hPSC解离溶液
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hPSC解离溶液
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标签归档：hpsc
StemSure(R) hPSC Remover ( rBC2LCN-PE38 ) StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂 品牌：FUJIFILM Wako
StemSure(R) hPSC Remover ( rBC2LCN-PE38 )
StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂
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品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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192-19081 |
for Cell Culture | 100uL | – | 3,700.00 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
StemSure® hPSC培养基△ 人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
StemSure® hPSC培养基△
人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
- 产品特性
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- 参考文献
人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基
StemSure® hPSC培养基△
本产品是一款可在无饲养层条件下维持培养人多能干细胞（人ES细胞和人iPS细胞）的无血清培养基。由于原材料中不含动物来源成分，以及BSA和HSA等白蛋白，所以无批间差异，可实现稳定培养。但本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。
◆ 特点
● 可在无饲养层条件下培养人ES细胞以及人iPS细胞的无血清培养基
● 每批次都使用人iPS细胞201B7株进行质量检测
● 不使用动物来源成分
● 非药用毒物及剧毒物，易于处理和储存。
● 不含白蛋白的低蛋白培养基
● 可与Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin等多种涂层剂联用
● 可与Accutase，TrypLE Select等解离液联用
● 传代时可通过添加Y-27632实现使用单细胞传代
◆测试项目
● 细胞增殖测试（使用人iPS细胞201B7株）
● 碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7株）
● 无菌测试
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体测试
◆使用注意事项
本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。
本产品需冷冻（-20℃）储存。溶解后不可再次冷冻，建议在2~10℃条件下进行储存，并在1周内使用完毕。
◆人iPS细胞201B7株的培养
将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人iPS细胞201B7株移植至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。
细胞形态
在StemSure® hPSC培养基Δ中培养的人iPS细胞的细胞形态与A公司培养基培养的几乎相同，也没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。
细胞群倍加数
移植到StemSure® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，StemSure® hPSC培养基Δ培养的细胞增殖情况更为良好。
<培养基组成>
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF
<细胞接种数>
1×105 cells/well （使用6孔板）
未分化性能维持的确认
使用StemSure® hPSC培养基进行5次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。
※BC2LCN是一种对存在于人ES细胞/人iPS细胞膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞
◆人ES细胞WA01株的培养
将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人ES细胞WA01株移至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。
StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存
StemSure® hPSC冻存液, AF
用于人iPS细胞冻存
- 产品特性
- 相关资料
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- 参考文献
用于人iPS细胞冻存
StemSure® hPSC 冻存液，AF
StemSure® hPSC 冻存液，AF 是无动物源成分的人 iPS 细胞用冻存液。本品含 DMSO。
◆特点
● 能以高细胞存活率冻存人 iPS 细胞
● 不含动物源成分
● 可以以缓慢冻结的方式进行冻存
● 可用于无饲养层培养的细胞
● 无需进行繁杂的试剂配制
● 无需程序降温
◆人 iPS 细胞冻存步骤
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冷 冻 |
1. 在除去人 iPS 细胞培养皿中的培养液，用 D-PBS（-）清洗后，用 Accutase 等分散细胞。 |
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2. 添加含有 10 µmol/L Y-27632 的人 iPS 细胞用培养基（hPSC 培养基（+ROCKi）），用移液器吹散成单细胞。 |
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3. 将吹打分散后的细胞悬浮液移至样本管中，离心（1,000 rpm，３分钟，室温）后，除去上清液。 |
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4. 添加 hPSC 培养基（+ROCKi），用移液器悬浮。 |
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5. 计算细胞数，将样本管离心（1,000 rpm，３分钟，室温）后，除去上清液。 |
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6. 利用本产品使细胞悬浮成 2×106 cells/mL，并以 500 µL/管进行分装。 |
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7. 在 -80°C 下冷冻后，在 -150°C 或者 -80°C 的条件下保存（长期保存建议保存在 -150°C）。 |
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复 苏 |
1. 添加 hPSC 培养基（+ROCKi）到冻存瓶中，复苏冷冻细胞。 |
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2. 离心（室温下，1,000 rpm，３分钟）后，除去上清液，添加 hPSC 培养基（+ROCKi），使细胞悬浮。 |
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3. 计算细胞数，以 2×105 cells/6 cm dish的条件接种 |
◆人iPS细胞201B7株的冻存
确认细胞存活率和细胞增殖率
将培养中的人 iPS 细胞 201B7 株分散成单细胞后，重悬于 StemSure® hPSC 冻存液，AF 中，在 -80°C下冻存２~４天。
确认冷冻复苏后的细胞存活率和细胞增殖率。反复冷冻复苏５次后，确认细胞、细胞集落的形态和各种未分化标记（Oct3/4、Nanog、BC2LCN）的表达。
确认细胞集落的形态
确认细胞存活率和细胞增殖率
结果表明，用 StemSure® hPSC 冻存液，AF 冻存的人 iPS 细胞显示出高细胞存活率和细胞增殖率。
另外还确认了各种未分化标记的表达。
◆人iPS细胞冻存步骤
使用用 StemSure® hPSC 冻存液，AF 冷冻复苏５次后的 iPS 细胞 201B7 株，形成胚叶体，βⅢ-Tubulin,α-SMA,AFP 的表达确认其分化成了三胚叶。
（胚叶体形成，三胚叶分化诱导时的培养基组成）
Stemsure D-MEM+SSR+2mol/L L-Glutamine+10mmol/L2-Mercaptoethanol +1×Non-essential Amino Acids Solution
测试项目：外观，应用试验（iPS 细胞 201B7株），无菌试验，内毒素，支原体测试
可用于ES干细胞的冻存液，请点击：StemSure细胞冻存液
通用动物细胞冻存液，请点击：CultureSure无血清细胞冻存液
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 197-17831 | StemSure® hPSC Freezing Medium, AF StemSure® hPSC冻存液，AF |
100 mL | 细胞培养用 |
人多能性干细胞无血清培养基 StemSure® hPSC 培养基Δ
人多能性干细胞无血清培养基
StemSure® hPSC 培养基Δ
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
StemSure® hPSC 培养基Δ
人多能性干细胞无血清培养基
本产品是无饲养层条件下用于维持培养人ES细胞·iPS细胞的无血清,无动物源性成分的液体培养基。不含BSA及HAS等蛋白，批次间的差别较少，结果稳定。但是，本产品不含bFGF（碱性線成纤维细胞成长因子）。
◆特点
● 无血清、无饲养层培养人 ES· iPS 细胞
● 使用人 iPS 细胞 201B7 细胞系，进行每批次的质量检测
● 不含动物源成分
● 不属于医药用外毒物或剧毒物，保存及处理简单
● 不含蛋白的低蛋白培养基
● 可使用 Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin 等培养基质
● 可使用 Accutase, TrypLE Select 等解离液
● 传代培养时添加 Y-27632 可传代培养单细胞
◆检测项目
● 细胞繁殖能力测试（使用人iPS细胞201B7细胞系）
● 碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7细胞系）
● 无菌检测
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体检测
◆使用注意
● 本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞成长因子）。
● 本产品需冷藏（-20℃）。溶解后无需再冷冻，请保存于２～10℃，并在１周内使用完毕。
◆人iPS细胞201B7细胞系
将使用Ａ公司培养基（含有 BSA、使用动物源成分）培养的人iPS细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。
《 细胞形态 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养的人iPS细胞的形态与Ａ公司培养基的几乎相同，没有发生分化，稳定地进行了培养。
《 细胞群倍加数 》
对比移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第１代到第５代的细胞，使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞繁殖状况更好。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
＜ 细胞播种数 ＞
1×105 cells/well（使用６孔培养板）
《 未分化性标记表达确认 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至５代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。
※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® hPSC 培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
＜ 细胞播种数 ＞
1×105 cells/well（使用６孔培养板）
《 未分化性标记表达确认 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至５代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。
※BC2LCN 是能与存在于人 ES ・iPS 细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞
◆人ES细胞201B7细胞系
将使用Ａ公司培养基（含有 BSA、使用动物源成分）培养的人ES细胞201B7细胞系移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ，进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。
《 细胞形态 》
使用Ａ公司培养基的细胞，细胞在第２代以后出现了分化。另一方面，使用 StemSure® hPSC 培养基Δ的细胞，没有发生分化，稳定地进行了培养。
《 细胞群倍增数 》
比较两者移植到 StemSure® hPSC 培养基Δ后的第１代到第５代，细胞的繁殖能力没有差异。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/ml bFGF
＜ 细胞播种数 ＞
1×105 cells/well（使用６孔培养板）
《 未分化性维持確認 》
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养至第６代，观察到全部的未分化标记物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）。
※BC2LCN 是能与存在于人ES ・iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
＜数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤 弓弦老师＞
核型解析
对使用 StemSure® hPSC 培养基Δ培养到第27代的人iPS细胞进行了核型解析，没有发现染色体异常。
＜数据提供 独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师＞
人iPS细胞201B7分化成三胚层
使用 StemSure® hPSC 培养基Δ将人iPS细胞201B7细胞系培养至第３代，再使用 StemSure® 系列培养基进行驯化培养，可观察到 βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP，因此判断细胞形成胚体后，进行了三胚层分化。
＜ 培养基成分 ＞
StemSure® D-MEM + StemSure® Serum Replacement + 2 mmol/l L-Glutamine + 10 mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol + 1 x Non-essential Amino Acids Solution
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 197-17571 | StemSure® hPSC MediumΔ | 100ml | 用于细胞培养 | |
| 193-17573 | StemSure® hPSC MediumΔ | 100ml×4 | 用于细胞培养 | |
| 064-05381 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 50μg | 用于细胞培养 | |
| 068-05384 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 100μg | 用于细胞培养 | |
| 060-05383 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 1mg | 用于细胞培养 | |
| 257-00511 | Y-27632 | 1mg | 用于细胞培养 | |
| 253-00513 | Y-27632 | 5mg | 用于细胞培养 | |
| 251-00514 | Y-27632 | 25mg | 用于细胞培养 | |
| 253-00591 | 5mmol/l Y-27632 Solution | 300μl | 用于细胞培养 | |
| 220-02041 | Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant,Solution | 500μg | 生物化学用 | |
| 197-16275 | StemSure® D-MEM（High Glucose）with Phenol Red and Sodium Pyruvate | 500ml | 用于细胞培养 | |
| 197-16775 | StemSure® Serum Replacement | 500ml | 用于细胞培养 | |
| 198-15781 | StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution （×100） | 100ml | 用于细胞培养 | |
| 195-15791 | StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution （×100） | 100ml | 用于细胞培养 | |
| 190-15805 | StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution | 500ml | 用于细胞培养 | |
| 199-16051 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units | 用于细胞培养 | |
| 195-16053 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units×10 | 用于细胞培养 | |
| 195-16031 | StemSure® Freezing Medium | 100ml | 用于细胞培养 |
hPSC 解离溶液
hPSC 解离溶液
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
hPSC 解离溶液
人多功能干细胞用细胞分散溶液 提供评价用样本！
本品是在无饲养层培养条件下培养人ES/iPS继代细胞是使用的细胞分散溶液，不含动物或者人类来源物质，也未使用胰蛋白酶和胶原酶等酶。请与StemSure® hPSC培养基Δ结合使用。另外，FUJIFILM Wako还准备了评价用样本（10 mL），如有需要，请填写表格申请。
◆特点
● 无饲养层培养用
● 不含酶
● 无动物来源成分
● 添加有 Y-27632 可用于单细胞继代培养
◆测试项目
● 无菌测试
● pH
● 渗透压
● 内毒素
● 支原体测试
◆使用方法
<在使用６孔板时>
清除培养基，用 D-PBS(-)清洗细胞
清除 D-PBS(-)，将 1 mL/well 本品加进孔板
7℃，5%CO2条件下，培养５分钟
敲击剥离细胞群
加入 2 mL/well 的 ROCKi+培养基，通过移液枪吹散细胞群为单细胞。（ROCKi+培养基：指在人iPS细胞用培养基中加入 Y-27632，使最终浓度变为 10 μmol/L 的培养基。）
将分散液移至离心管，室温下 1,000 rpm 离心３分钟。
去除上清。
继代培养时，添加 2 mL/well ROCKi+培养基，悬浮，种植。
冻存时，用 StemSure® 冻存液悬浮，分装到保存用离心管，冻存。
〔使用注意事项〕
由于细胞种类和涂层剂的不同，会使培养容器中的细胞粘着性有所不同，用 hPSC 解离溶液处理至敲击能使细胞剥离。
◆人iPS细胞的细胞分散
StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iOS细胞201B7株，添加hPSC解离溶液，观察细胞的解离状态。添加hPSC解离溶液５分钟后敲击，移液枪吹散细胞为单细胞。
◆人iPS细胞的继代
用 StemSure® hPSC培养基Δ和hPSC解离溶液对iPS细胞201B7株进行继代培养，细胞增殖能力可到６继代后，各种未分化Marker（Oct3/4, Nanog, rBC2LCN）的表达呈阳性。
《 细胞増殖能力 》
〔细胞株〕
人iPS细胞201B7株
〔培养基组份〕
StemSure® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF
〔涂层剂〕
Matrigel® hESC-Qualified Matrix
〔细胞种植数〕
1.0×105 cells/well （使用6孔板）
《未分化性维持》
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★rBC2LCN★
rBC2LCN可识别人ES细胞·人iPS细胞。通过加入含有人ES细胞·人iPS细胞的营养液，可给未分化细胞活体染色。
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 160-27051 | hPSC Dissociation Solution | 100 mL | 细胞培养用 | － |
| 197-17571 | StemSure hPSC Medium Δ | 100 mL | 细胞培养用 | － |
| 193-17573 | StemSure hPSC Medium Δ | 100 mL×4 | 细胞培养用 | － |
| 064-05381 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant,Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 50 μg | 细胞生物学用 | － |
| 068-05384 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant,Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 100 μg | 细胞生物学用 | － |
| 060-05383 | Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant,Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 | 1 mg | 细胞生物学用 | － |
| 257-00511 | Y-27632 | 1 mg | 细胞生物学用 | － |
| 253-00513 | Y-27632 | 5 mg | 细胞生物学用 | － |
| 251-00514 | Y-27632 | 25 mg | 细胞生物学用 | － |
| 253-00591 | 5 mmol/L Y-27632 Solution | 300 μL | 细胞培养用 | － |
| 220-02041 | Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant, Solution | 500 μg | 生化学用 | － |
| 197-16275 | StemSure D-MEM (High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate | 500 mL | 细胞培养用 | － |
| 197-16775 | StemSure Serum Replacement (SSR) | 500 mL | 细胞培养用 | － |
| 198-15781 | StemSure 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution ( x 100) | 100 mL | 细胞培养用 | － |
| 195-15791 | StemSure 50 mmol/L Monothioglycerol Solution ( x 100) | 100 mL | 细胞培养用 | － |
| 190-15805 | StemSure(R) 0.1w/v% Gelatin Solution | 500 mL | 细胞培养用 | － |
| 199-16051 | StemSureR LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units | 细胞培养用 | － |
| 195-16053 | StemSureR LIF, Mouse, recombinant, Solution | 106units×10 | 细胞培养用 | － |
| 195-16031 | StemSure Freezing Medium | 100 mL | 细胞培养用 | － |
StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38) StemSure® hPSC去除剂（rBC2LCN-PE38） 品牌：FUJIFILM Wako
StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38)
StemSure® hPSC去除剂（rBC2LCN-PE38）
|
品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
199-18511 |
for Cell Culture | 100 ul | – |
替代品：192-19081 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38) StemSure® hPSC去除剂（rBC2LCN-PE38） 品牌：FUJIFILM Wako
StemSure® hPSC Remover (rBC2LCN-PE38)
StemSure® hPSC去除剂（rBC2LCN-PE38）
|
品牌：FUJIFILM Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
195-18513 |
for Cell Culture | 100 ul×5 | – |
替代品：192-19081 |
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。