Ginsenoside Rh7

上海金畔生物科技有限公司提供天然产物萜类及其苷类Terpenoids and Glycosides。

Ginsenoside Rh7  纯度: 96.56%

Ginsenoside Rh7 是一种从人参叶片中分离出的次要皂苷。

Ginsenoside Rh7

Ginsenoside Rh7 Chemical Structure

CAS No. : 343780-68-7

规格 价格 是否有货 数量
5 mg ¥4500 In-stock
10 mg   询价  
50 mg   询价  

* Please select Quantity before adding items.

生物活性

Ginsenoside Rh7 is a minor saponin isolated from the leaves of Panax ginseng[1].

分子量

636.86

Formula

C36H60O9

CAS 号

343780-68-7

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式
Powder -20°C 3 years
In solvent -80°C 6 months
-20°C 1 month
参考文献
  • [1]. D Q Dou, et al. Six New Dammarane-Type Triterpene Saponins From the Leaves of Panax Ginseng. Chem Pharm Bull (Tokyo). 2001 Apr;49(4):442-6.

20(R)-Ginsenoside Rh2(Synonyms: 20(R)-人参皂苷Rh2)

天然产物 糖类和糖苷 Saccharides and Glycosides

20(R)-Ginsenoside Rh2;(Synonyms: 20(R)-人参皂苷Rh2) 纯度: ge;98.0%

20(R)-Ginsenoside Rh2,基质金属蛋白酶 (MMP) 抑制剂,作为细胞抗增殖剂。它通过阻断细胞增殖和引起 G1 期阻滞而具有抗癌作用。20(R)-Ginsenoside Rh2 诱导细胞凋亡并具有抗炎和抗氧化活性。20(R)-Ginsenoside Rh2 抑制小鼠和人 γ 疱疹病毒 68 (MHV-68) 的复制和增殖,对鼠 MHV-68IC50 为 2.77 μM。

20(R)-Ginsenoside Rh2(Synonyms: 20(R)-人参皂苷Rh2)

20(R)-Ginsenoside Rh2 Chemical Structure

CAS No. : 112246-15-8

规格 价格 是否有货 数量
10;mM;*;1 mL in DMSO ¥2672 In-stock
5 mg ¥1950 In-stock
10 mg ¥3200 In-stock
50 mg ; 询价 ;
100 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

20(R)-Ginsenoside Rh2 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Natural Product Library Plus
  • Bioactive Compound Library Plus
  • Anti-Infection Compound Library
  • Apoptosis Compound Library
  • Immunology/Inflammation Compound Library
  • Metabolism/Protease Compound Library
  • Natural Product Library
  • Anti-Cancer Compound Library
  • Antiviral Compound Library
  • Differentiation Inducing Compound Library
  • Glycoside Compound Library
  • Medicine Food Homology Compound Library
  • Terpenoids Library
  • Traditional Chinese Medicine Monomer Library
  • Anti-Pancreatic Cancer Compound Library
  • Angiogenesis Related Compound Library

生物活性

20(R)-Ginsenoside Rh2, a matrix metalloproteinase (MMP) inhibitor, acts as a cell antiproliferator. It has anticancer effects via blocking cell proliferation and causing G1 phase arrest. 20(R)-Ginsenoside Rh2 induces apoptosis, and has anti-inflammatory and antioxidative activity[1][2][3]. 20(R)-Ginsenoside Rh2 inhibits the replication and proliferation of mouse and human gammaherpesvirus 68 (MHV-68) with an IC50 of 2.77 μM for murine MHV-68[4].

IC50 Target

MMP[1]

分子量

622.87

Formula

C36H62O8

CAS 号

112246-15-8

中文名称

20(R)-人参皂苷Rh2

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4deg;C, protect from light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (protect from light)

溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 125 mg/mL (200.68 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6055 mL 8.0274 mL 16.0547 mL
5 mM 0.3211 mL 1.6055 mL 3.2109 mL
10 mM 0.1605 mL 0.8027 mL 1.6055 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

参考文献
  • [1]. Choi WY, et al. Anti-inflammatory, antioxidative and matrix metalloproteinase inhibitory properties of 20(R)-ginsenoside Rh2 in cultured macrophages and keratinocytes. J Pharm Pharmacol. 2013 Feb;65(2):310-6.

    [2]. Chung KS, et al. Ginsenoside Rh2 induces cell cycle arrest and differentiation in human leukemia cells by upregulating TGF-β expression. Carcinogenesis. 2013 Feb;34(2):331-40.

    [3]. Choi S, et al. Ginsenoside Rh2-mediated G1 phase cell cycle arrest in human breast cancer cells is caused by p15 Ink4B and p27 Kip1-dependent inhibition of cyclin-dependent kinases. Pharm Res. 2009 Oct;26(10):2280-8.

    [4]. Kang S, et al. Antiviral activity of 20(R)-ginsenoside Rh2 against murine gammaherpesvirus. J Ginseng Res. 2017 Oct;41(4):496-502.

(20R)-Ginsenoside Rh1(Synonyms: 人参皂苷R-RH1)

天然产物 糖类和糖苷 Saccharides and Glycosides

(20R)-Ginsenoside Rh1;(Synonyms: 人参皂苷R-RH1) 纯度: 99.06%

(20R)-Ginsenoside Rh1 是Ginsenoside Rh1 的 R 型异构体,可从Panax Ginseng 中分离得到,可抑制凝血酶诱导的纤维蛋白原向纤维蛋白的转化。

(20R)-Ginsenoside Rh1(Synonyms: 人参皂苷R-RH1)

(20R)-Ginsenoside Rh1 Chemical Structure

CAS No. : 80952-71-2

规格 价格 是否有货 数量
5 mg ¥800 In-stock
10 mg ¥1400 In-stock
20 mg ¥2300 In-stock
50 mg ; 询价 ;
100 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

(20R)-Ginsenoside Rh1 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Natural Product Library Plus
  • Bioactive Compound Library Plus
  • Natural Product Library
  • Anti-Cancer Compound Library
  • Glycoside Compound Library
  • Medicine Food Homology Compound Library
  • Terpenoids Library
  • Traditional Chinese Medicine Monomer Library

生物活性

(20R)-Ginsenoside Rh1, the R isomer of Ginsenoside Rh1 isolated from Panax Ginseng, inhibits the thrombin-induced conversion of fibrinogen to fibrin[1].

分子量

638.87

Formula

C36H62O9

CAS 号

80952-71-2

中文名称

人参皂苷R-RH1

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

-20deg;C, protect from light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (protect from light)

溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 100 mg/mL (156.53 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5653 mL 7.8263 mL 15.6526 mL
5 mM 0.3131 mL 1.5653 mL 3.1305 mL
10 mM 0.1565 mL 0.7826 mL 1.5653 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 10 mg/mL (15.65 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 10 mg/mL (15.65 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 100.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 10 mg/mL (15.65 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 10 mg/mL (15.65 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 100.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
  • 3.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% corn oil

    Solubility: ≥ 10 mg/mL (15.65 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 10 mg/mL (15.65 mM,饱和度未知) 的澄清溶液,此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 100.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。

*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献
  • [1]. Fan X, et al. Pharmacokinetic Comparison of 20(R)- and 20(S)-Ginsenoside Rh1 and 20(R)- and 20(S)-Ginsenoside Rg3 in Rat Plasma following Oral Administration of Radix Ginseng Rubra and Sheng-Mai-San Extracts. Evid Based Complement Alternat Med. 2017;2017:6451963.

Ginsenoside Rh1(Synonyms: 人参皂苷 Rh1; Prosapogenin A2; Sanchinoside B2; Sanchinoside Rh1)

天然产物 糖类和糖苷 Saccharides and Glycosides

Ginsenoside Rh1;(Synonyms: 人参皂苷 Rh1; Prosapogenin A2; Sanchinoside B2; Sanchinoside Rh1) 纯度: ge;98.0%

Ginsenoside Rh1 (Prosapogenin A2) 抑制 PPAR-γTNF-αIL-6IL-1β 的表达。

Ginsenoside Rh1(Synonyms: 人参皂苷 Rh1; Prosapogenin A2;  Sanchinoside B2;  Sanchinoside Rh1)

Ginsenoside Rh1 Chemical Structure

CAS No. : 63223-86-9

规格 价格 是否有货 数量
10;mM;*;1 mL in DMSO ¥843 In-stock
5 mg ¥600 In-stock
10 mg ¥1000 In-stock
50 mg ; 询价 ;
100 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

Ginsenoside Rh1 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Natural Product Library Plus
  • Bioactive Compound Library Plus
  • Apoptosis Compound Library
  • Cell Cycle/DNA Damage Compound Library
  • Immunology/Inflammation Compound Library
  • Metabolism/Protease Compound Library
  • Natural Product Library
  • Human Endogenous Metabolite Compound Library
  • Anti-Aging Compound Library
  • Differentiation Inducing Compound Library
  • Glycoside Compound Library
  • Lipid Compound Library
  • Medicine Food Homology Compound Library
  • Terpenoids Library
  • Pyroptosis Compound Library
  • Traditional Chinese Medicine Monomer Library
  • Angiogenesis Related Compound Library
  • Transcription Factor Targeted Library
  • Lipid Metabolism Compound Library
  • Food-Sourced Compound Library

生物活性

Ginsenoside Rh1 (Prosapogenin A2) inhibits the expression of PPAR-γ, TNF-α, IL-6, and IL-1β.

IC50 Target[1]

PPAR-γ

;

TNF-α

;

IL-6

;

IL-1β

;

Human Endogenous Metabolite

;

体外研究
(In Vitro)

The effect of Ginsenoside Rh1 is examined on adipogenesis in 3T3-L1 cells. Ginsenoside Rh1 potently inhibits the adipogenesis, as assessed by Oil-red O staining and lipid contents in 3T3-L1 adipocytes. Ginsenoside Rh1, at concentrations of 50 μM and 100 μM, inhibit the adipogenesis by 50% and 63%, respectively.The expression levels of adipocytespecific genes such as PPAR-γ, C/EBP-α, FAS, aFABP and some genes are examined during early phase of differentiation such as Pref-1, C/EBP-δ and Glucocorticoid receptor (GR). After the treatment with Ginsenoside Rh1 in 3T3-L1 cells, mRNA is extracted on 18 h and 24 h for Pref-1, C/EBP-δ and GR and day 8 for PPAR-γ, C/EBP-α, FAS, aFABP. Then, the expression profiles of adipocyte-specific genes are investigated by RT-PCR. PPAR-γ, C/EBP-α, FAS, and aFABP expressions are significantly increased in DMI-stimulated differentiated adipocyte compared to those of non-stimulated adipocyte cells. However, treatment with DMI in the presence of Ginsenoside Rh1 significantly suppresses the expression levels of PPAR-γ, C/EBP-α, FAS, and aFABP in a dose- dependent manner, whereas the expression levels of Pref-1, C/EBP-δ and GR are not affected[1].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

体内研究
(In Vivo)

When high-fat diet (HFD) fed mice for 8 weeks, body and epididymal fat weight gains are significantly increased compared to those of low-fat diet (LFD)-fed mice. However, when Ginsenoside Rh1 is treated in HFD-fed mice, body and epididymal fat weight gains are significantly decrease compared with those of the HFD-fed mice. TG, glucose, insulin, total cholesterol, and HDL levels in the blood are significantly increased in HFD-fed mice group compared to LFD-fed mice group. Treatment with Ginsenoside Rh1 in HFD-fed mice significantly lowers TG level alone[1].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

638.87

Formula

C36H62O9

CAS 号

63223-86-9

中文名称

人参皂苷 Rh1;人参皂苷 Rh1

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式
Powder -20deg;C 3 years
4deg;C 2 years
In solvent -80deg;C 6 months
-20deg;C 1 month
溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 100 mg/mL (156.53 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5653 mL 7.8263 mL 15.6526 mL
5 mM 0.3131 mL 1.5653 mL 3.1305 mL
10 mM 0.1565 mL 0.7826 mL 1.5653 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (3.91 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (3.91 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (3.91 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (3.91 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
  • 3.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% corn oil

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (3.91 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (3.91 mM,饱和度未知) 的澄清溶液,此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。

*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献
  • [1]. Gu W, et al. Ginsenoside Rh1 ameliorates high fat diet-induced obesity in mice by inhibiting adipocyte differentiation. Biol Pharm Bull. 2013;36(1):102-7.

Cell Assay
[1]

Mouse embryo fibroblasts 3T3-L1 cells are incubated in DMEM, containing 10% FBS and 1% AB, at 37°C and 5.6% CO2 atmosphere. To induce differentiation, two days after confluence, preadipocytes (designated day 0) are cultured in the differentiation medium (DM), which is consisted of DMEM, 10% FBS, 1% AB, and DMI (0.28 unit/mL insulin, 0.5 mM Isobutylmethylxanthine and 1 μM Dexamethasone) for 2 d in the presence or absence of 50 μM and 100 μM of Ginsenoside Rh1, and switched to DM containing 10% FBS and 10 μg/mL insulin and then changed to DMEM medium with 10% FBS for every 2 d[1].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Animal Administration
[1]

Mice[1]
Male C57BL/6J mice are separated into 3 groups, LFD, HFD and HFDRh1. Each group is consisted of ten mice. LFD group fed LFD for 8 weeks. HFD group fed HFD for 8 weeks. HFDRh1 group fed HFD diet for 4 weeks and then simultaneously treated with HFD and 20 mg/kg/d Ginsenoside Rh1, which is orally administrated. Weight and food intake of mice are measured daily. After finishing treatment for 4 weeks, blood and epididymal fats are collected for further analysis.

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

参考文献
  • [1]. Gu W, et al. Ginsenoside Rh1 ameliorates high fat diet-induced obesity in mice by inhibiting adipocyte differentiation. Biol Pharm Bull. 2013;36(1):102-7.

RH 421

RH 421;

RH 421 是一种电压敏感的苯乙烯基染料,可以穿透脂质双层。RH 421 是 β-半乳糖苷酶的显色底物。

RH 421amp;;

RH 421 Chemical Structure

CAS No. : 107610-19-5

规格 是否有货
100 mg ; 询价 ;
250 mg ; 询价 ;
500 mg ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

生物活性

RH 421 is a voltage-sensitive styryl dye that can penetrate through the lipid bilayers. RH 421 is a chromogenic substrate for β-galactosidase[1].

分子量

498.72

Formula

C29H42N2O3S

CAS 号

107610-19-5

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

参考文献
  • [1]. D Y Malkov, et al. Fluorescent styryl dyes of the RH series affect a potential drop on the membrane/solution boundary. Biochim Biophys Acta. 1996 Jan 31;1278(2):197-204.

DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent> 可用于活细胞的GST活性检测探针

DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>
可用于活细胞的GST活性检测探针

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

可用于活细胞的GST活性检测探针DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针

DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>




DNs-Rh是可以在活细胞中观察Glutathione S-transferase(GST)酶活性的荧光探针。由于可以根据GST活性发出绿色荧光,可用于评价细胞内GST的活性。GST亚家族跨度广泛,可以实现总GST活性的可视化。

※本产品基于名古屋大学 理学研究科 阿部洋教授的研究成果商品化。

※本产品仅供科研,严禁用于科研以外用途。


DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针

DNs-Rh具有细胞膜透过性,随着细胞内GST酶活性改变而产生绿色荧光。通过显微镜或流式细胞仪定量荧光强度,从而实现GST活性的相对定量。


GST及其活性检测方法


Gluthathione S-Transferase(GST)家族广泛存在于细菌及动植物中,细胞内的疏水性外源物质(xenobiotics)被添加到gluthathione(GSH)中,具有转换为GSH缀合物(GSH-conjugate)的活性。GSH缀合物通过MRP(multidrug resistance-associated protein)运输积极地排出细胞外,存在去除异物的机制。因此,GST可以作为排出具有潜在细胞毒性的外源性物质的解毒因子而发挥作用。

另一方面,由于大多数的抗癌剂等医药品也是通过GST转换为GSH缀合物排出细胞外,GST作为耐药因子具有削弱药效的负面效果。尤其是随着癌症的恶化特定的GST同种型(GSTP1)的表达量增强,癌细胞获得了强耐药性。

GST既是异物代谢和解毒作用因子,也具有耐药性因子的作用。因此,需要合适的检测细胞内GST活性的技术,但传统方法仅限于in vitro 的活性检测,缺少在活细胞内观察活性的方法。

名古屋大学阿部洋教授及其研究人员们开发的DNs-Rh是细胞膜透过性的化合物,是一种可以根据GST酶活性产生绿色荧光的GST活性应答探针。因为可以用于活细胞,进行各类细胞的GST活性的定量化和刺激依赖性的GST活性的监测,可以用于传统方法无法实现的基于细胞水平的抑制剂的开发等的各种应用。



DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针

GST作用示意图



GST活性检测用探针的比较

探针名称

传统方法(CDNB)

DNs-Rh

检测方法

UV(~340 nm)

绿色荧光(Ex / Em = 496 / 520 nm)

检测对象

广泛的GST家族

广泛的GST家族

适用实验

in vitro(如裂解液或纯化酶)

可以

可以

活细胞实验

成像

不可以

可以

流式细胞术

不可以

可以

检测灵敏度

低(UV测定)

高(荧光测定)

高通量和简便性

低(需要配制裂解液)

高(活细胞状态下观察)

非特异性反应(GST非依赖的GSH反应性)

与其他的因子同时检测

不可以

可以(可以和蓝色和红色荧光同时使用)

◆详细原理


DNs-Rh是在Rhodamine110上添加2个GST基质2,4- dinitrobenzene sulfonamide(DNB)的化合物,呈消光状态。DNB基质通过GST转换为GSH缀合体,Rhodamine 110释放出来并发出绿色荧光(激发/荧光 = 496 / 520 nm)。DNs-Rh最初开发作为检测体内硫醇的试剂1),但后来却被发现其也能高效用作GST活性的检测试2)。与硫醇应答相比,GST应答性更强,现在我们期待DNs-Rh能成为活细胞用的GST活性检测探针4)


DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针

原理示意图

◆参考文献

1.

Shibata, A.,et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 18, 2246-2249 (2008) [PMID:18358719]

"Rhodamine-based fluorogenic probe for imaging biological thiol."

2.

Alander, J., et al., Anal. Biochem., 390, 52-56 (2009) [PMID:19348782]

"Characterization of a new fluorogenic substrate for microsomal glutathione transferase 1."

3.

Zhang, J.,et al., J. Am. Chem. Soc., 133, 14109-14119 (2011) [PMID:21786801]

"Synthesis and characterization of a series of highly fluorogenic substrates for glutathione transferases, a general stategy."

4.

Shishido, Y., et al.,ChemBioChem., (in press)

"A covalent inhibitor for Glutathione S-Transferase Pi (GSTP1-1) in human cells."

◆特点


● 根据GST活性释放rhodamine110产生绿色荧光(激发/荧光=496/520 nm)。

● 具有细胞膜通透性,只需添加至培养基即可使用。

● 已确认与各种GST家族具有交叉反应性

 


◆应用实例


荧光光谱(反应前后)


向GSTP1重组体(10 μg/mL)中添加DNs-Rh(1 μM)、GSH(1 mM)30分钟后,测定激发光为490 nm时的荧光光谱。仅在GSH / GSTP1存在时观察到了Emmax 520 nm附近的荧光。


DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针

荧光光谱



GST in vitro活性检测


向GSTP1重组体(10 μg/mL)中添加DNs-Rh(1 μM)、GSH(1 mM)观察绿色荧光强度(Ex / Em 490 / 520 nm)随时间的变化,纵轴将1 μM Rhodamine 110溶液的荧光强度设为100%。GST存在时,可以发现(GSH(+)/ GST(+))在约30分钟左右的时候荧光强度明显增强,约55%的探针转换成Rhodamine,相对的,在GSH(+)/ GST(ー)的条件下,可以观察到GSH稍微有所增加,但是Rhodamine的转换率只有3%。

正如原理所述,DNs-Rh与硫醇化合物反应甚微。与GST存在时相比反应明显较弱,但是也有可能经过几个小时的长时间反应使荧光强度增强,因此建议在反应30~60分

※ 钟左右后即刻进行观察。

DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针

活细胞荧光测定



培养细胞中的GST活性测定


向HeLa细胞中添加2.5 μM的DNs-Rh,孵育30分钟后用荧光显微镜(Ex 480 / Em 535 nm)进行观察。添加1 mM的不可逆性抑制物质CNBSF(#FDV-0031)作为前处理,反应15分钟。通过DNs-Rh 从细胞内观察到 Rhodamine 110 的绿色荧光,但是用抑制物质 CNBSF 进行前处理时,荧光强度明显减弱。

※ 成像注意:本试剂是通过观察GST释放出来的rhodamine 110在细胞内的分布,虽然可以基于荧光强度观察GST的相对活性强度,但不能实现细胞内GST定位的可视化。

DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针


培养细胞荧光成像



流式细胞术定量GST活性


左:向K562细胞中添加2.5 μM的DNs-Rh,5、60、180分钟后用流式细胞仪检测(Ex / Em = 488 / 525 nm)。

左:可以观察到荧光强度随时间变化增强。

右:向K562细胞和HL60细胞中添加2.5 μM的DNs-Rh,60分钟后用流式细胞仪检测(Ex / Em = 488 / 525 nm)。

右:与K562细胞相比,每个HL60细胞都显示出更高的GST活性。

DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent>                              可用于活细胞的GST活性检测探针

流式细胞仪检测

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

◆相关产品


可用于活细胞的不可逆GST抑制剂

CNBSF <Irreversible GST Inhibitor>

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
FDV-0030 DNs-Rh <Cell-based GST Activity Assay Reagent> 0.1 μmol

RH-NH2 RH-NH2荧光探针 品牌:FUJIFILM Wako


RH-NH2

RH-NH2荧光探针

品牌:FUJIFILM Wako
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DNs-Rh, Cell-based GST Activity Assay Reagent 品牌:Funakoshi


DNs-Rh, Cell-based GST Activity Assay Reagent

品牌:Funakoshi
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Anti Puromycin mAb (Clone 3RH11) 品牌:Cosmo Bio


Anti Puromycin mAb (Clone 3RH11)

品牌:Cosmo Bio
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