人白细胞介素10 ELISA试剂盒(Human IL-10 ELISA KIT) 货号: H6126S/H6126M/H6126L 规格: 24T/48T/96T

上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品

人白细胞介素10 ELISA试剂盒(Human IL-10 ELISA KIT)

产品货号: H6126S/H6126M/H6126L

产品规格: 24T/48T/96T

目录价(元):952/1587/2698

推荐仪器:酶标仪

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产品概述:

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格 

24T

48T

96T

使用方法

开封后保存条件

A. 标准品

2000 pg

2000 pg

2×2000 pg

按说明书进行稀释

-20℃可存放一月

B. 标准稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

4可存放一月

C. 浓缩生物素化抗体(100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

D. 生物素化抗体稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

E. 浓缩酶结合物(避光 100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

F. 酶结合物稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

G. 浓缩洗涤液(20×

16 mL

16 mL

25 mL

即用型

H. 显色剂(避光)

6 mL

6 mL

12 mL

即用型

I. 终止液

12 mL

12 mL

12 mL

即用型

4或常温保存

J. 预包被96孔板

8×3

8×6

8×12

即用型

密封干燥4保存

K. 封板胶纸

1

2

4

即用型

终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。

产品介绍
Human IL-10 ELISA Kit (Human Interleukin-10 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人白细胞介素 10 ELISA 试剂盒,可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-10 浓度。
白细胞介素 10 又称细胞因子合成抑制因子(CSIF),是一种多效性细胞因子,可以在多种类型细胞中发挥免疫抑制或免疫刺激的作用。人,大鼠和小鼠 IL-10 cDNA 序列均含 178 个氨基酸残基,内有 18 氨基酸信号肽序列,成熟 IL-10 分子为 160 氨基酸残基,小鼠和人 IL-10 分子中分别含 5 个和 4 个半胱氨酸残基,分子量为 35-40 kDa。小鼠和人 IL-10 基因都定位于第 1 号染色体,其基因组包括 5 个外显子和 4 个内含子。人和小鼠 IL-10 在 DNA 和氨基酸水平上分别有 81%和 73%的同源性。人 IL-10 可作用于鼠源性细胞,而小鼠 IL-10 对人的细胞则无交叉反应。
在人类,某些 CD4+T 细胞克隆、来自 AIDS 病人 B 细胞系、EBV 感染的淋巴母细胞、Burkitt 氏淋巴瘤、活化单核细胞、外周血 T 细胞均可产生 IL-10。IL-10 的拮抗剂可能具有抗 EB 病毒的作用,而 IL-10 通过促进单核细胞表达 IL-1ra 有可能成为抗炎症的治疗手段,动物实验表明,IL-10 可有效地避免 LPS 诱导小鼠休克而造成的死亡。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人 IL-10 浓度。在人 IL-10 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品,其中的 IL-10 会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗人 IL-10 抗体,抗人 IL-10 抗体与结合在单抗上的人 IL-10 结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有 IL-10,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色;加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值,人 IL-10 浓度与 OD 450 值之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出样品中人 IL-10 浓度。
说明书:

人白细胞介素10 ELISA试剂盒(Human IL-10 ELISA KIT) 货号:               H6126S/H6126M/H6126L  规格:               24T/48T/96T UE-H6126S/H6126M/H6126L    
常见问题解答:

背景信号强是什么原因?
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保孔区域洗涤充分;确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液;增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度,在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液;延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

没有信号?
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验;检查试剂配制方法;复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量;增加抗体用量(浓度)。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

整块板呈现规则蓝色?
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。

标准曲线差?
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。