LBIS牛血清白蛋白ELSIA试剂盒 LBIS Bovine Albumin ELISA Kit

LBIS牛血清白蛋白ELSIA试剂盒  

LBIS Bovine Albumin ELISA Kit

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白蛋白存在于细胞和体液中,主要类型为高水溶性的蛋白,同时也存在糖基化的白蛋白。血清白蛋白分子量约为69 kDa,占血浆蛋白56-60%,等电点为4.9,在肝细胞中合成。

血清白蛋白是血清蛋白的主要组成部分,在维持渗透压中起重要作用,在生理上与脂肪酸、胆红素和甲状腺素等难溶于水的物质结合,并协助其运输。血清白蛋白浓度的降低,通常是由于肝硬化等引发的白蛋白生物合成减少、营养不良或热性病损耗的体蛋白所导致的血液中白蛋白的消耗,以及肾障碍引起的尿液渗出等原因所致。

在健康人的尿液中,血清白蛋白的排泄量每天仅在30 mg以下,但由于患肾脏疾病时渗出至尿液的白蛋白会增多,因此患肾小球肾炎、肾病综合征、糖尿病性肾病等肾脏疾病时的尿白蛋白水平会升高。另外,发烧、高血压、充血性心力衰竭、尿路感染等情况下,尿白蛋白水平也有可能会升高。即使是健康人,在经过剧烈运动或肌肉劳动后、热水沐浴后、精神兴奋、压力和摄入大量蛋白后以及月经前,尿白蛋白会短暂性增加,这种现象也被称为生理性或功能性蛋白尿或运动性蛋白尿。此外,仅在站立时才出现的蛋白尿主要发现于年轻人中。

人类中有一种罕见的先天性疾病,称为低白蛋白血症,也称为无白蛋白血症,但正确来说是含有极少量白蛋白,临床症状为轻度水肿和中度低血压,尚未观察到肝功能异常或蛋白尿。动物中大鼠有无白蛋白血症analbuminemia的模型,是由佐佐木研究所的Sumi Nagase老师以SD大鼠建立的,被称为NAR(Nagase analbuminemia rat)。

血清白蛋白的检测,使用TIA检测系统宏观上效果不错,FUJIFILM Wako Shibayagi也可以提供大鼠和小鼠的自动检测仪器用TIA试剂盒,然如果要实现高灵敏度和微量检测则需用到ELISA。富士胶片和光Shibayagi的LBIS Albumin ELISA Kit除了可定量检测血液中、尿液中与疾病相关的白蛋白外,还可应用于体外白蛋白生物合成实验系统、从培养体系中纯化得到的生物药中FBS等的残留污染检测,NAR中肝细胞和肝组织移植后白蛋白产生的标记成功与否的研究等等。

 

◆试剂盒特点

● 可快速检测(总反应时间:2.5 h)

● 检测范围:0.78~50 ng/mL

● 所需样品量:100 μL/well

● 使用环保的防腐剂

● 所有试剂均为即开即用的溶液

● 高检测准确性和可重复性

 

使用目的

● 检测培养基来源的牛血清白蛋白(BSA/FBS)

● 细胞和组织加工产品

● 单克隆抗体生产工艺

● 重组蛋白生产工艺

试剂盒的组成

 

组成内容 状态 包装
 (A)抗体固定96孔板(干板型) 清洗后使用 96 wells(8×12)/1支
 (B)标准白蛋白溶液(500 ng/mL) 稀释后使用 200 μL/1支
 (C)缓冲液 直接使用 60 mL/1支
 (D)过氧化物酶结合抗白蛋白抗体 稀释后使用 200 μL/1支
 (F)显色液(TMB) 直接使用 12 mL/1支
 (H) 反应停止液(1M H2SO4) ※ 使用注意 直接使用 12 mL/1支
 (I)浓缩清洗液(10×) 稀释后使用 100 mL/1支
 封板膜 —— 3张
 使用说明书 —— 1份

 

 

交叉反应性

 

物种 交叉反应率(%)
100%
小鼠 小于0.05%
大鼠 小于0.05%
小于0.05%

 

※ 交叉反应率为1000 ng/mL浓度下检测的数据。

 

 

◆样品信息

 

检测样品中牛白蛋白残留污染

※ 检测时,制备合适倍率的缓冲液,用作检测用的稀释样品。

※ 请注意本试剂盒对于检测牛血清·血浆样品十分敏感。需稀释约一百万倍。

 

 

◆检测范围

 

0.78~50 ng/mL(标准曲线范围)

 

 

◆Validation data

 

准确度测试(实验组内差异)

 

样品 A B C D
1 46 23.9 11.7 1.72
2 45.3 23.5 11.8 1.84
3 43.9 24.2 11.5 1.7
4 44.8 22.5 11.4 1.76
5 48 24.7 12.3 1.75
mean 45.6 23.8 11.7 1.75
SD 1.561 0.825 0.353 0.053
CV(%) 3.4 3.5 3 3

 

单位:ng/mL

 

可重复性测试(实验组间差异)

 

检测日/样品 E F G
第0日 1.48 5.7 24.3
第1日 1.55 6.2 25.6
第2日 1.5 6.35 25
第3日 1.56 6.25 25
mean 1.52 6.12 25
SD 0.042 0.288 0.545
CV(%) 2.8 4.7 2.2

 

单位:ng/mL n=3

 

加标回收测试

 

样品 H

 

添加量 实测值 回收量 回收率
0 3.06
1.5 4.58 1.52 101
3 5.8 2.74 91.3
3.75 6.79 3.73 99.5

 

单位:ng/mL n=3

 

样品 I

 

添加量 实测值 回收量 回收率
0 10.6
3.95 14.7 4.1 104
11.9 22.3 11.7 98.3
19.8 29.4 18.8 94.9

 

单位:ng/mL n=3

 

 

◆稀释直线性测试

 

使用连续性稀释缓冲液分4个阶段梯度稀释2个血清样品,并进行检测,结果显示直线回归的R2从0.9996变为了0.9997。

 

 

操作方法

 

抗体包被96孔板(干板型)

↓ 清洗4次

样品或标准溶液 100 μL

↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应1 h

↓ 清洗4次

过氧化物酶结合抗白蛋白抗体 100 μL

↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应1 h

↓ 清洗4次

显色液(TMB) 100 μL

↓ 搅拌,室温(20~25 ℃),静置反应30 min

反应终止液(1M H2SO4

↓ 搅拌

吸光度检测(主波长450 nm、副波长620 nm:600~650 nm)

 

 

FBS/FCS,液体培养基检测示例

 

样品 白蛋白检测值(mg/mL)
FBS-1 17.3
FBS-2 17.3
FCS-1 10.5
FCS-2 12.5
RPMI-1(10 %FBS) 1.39
RPMI-2(10 %FBS) 1.73

 

 

◆牛血清白蛋白(BSA)检测用试剂

 

牛血清白蛋白(BSA:Bovine Serum Albumin)

 

产品编号 产品名称 标准曲线范围 样品量
(稀释样品)
635-07099 LBIS Bovine Albumin ELISA kit

LBIS牛白蛋白 ELISA试剂盒

0.78~50 ng/mL 100 μL

 

已经验证可以检测样品中掺入的牛血清白蛋白,以及来源于生产过程的终产品中牛血清白蛋白残留杂质。

本产品仅供实验研究用,不可作临床应用。

 

 

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产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
635-07099 LBIS Bovine Albumin ELISA kit
LBIS牛白蛋白 ELISA试剂盒
96 tests