剂盒上的失效日期。

◆描述

PD-1（也称为细胞程序性死亡蛋白1；CD279）是CD28/CTLA-4免疫受体家族的I型跨膜蛋白，参与信号和免疫调节。CD28/CTLA-4家族成员可以促进T细胞活性（CD28和ICOS），也可以下调T细胞活性（CTLA-4和PD-1）。PD-1在活化的T细胞、B细胞、骨髓细胞和胸腺细胞中均有表达。PD-1与PD-L1（B7-H1；CD274）或PD-L2（B7-DC；CD273）结合后，可抑制TCR介导的T细胞增殖和生成IL-1、IL-4、IL-10和IFN-γ。另外，PD-1结合后也抑制BCR介导的信号传导。PD-1缺陷型小鼠会有外周耐受性缺陷，会自发发展为自身免疫疾病。可溶性的PD-1（sPD-1）能在活化的免疫细胞中表达，并且可以在血清/血浆中分泌。sPD-1或sPD-L1等可溶性检查点，会参与到正负免疫调节，它们在血清、血浆水平的变化会影响癌症的发展、预测和治疗。不同癌症的患者，所检测到sPD-1或sPD-L1水平会有所升高。PD-1（人）ELISA试剂盒是为检测不同的生物体液中特异性sPD-1（人）而开发的。

PD-1（人）ELISA试剂盒 PD-1 (human) ELISA Kit

标准曲线

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
AG-45B-0015-KI01	PD-1 (human) ELISA Kit PD-1 (人) ELISA试剂盒	96 wells

ER-Protein Capture Kit 特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

发表于2024年4月8日由Whatman官网

ER-Protein Capture Kit
特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

产品特性
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参考文献

特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

ER-Protein Capture Kit

ER-Protein Capture kit是一款利用荧光标记物特异性标记ER驻留蛋白，再使用标签捕获抗体通过免疫沉淀法纯化标记蛋白的试剂盒。可用于ER相关蛋白的全面鉴定与定量分析有或无刺激（例如内质网应激）下靶蛋白的ER驻留量。

※　本产品是funakoshi基于京都大学工学研究科浜地格教授、田村朋则讲师的研究成果商品化销售的产品。

※　本产品仅供研究使用。研究以外不可使用。

◆ER蛋白的回收方法与问题点

ER （内质网；Endoplasmic Reticulum）是一种通常在细胞内占据约20%体积的细胞器，结构非常复杂且遍布整个细胞。ER是负责细胞内蛋白质生物合成的中央细胞器，在多肽链合成、通过伴侣蛋白适当折叠、排除异常蛋白等，从生物合成到品质管理中起着重要作用。ER还担任分泌路径的一部分，是细胞膜蛋白和细胞外分泌蛋白通过的细胞器。另外，它还被认为对于脂质代谢和脂肪滴形成十分重要，因此能够分离、鉴定并定量分析ER蛋白的方法备受期待。然而，不同于其他细胞器，特异性纯化ER的的技术十分贫乏，选择性回收ER蛋白并不容易。

ER Protein Capture Kit是由京都大学浜地格教授、田村朋则讲师等开发的基于ER驻留蛋白标记技术商品化的ER蛋白选择性标记、纯化试剂盒。通过使用ER驻留蛋白标记试剂ERM （ER-localizable Reactive Molecule），可以利用荧光标记物标记ER驻留蛋白，然后通过针对该标记物的特异性抗体进行纯化，选择性回收ER蛋白。无需超速离心机等特殊的机器，仅需简单操作便可纯化ER蛋白。除了能够通过蛋白组学进行全面鉴定外，本产品还适用于相对定量分析各种刺激处理下的ER驻留量。

◆试剂盒内容

本试剂盒由两部分组成。

A：ER驻留蛋白标记试剂ERM

A：（本试剂与产品名称为ERseeing、产品编号FDV-0038为同一试剂。可单独购买，也可以用作ER成像试剂）

B：标签捕获抗体（纯化兔多克隆IgG抗体）

A：※ 产品不包含用于细胞裂解液制备用的溶解缓冲液或免疫沉淀所需的Protein A / G树脂等。请另行购买。

◆原理和实验流程

ER驻留蛋白标记试剂ERM是一种在ER驻留性绿色荧光色素（Rhodol衍生物）上缀合蛋白标记基团的化合物。将ERM添加到活细胞后，由于色素部分的特性，显示出较高的ER驻留性。在ER中迅速浓缩后，通过蛋白标记基团用荧光标记物标记ER蛋白物（Step-1）。标记反应后破碎细胞制备细胞裂解液（Step-2），然后通过使用标签捕获抗体（抗Rhodol抗体）进行免疫沉淀（Step-3），可以选择性地回收被ERM标记的ER蛋白。由于回收的蛋白上带有荧光基团，使用SDS-PAGE分离后，可以通过CBB/银染或荧光成像仪检测出来（Step-4）。进行SDS-PAGE分离后，可以通过LC / MS进行全面蛋白组学分析或使用任何抗体的蛋白印迹法鉴定ER蛋白。

ER-Protein Capture Kit 特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

◆原著论文

Fujisawa et al., J. Am. Chem. Soc., 140, 17060～17070 (2018). Chemical Profiling of the Endoplasmic Reticulum Proteome Using Designer Labeling Reagents.

◆实验参考数据

ER-Protein Capture Kit 特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

■ ERM的激发/发射光谱

■ 激发光谱（蓝）以及发射光谱（绿）

■ ※ 适用于普通的绿色荧光色素FITC观察条件

ER-Protein Capture Kit 特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

■ ER特异性检验

■ 通过与各种细胞器标记共染色评价本试剂的ER特异性。观察到ERM（100 nM）与ER标记试剂高度共定位（皮尔逊相关系数>0.9）。另一方面，未观察到本试剂与溶酶体标记、线粒体标记的共定位。高尔基体标记观察到部分共定位，应该是因为本试剂所标记的蛋白通过Golgi体运输从ER转移至分泌路径。此外，添加ER-Golgi运输抑制剂的话，会减少与高尔基体的共定位（详细请参考原著论文）。

◆应用实例

通过蛋白组学全面分析回收蛋白

使用ERM (100 nM)处理HeLa细胞后，破碎细胞制备细胞裂解液。在裂解液中加入标签捕获抗体，使用Protein A磁珠进行免疫沉淀回收标记蛋白。将回收的蛋白通过SDS-PAGE分离后，切出每个条带，在凝胶中用胰蛋白酶/ Lys-C消化制备LC/MS样品。通过MS分析鉴定出共146种蛋白，其中63种蛋白是数据库上的ER蛋白，或是个别论文中确认了ER驻留的蛋白。73种蛋白作为细胞膜、细胞外分泌蛋白以及高尔基体蛋白被鉴定出来，它们都是存在于细胞外分泌路径的蛋白。由于存在于细胞外分泌途径的蛋白会途经ER，当这些蛋白在ER的时候便会被标记。因此，检测出来的蛋白中ER蛋白与途经ER的蛋白约占93%。本实验中检测出与ER无关的蛋白有10种，约占7%。

ER-Protein Capture Kit 特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

R应激引起的ER驻留蛋白变动量的定量评价

通过SILAC定量分析法分析ER应激诱导的ER驻留蛋白的变动量。准备两份细胞，一份在SILAC Heavy标记培养基中培养，另一份在Light标记培养基中培养。在Heavy标记培养基的细胞中添加ER应激诱导试剂Tunicamycin培养4 h。而Light标记培养基无需任何处理培养4 h。之后，使用ERM（100 nM）处理1 h，分别制备细胞裂解液，再以1:1的比例混合。通过免疫沉淀法回收混合裂解液中的标记蛋白，然后与上述实验一样，制备LC/MS用样品。检测出了87种可相对定量的蛋白，再通过SILAC法算出由ER应激引起的变动量。其中6种蛋白因ER应激在ER上的存在量增加了两倍以上。

ER-Protein Capture Kit 特异性标记、纯化ER驻留蛋白的试剂盒

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
FDV-0039	ER-Protein Capture Kit	1 Kit

NBR1 ELISA kit

发表于2024年4月7日由Whatman官网

NBR1 ELISA kit

产品特性
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参考文献

细胞自噬研究 NBR1 ELISA kit

自噬（autophagy）是指从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等成分形成自噬体（autophagosome），并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物，以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。自噬是继细胞凋亡（apoptosis）后，当前生命科学热门的研究领域。

自噬过程示意图

NBR1 ELISA kit

ELISA法定量检测自噬标记物——NBR1 和 p62

NBR1 和 p62 这两个蛋白的功能类似于支架蛋白，在自噬过程中起着转运和降解蛋白的功能。NBR1和 p62 ELISA 试剂盒可以灵敏地定量检测人、大鼠、小鼠细胞裂解液中自噬标记物 NBR1 和 p62 的含量。此试剂盒具有如下优点：

●　灵敏度高，检测 NBR1 可低至 66 pg/mL、p62 可低至 100 pg/mL。

●　简便地操作步骤节省宝贵时间，减少错误。

●　结果比 Western Blot 更可靠。

●　适用于高通量筛选。

使用 p62 ELISA 试剂盒检测自噬标记物

图Ａ图Ｂ图Ｃ

自噬诱导药物处理人乳腺癌细胞。经药物处理６小时和12小时后，细胞裂解，使用 p62 ELISA 试剂盒定量检测、p62 抗体和 LC3-II 抗体进行免疫印迹。经药物处理后，自噬标记物表达水平有变化，p62 蛋白水平降低（Ａ和Ｂ图），LC3-II 水平上升（Ｃ图）

产品信息

产品编号	产品名称	规格
ADI-900-211	NBR1 ELISA Kit	1X96孔
ADI-900-212	p62 ELISA Kit	1X96孔

您可能感兴趣的产品：

产品编号	产品名称	产品编号	产品名称	产品编号	产品名称
ADI-900-138	Bax	ADI-900-133	Bcl-2	ADI-900-152	Erk1/2
ADI-900-106	Phospho Jnk1/2	ADI-900-144	GSK-3β	ADI-EKS-715	HSP70
ADI-EKS-895	HSP90α	ADI-900-123A	Phospho GSK-3β	ALX-850-057	p53
AG-45A-0029	SIRT1	AG-45A-0030	SIRT2	ADI-960-070	p53/MDM2

自噬化合物库

SCREEN-WELL^® Autophagy Library是研究促自噬和抗自噬分子的有力工具。化合物库中包含96种已知的自噬诱导剂或者抑制剂，可作用于与自噬相关的蛋白或受体，包括：mTOR/PI3K、cAMP、热休克蛋白、钙调蛋白、表观遗传调控蛋白、细胞骨架等。

产品编号	产品名称	规格
BML-2837-0500	Autophagy Library	1 Library	500 μL/well
BML-2837-0100	Autophagy Library	1 Library	100 μL/well

相关化合物

产品编号	产品名称	产品编号	产品名称
BML-CM110	Bafilomycin A1	BML-A275	Rapamycin
ALX-550-087	Clonidine	BML-EI397	SMER28
ALX-550-253	Loperamide	ALX-550-095	Tamoxifen
BML-PI102	MG-132	ALX-550-306	Verapamil

Cyto-ID™自噬检测试剂盒

Enzo 公司提供的新产品 Autophagy Detection Kit 内含 Enzo 申请专利的染料，在活细胞内可以染色，与自噬体特异性结合，在荧光显微镜下镜检。

NBR1 ELISA kit

Starvation 诱导细胞自噬，左图绿色为自噬体，右图为对照。蓝色为荧光染料 Hoechst 染细胞核。

相关产品：

产品编号	产品名称	规格
ENZ-51034	Cyto-ID™ Green detection kit	1 Kit
ENZ-51005	Cyto-ID™ Red detection kit (GFP-Certified™)	1 Kit
ENZ-51015	Cyto-ID™ Red cytotoxicity kit (GFP-Certified™)	1 Kit
ENZ-52252	MM 4-64 Fluorescent dye for autophagy in yeast	1 mg

自噬蛋白抗体

　　 Enzo Life Sciences 提供大量抗体用于自噬研究，单抗、多抗；可识别多种物种：人、小鼠、大鼠等；应用于多种实验：IHC、WB、ICC、IP等。

产品编号	产品名称	规格
ALX-803-080-C100	LC3B,mAb(5F10)	100 μg
BML-PW1125-0025	NBR1(human), pAb	25 μL
ALX-215-065-1	mTOR(human FRB Domain), pAb	1 vial
ADI-905-721-100	Beclin-1, pAb	100 μg
ADI-905-687-100	mTOR, pAb	100 μg
BML-PW9860-0025	P62(human), pAb	25 μL

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
ADI-900-211	NBR1 ELISA kit NBR1酶联免疫试剂盒	1×96孔等	–	–

ER-ID® 绿色检测试剂盒、高尔基体/内质网/细胞核检测试剂盒 ER-ID® Green assay kit、Organelle-ID RGB® III assay kit

发表于2024年4月7日由Whatman官网

ER-ID^® 绿色检测试剂盒、高尔基体/内质网/细胞核检测试剂盒
ER-ID^® Green assay kit、Organelle-ID RGB® III assay kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

细胞凋亡/自噬检测试剂盒 ER-ID® 绿色检测试剂盒、高尔基体/内质网/细胞核检测试剂盒 ER-ID® Green assay kit、Organelle-ID RGB® III assay kit

细胞自噬检测试剂盒 Cyto-ID^® Autophagy Detection Kit – ENZ-51031

　　该染料进行过优化，可在活细胞内进行实验，无需细胞转染。

　　2014 年 6 月的 Nature 杂志刊登细胞自噬在抗帕金森病方面，抑制位于线粒体中的去泛素酶 USP30 的活性会增强神经元中受损线粒体的自噬和清理，有益于帕金森病的治疗。2013 年 7 月 Journal of Clinical Investigation 杂志刊登研究Ⅱ型糖尿病个体自噬作用可抑制毒性的胰岛淀粉样多肽（IAPP）的过量积累，从而保护胰腺 β 细胞免于受损。研究者希望早日找到保护胰腺 β 细胞的靶点以开发出Ⅱ型糖尿病的新疗法。美国加州大学洛杉矶分校的生物学家发现，果蝇机体和大脑的衰老延缓与激活肠道或神经系统中的关键的能量传感器 AMPK 基因后引起的自噬过程加快密切相关。Cyto-ID^® 自噬检测试剂盒是 Enzo 公司的拳头产品，该产品可代替传统 LC3-GFP 法，通过荧光示踪物来选择性检测自噬通路中的各种囊泡包括自噬前体、自噬体和自溶酶体，用于流式细胞仪，无需转染，就能在荧光显微镜下跟踪活细胞的自噬过程进行定量分析，或用流式细胞仪进行高通量筛选，甚至能标记原代细胞。并且该产品可以进行自噬通路的动力学分析，为研究者展现自噬体形成和消除之间的动态平衡。Cyto-ID^® 自噬检测试剂盒也可以与检测其他细胞器的染料结合使用：与 Mito-ID^® Red 联用区分检测细胞自噬和线粒体自噬，与 PROTEOSTAT^® Protein aggregation assay 联用检测聚集小体及小体中的变性蛋白，与 Lyso-ID ^® Red detection kit（GFP-Certified）联用区分检测自噬体和溶酶体，与 Lyso-ID^® Red cytotoxicity kit（GFP-Certified）kit 联用监测自噬与细胞毒性的相关性。

◆原理

　　该试剂盒利用专利性的染料，可选择性对前自噬体、自噬体和自噬性溶酶体进行染色，在荧光下显绿色，而对溶酶体的染色极少。

◆优点・特色

●　无需进行细胞转染代替传统的 GFP-LC3 法
●　新颖的荧光探针可特异性地检测最低溶酶体背景的自噬囊泡
●　特别适用于筛选自噬激活剂与抑制剂

ER-ID® 绿色检测试剂盒、高尔基体/内质网/细胞核检测试剂盒 ER-ID® Green assay kit、Organelle-ID RGB® III assay kit

Starvation 诱导细胞自噬，左图绿色为自噬体，右图为对照。蓝色为荧光染料 Hoechst 染细胞核。

General Cells	Cancer Cells
osteosarcoma-derived cells	melanoma cells
hepatocytes	ovarian cancer cells
Jurkat T cells	breast cancer cells
bovine aortic endothelial cells	cervical adenocarcinoma cells
B-lymphoblastoid cells	colon adenocarcinoma cells
Chinese hamster ovary (CHO) cells	SK-N-SH neuroblastoma cells

相关产品资料请点击下载：活细胞荧光分析 Ver.3

※ 本页面产品仅供研究用。研究以外不可使用。

相关产品

产品名称	特点
分析试剂盒
p62 ELISA kit	用于自噬研究，高效、定量的 p62 ELISA 试剂盒，可检测低至 100 pg/mL的 p62 进行。
NBR1 ELISA kit	率先投放市场，用于自噬研究的 NBR1 定量检测试剂盒，可检测65 pg/mL的 NBR1。
SCREEN-WELL^® Autophagy library	不同结构和机制的化合物，用于胞内和体外研究，促进/抗自噬分子的作用机制。
抗体
LC3, mAb (2G6) (fluorescein labeled)	识别所有单体（LC3-I）和 PE 交联（LC3-II）形式的人LC3/GABARAP 蛋白 (Atg8 同系物 ) 。
LC3, mAb (5H3)	识别人 LC3。识别两种形式的内源性 LC3。
LC3B, mAb (2G6)	识别人、小鼠、大鼠、猴和仓鼠 LC3B。识别两种形式的内源性 LC3B。
LC3B, mAb (5F10)	识别人、小鼠、大鼠、狗和仓鼠 LC3B。识别这两种形式的内源性LC3B。
小分子
3-Methyladenine	PI3 激酶抑制剂，著名的自噬抑制剂。
Rapamycin	具有强效免疫抑制剂的活性。它与 FKBP12 形成的复合物结合一个效应子，从而抑制 IL-2 和其它生长因子。

Cyto-ID^®检测试剂盒Ｑ&Ａ

Q： Cyto-ID^®自噬检测试剂与活细胞孵育的最长时间是多少（几分钟/几小时/几天）？
A：我们建议37℃孵育不超过30分钟。很多实验表明，孵育１小时不会伤害细胞。孵育超过１小时，一些细胞看上去状态不好。

Q：是否可用荧光显微镜观察3Ｄ培养细胞的自噬？
A：我们没有用该染料染过3D细胞，但是一小撮细胞是可以染色的。活体组织的话，由于染料的渗透性不好，不能进入样本的内部，所以效果

不理想。染白细胞是可以。

Q：用双重染料染在37℃孵育30分钟后，细胞状态不好开始皱缩。有些细胞也从板上脱离，阳性对照和 DMSO 对照没有观察到特异性染色。

A：    对于比较敏感的细胞，优化流程如下：
          1. 使用 PBS/5%FBS 或者完全培养基作为 assay buffer，最好不含酚红。
          2. 如果细胞状态仍然不好，建议染色时间缩短至15~20分钟。
          3. 减少染料的浓度至 1000× 稀释。需要显微镜观察时延长荧光照射的时间。
          4. 可能光褪色会导致信号模糊。建议使用封片剂防止光褪色。

Q：用流式检测的话，样品在用 Cyto-ID^®自噬检测试剂孵育后多久可用流式观察？操作手册是说30分钟。是否可以在检测之前短暂的将样品

放置在冰上？

A：可以将样品放在冰上延长孵育的时间。一般的经验法则，尽可能缩短活细胞与染料的结合。缺氧，低温或者其他应激状态也可以诱导自噬。

Q： GFP-Certified™ 细胞凋亡/坏死检测试剂盒（ENZ-51002），Cyto-ID^®自噬检测试剂盒（ENZ-51031）是否可以同时染色，检测细胞

凋亡，坏死和自噬？

A： GFP-Certified™ 细胞凋亡/坏死检测试剂盒（ENZ-51002）和Cyto-ID^®检测试剂盒（ENZ-51031）不能配合使用，因为细胞凋亡和自噬

检测的染料都发绿色荧光。这两个试剂盒可以平行使用。比如，用十字孢碱（Staurosporine）处理细胞，一部分样品用GFP-Certified^TM

细胞凋亡/坏死检测试剂盒检测，一部分样品用Cyto-ID^®检测试剂盒检测。

Q： Cyto-ID^®自噬检测试剂盒（ENZ-51031）的Cyto-ID^®自噬检测试剂能否与ProteoStat^®蛋白聚集检测（ENZ-51023）的ProteoStat^®

检测试剂联合使用？

A： Cyto-ID^®绿色自噬检测试剂与 ProteoStat^®检测试剂发的荧光颜色不同，他们可用于同一实验，客户需要优化实验流程。

Q： Cyto-ID^®自噬检测试剂的原理是什么？
A：染料是申请专利的。该染料是阳离子两性示踪剂（CAT）染料，跟很多阳离子化合物一样可以快速进入细胞。染料穿过细胞膜双分子层后被

动扩散，不需要蛋白结合或者转运子活性。可滴定部分的筛选使的染料不会再溶酶体聚集，能够标记自噬通道相关的液泡。另外，染料的

发射光密度增强后可以标记自噬液泡相关片层膜结构。我们可以提供染料染自噬液泡的相关数据。

诱导自噬溶酶体，比如用氯喹或者 baflimyocin 处理后，会导致荧光变亮（250~300%）。雷帕霉素诱导自噬后能够用 3-MA 抑制。在

EBSS 中氨基酸缺乏会导致１小时后在自噬液泡中染料的积累，这种积累是可逆的（补充营养后即可恢复）。我们有一系列用于研究自噬的

化合物（Screen-Well^®Autophagy library）

Q：与单丹磺酰尸胺（MDC）相比，Cyto-ID^®自噬检测试剂有哪些优势？

A： MDC 需要 365 nm UV荧光照明，与通常流式配置的488n激发源不兼容。Cyto-ID^®自噬染料是488 nm激发波长，绿色的发射荧光，可以

高亮自噬通道不同的液泡成分。需要注意的是，与 lysomotrophic 染料不同，MDC，LysoTrackerTMRed，吖啶橙主要是染溶酶体的，

Cyto- ID^®自噬染料只能染一点点溶酶体，主要是染自噬溶酶体和早期自噬部分的选择标记物。

Q：与GFP-LC3转染细胞相比，Cyto-ID^®自噬检测试剂盒（ENZ-51031）的优势是什么？

A： Cyto-ID^®检测试剂盒（ENZ-51031）的最大优势是不用转染细胞。转染很短暂，不同实验需要再购买相关试剂。由于细胞过表达，会导

致 GFP-LC3 聚集，结果呈假阳性。转染效率低于100%，有些细胞不会表达必要的 GFP 组件。该试剂盒检测的自噬，细胞群的一致性会更

好。不需要每个细胞系都进行转染。也可以标记原代。细胞原代细胞不容易进行转染。

Q：有哪些细胞系或者原代细胞可用 Cyto-ID^®自噬检测试剂？
A：用该试剂盒见检测过的代表性的细胞和细胞系包括肝细胞，SK-N-SH 神经瘤细胞，CHO 细胞，骨肉瘤来源细胞，黑素留细胞，乳腺癌细胞，

宫颈癌细胞，卵巢癌细胞，Ｂ淋巴瘤细胞，结肠癌细胞，HepG 细胞，Jurkat T 细胞，牛大动脉内皮细胞（BAEC）。

Q： Cyto-ID^®自噬检测试剂能否与其他染料配合使用，区分细胞核内体和自噬内涵体？
A： Cyto-ID^®红色长期示踪剂染料（ENZ-51037）能够染细胞质膜，通过细胞内吞存在于细胞中。Cyto-ID^®红色染料与 Cyto-ID^®自噬检测试

剂能够高亮异体吞噬vs自噬。也可以 Cyto-ID^®自噬检测试剂与 Lyso-ID^®红色染料或者 LysoTracker™ 红色染料进行活细胞染色，荧光显微

镜观察。

Q： Cyto-ID^®自噬检测试剂的稳定性如何？
A：荧光染料会发生光褪色，但是这种染料比荧光素更稳定。按照操作手册出来荧光染料。

Q： Cyto-ID^®自噬检测试剂盒染色后是否可固定细胞？
A：在操作手册中提供了固定细胞的流程。不推荐用表面活性剂给细胞打孔，定位的荧光染料丢失。

Q：活细胞检测时，荧光信号强度可维持多长时间？
A：细胞诱导后发生自噬，在分析前染色。诱导时间少于１小时或者诱导几天，诱导时间取决于自噬诱导剂。我们没有在活细胞上进行长时间的

染色，有客户发现可以至少染色24小时。

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
ENZ-51025-K500	ER-ID^® Green assay kit ER-ID^® 绿色检测试剂盒	500 assays/100 assays	–	–
ENZ-51032-K100	Organelle-ID RGB^® III assay kit 高尔基体/内质网/细胞核检测试剂盒	500 assays/100 assays	–	–

PROTEOSTAT® Aggresome detection kit 蛋白聚集小体检测试剂盒

发表于2024年4月7日由Whatman官网

PROTEOSTAT^® Aggresome detection kit
蛋白聚集小体检测试剂盒

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

蛋白聚集小体检测试剂盒 PROTEOSTAT® Aggresome detection kit 蛋白聚集小体检测试剂盒

PROTEOSTAT^® Aggresome detection kit

◆原理

聚集小体（Aggresome）是由一群不正常堆叠在一起的蛋白质所形成的包涵体（Inclusion Bodies）。聚集小体的出现往往也表明细胞正处于某种应激状态，比如高温、病毒感染、活性氧自由基攻击等。聚集体通常是响应细胞应激而形成，并通过分离错误折叠的蛋白质提供细胞保护机制，最终导致它们被自噬清除。此外，蛋白质聚集体的形成是多种人类疾病的标志，例如阿尔茨海默氏症、帕金森氏症、肌萎缩侧索硬化症或酒精性肝病。

PROTEOSTAT^® Aggresome detection kit中包含的 PROTEOSTAT^®是一种分子转子染料，在溶液中沿着单个中心键的自由分子内旋转可防止荧光产生。当它特异地插入到错误折叠和聚集的蛋白中的交叉β-sheet四级结构中，旋转受到抑制并导致发出强烈的荧光。

PROTEOSTAT^®聚集小体检测试剂盒提供了一种快速、特异、定量的方法来标记细胞中的聚集小体，且无需进行人工蛋白定点突变。PROTEOSTAT^®染料已在广泛的条件下对多种小分子调节剂进行验证，适用于具有治疗价值的化学物的筛选。此外，本试剂盒还适用于多重免疫荧光，以在自噬和聚集体形成的背景下研究您的目标分子。

◆试剂盒组成

组分	包装
PROTEOSTAT^® Aggresome Detection Reagent	10 μL
Hoechst 33342 Nuclear Stain	50 μL
Proteasome Inhibitor (MG-132)	120 nM
10×Assay Buffer	25 mL

◆特点

●　提供基于细胞的灵敏的药物反应性测定，以在真实的细胞环境中识别与神经退行性疾病相关的抑制剂

●　可靠且简单的检测，不需要非生理性蛋白质突变或基因工程细胞系

●　作用条件广泛，适用于筛选具有潜在治疗价值的小分子化合物

●　已进行优化以兼容免疫染色

●　可通过流式细胞术轻松量化聚集体和相关包涵体

●　可用于神经退行性疾病、肝病、毒理学研究等的研究

◆案例・应用

■　应用实例 1：流式细胞术检测聚集小体

PROTEOSTAT® Aggresome detection kit 蛋白聚集小体检测试剂盒

流式细胞术的分析：Jurkat细胞在37°C下用 0.2% DMSO对照或用5 µM MG-132诱导过夜。处理后，将细胞固定并与PROTEOSTAT^® 染料一起孵育，无需洗涤即通过流式细胞术在FL3通道中使用488 nm激光进行分析。在 MG-132处理的细胞中，红色荧光信号增加约3倍。所描述的测定允许评估蛋白质聚集的影响。

脂肪形成检测试剂盒 Adipogenesis assay kit

发表于2024年4月7日由Whatman官网

脂肪形成检测试剂盒
Adipogenesis assay kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

脂肪形成检测试剂盒 脂肪形成检测试剂盒 Adipogenesis assay kit

Adipogenesis assay kit

用于3T3L-1模型中增强诱导和检测脂肪形成。

●　包含经优化的脂肪细胞分化试剂与后续脂质比色检测试剂

●　包含增强溶液，可优化诱导脂肪形成

●　可用于筛选和检测与脂肪形成的激动剂/拮抗剂药物

脂肪形成试剂盒提供诱导与检测脂肪形成所需的所有试剂。经优化后的分化试剂、胰岛素溶液以及增强溶液可顺利诱导脂肪细胞。脂肪形成染料能够可视化分化过程，还能使用分光光度计或酶标仪进行测量。

脂肪形成检测试剂盒 Adipogenesis assay kit

◆产品信息

应用	比色检测
应用详情	用于脂肪形成的诱导与比色检测
规格	可供5×24孔板或225 cm² 组织培养板使用
使用/储存条件	分化溶液、胰岛素溶液、增强溶液于-20℃储存。其他试剂均可室温储存。
运输条件	冰袋
长期储存	-20℃
试剂盒组成	1000×分化溶液（地塞米松，IBMX） 1000×胰岛素溶液 1000×增强溶液（罗格列酮） 1×细胞固定剂 1×脂肪形成染料（油红O） 1×提取液

关于脂肪形成

脂肪细胞的细胞周期调节与分化在肥胖发展及其生理学起到重要作用。3T3-L1细胞系是研究成纤维细胞向脂肪细胞分化中最常用的模型之一。

3T3-L1细胞分化为脂肪细胞需要三种主要成分：胰岛素或类胰岛素生长因子，地塞米松（DXM），以及3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）。此外，罗格列酮是一种能够与PPARγ结合并使脂肪细胞对胰岛素敏感的噻唑烷二酮，能够强化脂肪形成。

在分化过程中使用胰岛素、DXM以及IBMX诱导24 h后，3T3-L1细胞在汇合后进行有丝分裂，随后停止生长。然后，细胞会转化为脂肪细胞并在诱导第三天表达晚期分化标志物。细胞停止生长是终末脂肪细胞分化的必要条件。诱导5-7天后，细胞从细长形的成纤维细胞转变为圆形细胞，脂滴开始积聚。

注意事项：RUO-仅供研究用

◆参考文献

The origin and definition of brite versus white and classical brown adipocytes: M. Rosenwald, et al.; Adipocyte 3, 4 (2014), 摘要; 全文

Lipid droplets characterization in adipocyte differentiated 3T3-L1 cells: size and optical density distribution: V. Rizzatti, et al.; Eur. J. Histochem. 57, e24 (2013), 摘要; 全文

Protocol for effective differentiation of 3T3-L1 cells to adipocytes: K. Zebisch, et al.; Anal. Biochem. 425, 88 (2012), 摘要

Current methods of adipogenic differentiation of mesenchymal stem cells: M. A. Scott, et al.; Stem Cells Dev. 20, 1793 (2011), 摘要; 全文

Rosiglitazone promotes development of a novel adipocyte population from bone marrow-derived circulating progenitor cells: J. T. Crossno, et al.; J. Clin. Invest. 116, 3220 (2006), 摘要; 全文

Novel genes regulated by the insulin sensitizer rosiglitazone during adipocyte differentiation: T. Albrektsen, et al.; Diabetes 51, 1042 (2002), 摘要; 全文

TNF-alpha inhibits 3T3-L1 adipocyte differentiation without downregulating the expression of C/EBPbeta and delta: S. Kurebayashi, et al.; Endocr. J. 48, 249 (2001), 摘要

A synthetic antagonist for the peroxisome proliferator-activated receptor gamma inhibits adipocyte differentiation: H. M. Wright, et al.; J. Biol. Chem. 275, 1873 (2000), 摘要; 全文

Adipocyte differentiation and gene expression: J. M. Ntambi, et al.; J. Nutr. 130, (2000), 3122S, 摘要; 全文

CREB activation induces adipogenesis in 3T3-L1 cells: J. E. Reusch, et al.; Mol. Cell Biol. 20, 1008 (2000), 摘要; 全文

产品列表

Wako BGSTAR B Kit

发表于2024年4月6日由Whatman官网

Wako BGSTAR B Kit

摘要

检测原理

本试剂添加了对硝基苯胺合成底物,可从鲎血球提取物中有选择性的除去内毒素感受态因子。主要试剂中含有的（1→3）-β-D-葡聚糖感受态因子（FactorG）作用于（1→3）-β-D-葡聚糖，通过鲎血液凝固反应〈此反应对主要试剂中（1→3）-β-D-葡聚糖有依赖性〉，级联系统被活化。此反应生成的凝乳酶（Clotting Enzyme）可分解对硝基苯胺合成底物，使对硝基苯胺游离。游离态对硝基苯胺的量可利用显色剂，通过重氮偶合进行比色定量。

<微生物细胞壁成分测定试剂及装置> <微生物细胞壁成分测定试剂>

β-葡聚糖特异性检测。

只包含主要试剂、主要试剂溶剂的试剂盒。

特征

1.新型简便的β-葡聚糖测定鲎试剂。

2.可发挥高β-葡聚糖特异性。

3.可高灵敏度检测。

成分组成

·β-葡聚糖检测试剂主要试剂

·主要试剂溶解缓冲剂

产品编号	品名	包装
636-01061	BGSTAR B Kit	20tests

泪液粘蛋白检测试剂盒 Tear Mucin Assay kit

发表于2024年4月6日由Whatman官网

泪液粘蛋白检测试剂盒
Tear Mucin Assay kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

泪液粘蛋白检测试剂盒

Tear Mucin Assay kit

　　本试剂盒的原理是在碱性条件下，O-聚糖通过β氢脱离反应从核心蛋白中脱离的同时，在糖链还原末端标记荧光，根据荧光强度检测泪液中的粘蛋白含量。

◆背景

　　粘蛋白是泪液和眼表上皮顶端细胞膜的主要组分，由O-糖链结合核心蛋白而成。其中，核心蛋白是由10-80氨基酸残基，通过高度O-糖基化的丝氨酸和苏氨酸残基串联重复结构域而组成。，而具有亲水性质的O-聚糖占粘蛋白重量的一半以上（图1）。重糖基化的粘蛋白具有高负电荷和亲水性，该特性具有阻止病原体粘附或穿透进入上皮的功能（图2）。干眼病患者眼表面粘蛋白及其分泌均发生改变（图2）。在眼表上皮，存在三种类型的粘蛋白，由结膜杯状细胞表达的大凝胶形成的粘蛋白MUC5AC，一些来自泪腺腺泡的细胞表达小溶性粘蛋白MUC7，角膜和结膜上皮细胞表达膜相关粘蛋白MUC1,4和16（图2）。

泪液粘蛋白检测试剂盒 Tear Mucin Assay kit

　图1 粘蛋白的构造

泪液粘蛋白检测试剂盒 Tear Mucin Assay kit

图2　围绕在角膜表面的粘蛋白表达以及泪液粘蛋白的屏障功能

泪液粘蛋白检测试剂盒 Tear Mucin Assay kit

图3 泪液粘蛋白的防护机能

　　泪液中粘蛋白的减少被认为是干眼症的病因。泪液中的粘蛋白可大致分为两大类，分别是分泌型粘蛋白以及膜型粘蛋白（图2）。分泌型粘蛋白包括MUC5AC（由结膜杯状细胞分泌）、MUC7（由泪腺分泌）；膜型粘蛋白包括MUC1、MUC4、MUC16（存在于角膜上皮的细胞膜上）等。

◆特点

● 　本试剂盒的原理是在碱性条件下，O-聚糖通过β氢脱离反应从核心蛋白中脱离的同时，在糖链还原末端标记荧光，根据荧光强度检测

　　泪液中的粘蛋白含量。

● 　使用检测泪液量的泪液分泌试纸可检测泪液中粘蛋白的含量。
● 　可用于针对干眼症等眼部问题的药物及保健食品的研发以及眼科相关研究。

◆试剂盒组成

NO.	组成	规格	数量	贮存温度
1	提取液	30 mL	１	4～10℃
2	凝胶过滤载体	45 mL	１
3	标准液（100 µg/mL N-乙酰）	1.0 mL	１
4	试剂 A	0.3 mL	１
5	试剂 B	1.5 mL	１
6	反应停止液	15 mL	１
7	空柱	1 mL用	５０
8	离心管	－	５０

该试剂盒包含检测数目泪液黏蛋白所有组件

◆应用

　　用于测定泪液中粘蛋白含量。

◆测定原理

　　粘蛋白属于高分子（1000 kda-10000 kda）重糖基化蛋白家族，主要由富含苏氨酸与丝氨酸的核心蛋白组成。糖链N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）的还原末端与翻译后的O-糖基化氨基酸连接（图1）。在碱性条件下，O-聚糖通过β氢脱离反应从核心蛋白中脱离的同时，在高温下糖链还原末端与2-氰基乙酰胺（2-CAN）反应产生强烈荧光缩合物，根据荧光强度检测泪液中的粘蛋白含量。

◆检测步骤

●　本产品专为荧光（96孔板）测量而设计。

●　使用荧光读板机可以测量100个样品。

●　使用分光光度计测量时，请使用微细胞。

样品制备

●　使用Schirmer氏泪液分泌条收集泪液5分钟。

●　储存泪液分泌条收集的泪液时，请放入微量试管中，并在4℃保存，同时避免冻结。

泪液粘蛋白的测定

1、将泪液分泌条转移至微量试管中，加入 200 μL 缓冲液洗脱，并在室温下提取粘蛋白１小时。

2、在步骤１的１小时内，准备空柱，并将空柱放入离心管中。搅拌凝胶浆液至均匀后，将 800 μL 凝胶浆液加入到空柱中，并在室温下以 800×g

　离心 10 分钟，（推荐使用具有摆动转子系统的离心机。）去除管中底部液体。

3、将步骤１用泪液分泌条提取的 50 μL 粘蛋白加入到步骤２凝胶的上部。

4、在室温下以 800×g 离心加有样品的柱子 10 分钟，并收集过滤的样品组分（约50 μL）。

泪液粘蛋白检测试剂盒 Tear Mucin Assay kit

5、将每次通过的组分（4）或标准溶液（①~⑧）的 20 μL 转移到另一个微量试管（500 μL）中。在试管中加入 24 μL 混合试剂（使用前，

　将试剂Ａ和试剂Ｂ以 1：5 的体积混合）。混合后，将试管加热至100℃ 30分钟。

6、将试管冷却至室温后，加入 200 μL 终止溶液，并用涡旋混合器混匀。

7、将100 μL溶液放入96孔黑色孔板中，设置波长（荧光：336 nm，发射：383 nm）后用荧光读板机测量。

8、按照如下稀释浓度创建标准曲线。

　　构建校准曲线，并从标准曲线中读取样品浓度。

标准曲线：

泪液粘蛋白检测试剂盒 Tear Mucin Assay kit

参考数据：

建议测量 Ex 时使用 336 nm 波长，测量 Em 时使用 383 nm，但使用具有干涉滤光片系统的荧光板作为前导时，可能无法测量荧光波长，这种情况下，需将荧光波长调到较长数值。

相关产品信息请点击：粘蛋白检测试剂盒

参考文献

[1]	Gipson IK, Hori Y, Argüeso P. Character of ocular surface mucins and their alteration in dry eye disease.(2004)Ocul Surf., Apr;2(2):131-48
[2]	Argüeso P, Balaram M, Spurr-Michaud S, Keutmann HT, Dana MR, Gipson IKGipson IK et al., Decreased levels of the goblet cell mucin MUC5AC in tears of patients with Sjögren syndrome. (2002) Invest Ophthalmol Vis Sci, April; 43(4): 1004-11
[3]	Uchino Y, Uchino M, Yokoi N, Dogru M, Kawashima M, Okada N, Inaba T, Tamaki S, Komuro A, Sonomura Y, Kato H, Argüeso P, Kinoshita S, Tsubota, Alteration of tear mucin 5AC in office workers using visual display terminals: The Osaka Study. (2014) JAMA Ophthalmol., Aug;132(8):985-92
[4]	natomi T, Spurr-Michaud S, Tisdale AS, Zhan Q, Feldman ST, Gipson IK. Expression of secretory mucin genes by human conjunctival epithelia. (1996) Invest Ophthalmol Vis Sci., Aug;132(8):985-92
[5]	Susumu Honda, Yoshikazu Matsuda, Masaye Takahashi, and Kazuaki Kakehi Fluorimetric Determination of Reducing Carbohydrates with2-Cyanoacetamide and Application to Automated Analysis of Carbohydrates as Borate Complexes. (1980) Analytica Chimica, Vol. 52, No. 7
[6]	Crowther RS, Wetmore RF: Fluorometric assay of O-linked glycoproteins by reaction with 2-cyanoacetamide. Anal Biochem 163: 170-174, 1987.
[7]	Okazaki Y, Han Y, Kayahara M, Watanabe T, Arishige H, Kato N. Consumption of curcumin elevates fecal immunoglobulin A, an index of intestinal immune function, in rats fed a high-fat diet. J Nutr Sci Vitaminol (2010); 56(1): 68-71.
[8]	Yukako Okazaki, Hiroyuki Tomotake, Kazuhisa Tsujimoto, Masahiro Sasaki,and Norihisa Kato. Consumption of a Resistant Protein, Sericin, Elevates Fecal Immunoglobulin A, Mucins, and Cecal Organic Acids in Rats Fed a High-Fat Diet. (2011) The Journal of Nutrition , 21, 10.3945/ jn.111.144246.
[9]	Zaki Utama & Yukako Okazaki & Hiroyuki Tomotake & Norihisa Kato, Tempe Consumption Modulates Fecal Secondary Bile Acids, Mucins, Immunoglobulin A, Enzyme Activities, and Cecal Microflora and Organic Acids in Rats. Plant Foods Hum Nutr (2013) 68: 177–183

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
MUC01	Tear Mucin Assay Kit (O-Glycan Assay Method	1 KIT　[50TEST]

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

发表于2024年4月6日由Whatman官网

粘蛋白检测试剂盒
Mucin Assay Kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

粘蛋白检测试剂盒

Mucin Assay Kit

——健康和美容研究试剂

◆背景

粘蛋白属于高度糖基化蛋白质家族，是粘膜的主要成分，例如唾液，泪液，胃液，肠液。粘蛋白的基本构型是枝状糖链连接到多肽的大分子。糖链的非均质特性使其具有多样性，分子具有各种功能，如特异性分子识别。
　　一些糖链识别病毒和细菌的特定蛋白质。粘蛋白锚定在肠中粘膜屏障功能中，阻止病原体和毒素通过肠壁进入血管中。该试剂盒可用于检测粪便中的粘蛋白含量。
　　粘蛋白属于高分子（1000 kda-10000 kda）高度糖基化蛋白的家族。蛋白质核内的粘蛋白结构域富含苏氨酸、丝氨酸和羟脯氨酸，糖链的还原末端（GalNAc）通过翻译后Ｏ-糖基化与这些氨基酸频繁连接。该试剂盒具有确定粪便粘蛋白含量组分的功能。

　　粪便粘蛋白测定可用作肠屏障功能的指标。该试剂盒利用荧光检测来测定粘蛋白的含量。

　　我们提供的该试剂盒可以供研究功能性食物和感染的客户使用。

步骤１：从粪便中提取和部分纯化粘蛋白。

步骤２：粘蛋白Ｏ-糖苷连接的寡糖链的测定通过稀碱进行β-消除，形成糖链的还原端。还原碳水化合物在高温下进行荧光标记以产生荧光缩合

物。

粘蛋白的结构

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

◆试剂盒组分

组件	规格	数量	储存条件
缓冲溶液Ａ	100 mL	3	4-10℃
缓冲溶液Ｂ	25 mL	1
缓冲溶液Ｃ	25 mL	1
试剂Ａ	1.0 mL	1
试剂Ｂ	1.5 mL	2
标准溶液（GalNA，250 μg/mL）	1.0 mL	1
酶溶液	1.5 mL	1

◆优点・特色

● 粘蛋白和 IgA 能阻止细菌和毒素的入侵

● 作为肠屏障的一部分，粘蛋白和 IgA 能防止病原菌和毒素通过肠壁转移到血管内。

测定理论
　　通过对粪便中的 β-葡萄糖苷酶热变性防止粪便粘蛋白降解
　　↓
　　粗提取粘蛋白
　　↓
　　用酶溶液分解淀粉
　　↓
　　用乙醇沉淀纯化粘蛋白
　　↓
　　将试剂Ａ加入纯化的粘蛋白中，并在碱性条件下进行热处理。（试剂Ａ将与粘蛋白的糖还原末端反应，并在碱处理后发出荧光）
　　↓
　　加入缓冲液Ｃ并测定荧光强度（激发336nm，荧光383nm）

　　（具体操作请看相关资料）

◆案例・应用

喂食高脂肪食物的大鼠肠屏障部分注射多酚的效果

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

图1 粘蛋白定量标准曲线

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

图2 粪便中的粘蛋白含量

应用

　　用于测定粪便中的粘蛋白含量。

相关资料

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

Mucin_Assay_Kit.

◆操作步骤

●　本产品是专为荧光酶标仪测量设计（96孔板）。
●　当使用荧光读板机时，可测量100个样品。
●　当使用分光光度计测量时，请使用微细胞。

缓冲液Ａ的制备
用100 mL蒸馏水溶解1块片剂。
粪便粉末的制备：粪便冻干并在研钵中研磨，储存在-20℃备用。

II.粪便粘蛋白的测定
　　1、称量100 mg粪便粉末放入微量试管（2 mL）中，加入1 mL缓冲液A，然后用涡流混合器混合30秒钟。

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

　　2、在95℃下加热试管10分钟使细菌的糖苷酶变性。

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

　　3、在37℃下加热90分钟，从粪便中提取粘蛋白。

　　4、在4℃下离心20,000×g 15分钟。
　　5、将200 μL上清液转移到另一个微量试管中，加入200 μL缓冲液B，用涡流混合器混合溶液。

　　6、加入10 μL酶溶液混合，在50℃下加热试管20分钟分解淀粉。
　　7、将离心管冷却至室温，加入125 μL的99.5％乙醇，混合后，在-20℃下静置过夜。

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

　　8、次日，在4℃下20,000×g离心10分钟，去上清。向沉淀加入1mL缓冲液A，重溶沉淀。（样品溶液）

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

　　9、将20 μL样品溶液和标准溶液转移到另一个微量试管（500 μL）中，加入24 μL试剂混合物（使用前以1:5混合试剂A和试剂B），混合后， 100℃下加热微量试管30分钟。

　　10、冷却至室温，加入200 μL缓冲液C，用涡流混合器混合。

粘蛋白检测试剂盒 Mucin Assay Kit

　　11、将100 μL溶液转移到96孔黑色孔板中，并在波长（例如：336 nm em：383 nm）实用荧光读板机测量荧光强度。
　　12、通过如下所示的连续稀释创建标准曲线。通过这些点绘制平滑曲线以构建标准曲线。通过标准曲线读取样品的浓度。
　　13、计算1 g粪便中的粘蛋白含量。步骤（12）测得的值的50倍是1g粪中的粘蛋白含量。

Calibrator Number	Quantaity of Standard	Quantaity of Dilution Buffer	Final Concentration
1	500 μL of Standard Solution	0	250 μg/mL
2	500 μL of Calibrator 1	500 μL	125 μg/mL
3	500 μL of Calibrator 2	500 μL	63 μg/mL
4	500 μL of Calibrator 3	500 μL	31.5 μg/mL
5	500 μL of Calibrator 4	500 μL	15.75 μg/mL
6	500 μL of Calibrator 5	500 μL	7.875 μg/mL
7	0	500 μL	0

工作校准品：N-乙酰葡萄糖胺250 μg/ mL
●　通过连续稀释创建标准曲线，如下图所示。
●　剩余的未稀释校准品应储存在2-10°C。
●　稀释校准品稳定，可在2-10°C保存1个月。

参考文献

［1］	Susumu Honda,Yoshikazu Matsuda, Masaye Takahashi, and Kazuaki KakehiFluorimetric Determination of Reducing Carbohydrates with2-Cyanoacetamide and Application to Automated Analysis of Carbohydrates as Borate Complexes.(1980) Analytical Chemistry, Vol.52, No. 7
［2］	Bovee-OudenhovenIM, Termont DS, Heidt PJ, et al.: Increasing the intestinal resistance of rats to the invasive pathogen Salmonella enteritidis: additive effects of dietary lactulose and calcium. Gut 40: 497-504, 1997.
［3］	Crowther RS, Wetmore RF: Fluorometric assay of O-linked glycoproteins by reaction with 2-cyanoacetamide. Anal Biochem 163: 170-174, 1987.
［4］	Okazaki Y, Han Y, Kayahara M, Watanabe T, Arishige H, Kato N. Consumption of curcumin elevates fecal immunoglobulin A, an index of intestinal immune function, in rats fed a high-fat diet. J NutrSciVitaminol (2010);56(1):68-71.
［5］	YukakoOkazaki,HiroyukiTomotake, Kazuhisa Tsujimoto, Masahiro Sasaki,andNorihisa Kato. Consumption of a Resistant Protein, Sericin, Elevates Fecal Immunoglobulin A, Mucins, and Cecal Organic Acids in Rats Fed a High-Fat Diet. (2011) The Journal of Nutrition, 21, 10.3945/jn.111.144246.
［6］	ZakiUtama,Yukako Okazaki, Hiroyuki Tomotake, Norihisa Kato, Tempe Consumption Modulates Fecal Secondary Bile Acids, Mucins, Immunoglobulin A, Enzyme Activities, and CecalMicroflora and Organic Acids in Rats. Foods Hum Nutr(2013) 68:177-183

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
CSR-FFA-Mu-K01E	Mucin Assay Kit 粘蛋白检测试剂盒	1盒

组胺ELISA试剂盒 Histamine ELISA kit

发表于2024年4月5日由Whatman官网

组胺ELISA试剂盒
Histamine ELISA kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

组胺ELISA试剂盒 组胺ELISA试剂盒 Histamine ELISA kit

Histamine ELISA kit

2小时高灵敏度检测血清，血浆，尿和组织培养基的组胺含量ELISA试剂盒。

◆背景

　　组胺是从氨基酸组氨酸合成的内源性短效生物胺，广泛分布在整个身体。组胺是立即型过敏反应的重要介质。通常人体内存在少量的组胺量。有报道称在过敏性反应期间和在研究皮肤和气道的过敏反应的实验系统中血浆和组织的组胺水平会升高。由于其在免疫应答中的有效作用，体内组胺存在处于非常短暂的状态，并且只能在释放后几分钟内可测定。生物系统中组胺的半衰期在其转化为正甲基组胺之前为4分钟。 N-甲基组胺是组胺代谢的主要产物，存在于尿中并且具有比组胺更长的半衰期。对N-甲基组胺和组胺的测定原理是一样的，使这使得测量尿中组胺水平是一个极好选择。

　　组胺也是一类称为“小分子神经递质物质”的神经递质。包括5-羟色胺，肾上腺素和多巴胺的分子。此外，组胺在胃酸分泌中起作用，有助于诱导酸生产。

◆特点

●　灵敏检测组胺，检测低至0.03 ng/mL。

●　独特测定，不需要额外的酰化步骤。

●　动态范围宽，适用于各种样品。

●　获得高通量分析结果2小时，最多40个样品重复。

●　组胺ELISA试剂盒是比色竞争性免疫测定试剂盒，2小时内得到结果。

◆产品规格

灵敏度：0.03 ng/mL（0.098-25 ng/mL）
测定时间：2小时
应用：ELISA，比色检测
应用备注：用于定量测定人，小鼠，大鼠和狗（仅血清）样品的组织

培养基，血清，血浆和尿中的组胺。
物种反应性：人类，小鼠，大鼠，狗

运送：冰袋
长期存储： 4°C

试剂盒/套装包含：微量滴定板，测定缓冲液13，标准液，浓缩洗涤缓

冲液，抗体，示踪剂，偶联物，底物和终止液

◆案例

食品中的组胺检测试剂盒（欲了解详情请点击文字）

参考文献

［1］IL-33 ameliorates Alzheimer's disease-like pathology and cognitive decline: A.K. Fu, et al.; PNAS 113, E2705 (2016),

［2］应用：测量血浆组胺水平，摘要，全文

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
ENZ-KIT140-0001	Histamine ELISA kit 组胺ELISA试剂盒	96次	－	－

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
BML-GR205-0025	Ciglitazone 环格列酮	25 mg
BML-GR205-0005	Ciglitazone 环格列酮	5 mg
ALX-270-086-G025	Indomethacin	25 mg
ALX-270-086-G005	Indomethacin	5 mg
BML-FA014-1000	Linoleic acid 亚油酸	1 g
BML-FA005-1000	Linolenic acid (18:3, n-3) 亚麻酸（18:3, n-3）	1 g
ALX-210-192-R100	PPARγ2 (mouse) polyclonal antibody PPARγ2 （小鼠）, 多抗	100 μL
BML-GR212-0050	T0070907	50 mg
BML-GR212-0010	T0070907	10 mg
BML-GR210-0025	Troglitazone 曲格列酮	25 mg
BML-GR210-0005	Troglitazone 曲格列酮	5 mg
BML-GR200-0250	WY-14643	250 mg
BML-GR200-0050	WY-14643	50 mg
ALX-270-353-G025	BADGE	25 g
ALX-270-264-M050	Carnosic acid 鼠尾草酸	50 mg
ALX-270-264-M010	Carnosic acid 鼠尾草酸	10 mg
BML-PG050-0005	15-Deoxy-Δ12,14-prostaglandin J2 15-脱氧-δ12,14-前列腺素 J2	5 mg
BML-PG050-0001	15-Deoxy-Δ12,14-prostaglandin J2 15-脱氧-δ12,14-前列腺素 J2	1 mg
ALX-420-029-M005	GW1929	5 mg
ALX-420-029-M001	GW1929	1 mg
ALX-270-367-M005	Pioglitazone 匹格列酮	5 mg
ALX-270-367-M001	Pioglitazone 匹格列酮	1 mg
ALX-350-125-M100	Rosiglitazone 罗格列酮	100 mg
ALX-350-125-M025	Rosiglitazone 罗格列酮	25 mg
ALX-190-001-M050	H-Trp-Glu-OH	50 mg
BML-PD140-1000	IBMX	1 g
BML-PD140-0200	IBMX	200 mg
BML-EI126-0005	Dexamethasone 地塞米松	5 g
BML-EI126-0001	Dexamethasone 地塞米松	1 g
ALX-520-002-C050	TNF-α (human), (recombinant) (cell culture grade) 肿瘤坏死因子-α （人）, （重组）（细胞培养级别）	50 μg
ALX-520-002-C010	TNF-α (human), (recombinant) (cell culture grade) 肿瘤坏死因子-α （人）, （重组）（细胞培养级别）	10 μg
ALX-520-001-C010	IL-1β (human), (recombinant) (cell culture grade) IL-1β （人）, （重组）（细胞培养级别）	10 µg
BML-GR234-0050	GW-9662	50 mg
BML-GR234-0010	GW-9662	10 mg

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