大鼠白细胞介素1β ELISA试剂盒(Rat IL-1β ELISA KIT) 货号: R6155S/R6155M/R6155L 规格: 24T/48T/96T

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大鼠白细胞介素1β ELISA试剂盒(Rat IL-1β ELISA KIT)

产品货号: R6155S/R6155M/R6155L

产品规格: 24T/48T/96T

目录价(元):952/1587/2698

推荐仪器:酶标仪

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产品概述:

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格

24T

48T

96T

使用方法

开封后保存条件

A. 标准品

4000 pg

4000 pg

4000 pg

按说明书进行稀释

-20℃可存放一月

B. 标准稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

4可存放一月

C. 浓缩生物素化抗体(100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

D. 生物素化抗体稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

E. 浓缩酶结合物(避光 100×

30 μL

60 μL

2×60 μL

按说明书进行稀释

(现配现用)

F. 酶结合物稀释液

16 mL

16 mL

16 mL

即用型

G. 浓缩洗涤液(20×

16 mL

16 mL

25 mL

即用型

H. 显色剂(避光)

6 mL

6 mL

12 mL

即用型

I. 终止液

12 mL

12 mL

12 mL

即用型

4或常温保存

J. 预包被96孔板

8×3

8×6

8×12

即用型

密封干燥4保存

K. 封板胶纸

1

2

4

即用型

终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。

产品介绍
Rat IL-1β ELISA Kit (Rat Interleukin-17A Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即大鼠白细胞介素 1β ELISA 试剂盒,可以定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-1β 浓度。
IL-1 分为 IL-1α、IL-1β两种,在不同种属中有较高同源性。在氨基酸水平上,IL-1α和 IL-1β在不同种属同源性分别为 60%-70%和 75%-78%;但在同一种属中 IL-1α与 IL-1β 同源性只有 25%。IL-1α和 IL-1β分子量约 17.5 kDa,等电点分别为 5 和 7,同源性为 28%。IL-1 主要是通过与其受体 (IL-1R) 结合形成 IL-1 受体复合物发挥生物学作用。T 细胞、成纤维细胞表面 IL-1R 为 80 kDa,而 B 细胞则为 68 kDa,分别称为 IL-1 RI (CDw 121 a)和 IL-1 RⅡ(CDw 121 b)。IL-1 受体复合物至少由 IL-1α或 IL-1β,Ⅰ型 IL-1 受体(IL-1RⅠ),IL-1R 辅助蛋白(IL-1 RAcP)三部分组成。这一复合物介导了 IL-1 的信号转导。IL-1α和 IL-1β是 IL-1 受体激动性配基。IL-1 RAcP 是分子量约为 66 kDa 的多肽。细胞表面单独存在的 IL-1RⅠ与配体结合后仍然是不活跃的,只有 IL-1 RAcP 结合上去后,才能从不活跃状态转变成有激活功能的 IL-1 受体复合物。IL-1 与 IL-1 RtⅡ结合后易发生降解,因此被认为是下调受体。
IL-1β主要由血液中的单核细胞和巨噬细胞产生,星形细胞,少突神经胶质细胞,肾上腺皮质细胞,NK 细胞,内皮细胞,角质形成细胞,巨核细胞,血小板,神经元,中性粒细胞,成骨细胞,许旺细胞,滋养层细胞,T 细胞和成纤维细胞也可产生 IL-1β 。IL-1 具有广泛的免疫调节作用,并有致热和介导炎症的作用。
本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法检测样品中大鼠 IL-1β 浓度。在大鼠 IL-1β 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品,其中的 IL-1β 会与其单抗结合,洗去游离成分;加入生物素化的抗大鼠 IL-1β 抗体,抗大鼠 IL-1β 抗体与结合在单抗上的大鼠 IL-1β 结合而形成免疫复合物,洗去游离的成分;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,生物素与亲合素特异性结合,洗去未结合的酶结合物;加入显色剂,若反应孔中有 IL-1β ,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色;加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值,大鼠 IL-1β 浓度与 OD 450 值之间呈正比,可通过绘制标准曲线计算出样品中大鼠 IL-1β 浓度。

说明书:

大鼠白细胞介素1β ELISA试剂盒(Rat IL-1β ELISA KIT) 货号:               R6155S/R6155M/R6155L  规格:               24T/48T/96T UE-R6155S/R6155M/R6155L    
常见问题解答:

背景信号强是什么原因?
1.洗板不充分。将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保孔区域洗涤充分;确保已在洗涤前弃去所有残留抗体溶液;增加洗涤次数。
2.链亲和素-HRP结合物过量。检查偶联物的稀释度,在推荐的稀释度下使用。
3.封闭不充分。检查封闭液;延长封闭时间。
4.孵育时间过长。缩短孵育时间。
5.样品或标准品中含干扰物质。设置对照。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

没有信号?
1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验;检查试剂配制方法;复核试验试剂添加流程。
2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。
3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量;增加抗体用量(浓度)。
4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。
5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。

整块板呈现规则蓝色?
1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。
2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。
3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。
4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。

标准曲线差?
1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。
2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板,而非组织培养板;使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。
3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。
4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。
5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。
6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。

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