AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像

发表于由

AkaLumine-HCl（TokeOni）
实现生物体内部深处成像

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

实现生物体内部深处成像AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像

AkaLumine-HCl（TokeOni）



　　AkaLumine-HCl 是一种发光峰值在 670-680 nm处的荧光素类似物。它适用于活体深部的体内成像，因为它的峰值范围在近红外（NIR）窗内，不易受水和血红蛋白吸收峰影响。

　　进行成像实验时敬请使用 AkaLumine-HCl。


AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像


数据提供：

东京工业大学 生命理工学院 生命理工学系 生命工程专业 口丸高弘助教·近藤科江教授

电力通信大学研究生院 信息科学与工程 基础科学与工程专业 牧昌次郎助教

 

◆特点


●　近红外发光底物：λmax 675 nm。

●　不易受水和血红蛋白光吸收的影响，非常适合用于活体成像实验。

●　比传统产品 AkaLumine 的溶解度高 50 倍以上。



◆结构及光谱

AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像

图1.　AkaLumine-HCL 结构式

AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像

图2.　D-luci（D-荧光素）及 AkaLumine-HCl 在含有 LLC/luc 皮下肿瘤的小鼠体内各基质中的发光光谱图



◆实验方案示例


●　制备AkaLumine-HCl溶液

●　・在水或生理盐水中溶解

●　(例）制备100 mM Akalumine-HCl（用水稀释）。使用时再次稀释3)
●　・请现配现用


●　移植了Akaluc（荧光素酶）表达细胞的小鼠肺部生物发光成像 3)

●　在PBS中以10,000 cells/mL的密度悬浮Akaluc表达HeLa细胞
● 　↓
● 　将100 μL（1,000 cells）的悬浮液注射到小鼠的尾静脉中

●　↓ 10 min后

●　麻醉小鼠，给药30 mM AkaLumine-HCl

●　↓

●　获取活体发光图像


●　Akaluc表达小鼠的神经元响应监测3)
●　用腺相关病毒使Akaluc在小鼠纹状体中表达

●　↓
●　以小鼠体重750 nmol/g 向小鼠静脉给药AkaLumin-HCl。

●　↓
●　获取生物发光图像



◆使用了小鼠的活体成像实验数据

AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像


图3.　在含有 LLC/luc 皮下肿瘤的小鼠腹腔内使用 100 μL 底物 D-luci 及 AkaLumine-HCl，15 分钟后对所得的发光图像及肿瘤发光强度进行定

           量分析（n=4，*P＜0.05）。对小鼠使用 D-luci 并获得发光图像后４小时，对同一实验对象使用 AkaLumine HCl，得到如图所示的发光

           图像。



◆细胞的体外成像实验数据


AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像


图4.　将各种底物浓度的 D-luci 及 AkaLumine-HCl 添加至表达萤火虫荧光素酶（luc，firefly luciferase）的小鼠鼠肺癌细胞（LLC/luc）内，

           得到的发光图像及发光强度定量分析结果。（n=3，*P＜0.05）

◆使用人工发光成像系统AkaBLI的应用实例


AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像

（A） 小鼠纹状体中的发光信号


使用腺相关病毒（AAV）将人工酶Fluc和Akaluc导入小鼠纹状体。两周以后向小鼠腹腔内给药人工底物D-luciferin（100 mM）和AkaLumine-HCl（30 mM），头部观察的结果显示，使用AkaBLI（AkaLumine-HCl和Akaluc的组合）的小鼠能观测到高度的发光。

（B）自由行动小鼠・狨猴纹状体的发光信号


使用AAV将AkaLuc导入小鼠・狨猴纹状体中。根据以下条件分别给药AkaLumine-HCl，在它们自由行动的情况下进行观察。

小鼠：AkaLumine –HCl（75 nmol/g）通过静脉给药

狨猴：AkaLumine –HCl（75 nmol/g）通过腹腔给药

图5.　左：头部的观察结果；右：相对发光强度

（D-luciferin/Fluc和Akalumin-HCl/Akaluc）条形图

AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像

AkaLumine-HCl（TokeOni） 实现生物体内部深处成像

Akaluc的表现部位：纹状体（小鼠脑）

Akaluc的表达部位：纹状体（狨猴脑）


图6.　小鼠（左）和狨猴（右）的自由行动观察

数据来源：

国立研究开发法人理化学研究所

脑神经科学研究中心细胞功能探索技术研究小组 岩野智教授、宮脇敦史教授



◆产品列表


产品编号

产品名称

规格

容量

012-26701

AkaLumine盐酸盐
AkaLumine n-Hydrochloride(AkaLumine-HCl)

生化学用

1 mg

018-26703

10 mg

◆相关产品


产品编号

产品名称

规格

容量

035-22991

腔肠荧光素h
(Coelenterazine h)

生化学用

1 mg

031-22993

10 mg

039-22994

50 mg

035-22996

100 mg

099-06571

异氟醚
(Isoflurane)

生化学用

250 mL

095-06573

1 L

193-17791

七氟醚

生化学用

250 mL

011-25791

马来酸乙烯丙嗪
(Acepromazine Maleate)

药理研究用

10 mg

017-25793

50 mg

015-25331

阿替美唑盐酸盐
(Atipamezole Hydrochloride)

药理研究用

10 mg

011-25333

50 mg

049-33321

盐酸右美托咪定
(Dexmedetomidine Hydrochloride)

药理研究用

1 mg

045-33323

10 mg

021-19001

酒石酸布托啡诺
(Butorphanol Tartrate)

生化学用

50 mg

027-19003

500 mg

135-13791

咪达唑仑

生化学用

500 mg

139-17471

美托咪定盐酸盐
(Medetomidine Hydrochloride)

药理研究用

1 mg

135-17473

10 mg

133-17474

100 mg

欲了解更多应用，请点击此处下载宣传单页

参考文献


1)

Iwano, S. et al.:Tetrahedron,69, 3847(2013).

2)

Kuchimaru, T. , Iwano, S. , Kiyama, M. , Mitsumata, S. , Kadonosono, T. , & Niwa, H. , et al. (2016). A luciferin analogue generating near-infrared bioluminescence achieves highly sensitive deep-tissue imaging. Nature Communications, 7, 11856.

3)

Iwano, S. , Sugiyama, M. , Hama, H. , Watakabe, A. , Hasegawa, N. , & Kuchimaru, T. , et al. (2018). Single-cell bioluminescence imaging of deep tissue in freely moving animals. Science, 359(6378), 935-939.