泛素化试剂盒
Ubiquitinylation kit
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Ubiquitinylation kit
泛素化试剂盒
◆用于合成泛素-E2硫酯的多功能工具
● 能合成一系列由硫酯连接的泛素缀合酶E2的理想方法
● 生物素化的泛素能对连接了链霉亲和素的酶进行灵敏检测
● 试剂盒供50次50 μL的反应使用
泛素化试剂盒是一套在泛素化实验中用于合成泛素-E2硫酯的试剂。该试剂盒利用泛素级联反应中前两个步骤来产生一系列由硫酯连接的泛素缀合酶(E2s);用于将泛素转移至E3泛素连接酶;然后对靶蛋白进行泛素化。生物素化的泛素能有助硫酯的形成,并能对泛素缀合物进行高灵敏度检测。
建议用法
1. 合成用于泛素化实验的泛素-E2硫酯;
2. 在专用的E3泛素连接酶的参与下对靶蛋白进行泛素化;
3. 对用于与新型E2酶通过硫酯连接的泛素进行活化;
4. 使用细胞裂解液或粗提物/制备剂为来源的E3泛素连接酶来促进泛素化;
5. 不依赖底物(目标蛋白)的体外泛素化反应。
图1. |
酯测试Western Blotting能够适用于所有E2缀合酶。操作步骤按照“Assay Protocol”部分所述的进行。 生物素化-泛素-酶共聚物通过蛋白质印迹法的硫酯测试来检测,其中分别包括: A:UbcH1(Prod. No. BML-UW9020) B:UbcH2(Prod. No. BML-UW9025) C:UbcH3(Prod. No. BML-UW8730) D:UbcH5a(Prod. No. BML-UW9050) E:UbcH5b(Prod. No. BML-UW9060) F:UbcH5c(Prod. No. BML-UW9070) G:UbcH6(Prod. No. BML-UW8710) H:UbcH7(Prod. No. BML-UW9080) I:UbcH8(Prod. No. BML-UW9135) J:UbcH10(Prod. No. BML-UW0960) K:Ubc13/MMS2(Prod. No. BML-UW9565) 而使用“Analysis by Western Blotting”部分所述的链霉亲和素-辣根过氧化物酶检测系统的有M: 生物素化SDS分子量标记(Sigma, SDS-6B) 从下到上:20.1, 29.0, 39.8, 58.1 kDa。 |
◆产品规格
应用注释 |
用法: |