日本同仁化学死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue| DOJINDO

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死细胞标记试剂–Blue货号:C555
死细胞标记试剂–Blue
Dead Cell Makeup Blue – Higher Retention than PI
商品信息
储存条件:0-5°C,避光
运输条件:常温运输

特点:

 

● 染料不会从死细胞中泄漏

● 储备溶液可以冷冻保存6个月

● 有两种不同的颜色可供选择

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C555/C556宣传资料

选择规格:
100tests

现货

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

产品概述
技术信息
DMSO 储存溶液的保质期
与现有 PI 方法的比较
实验案例: 诱导 MOLT-4 细胞衰竭后的 PD-1 检测
常见问题Q&A

产品概述

该试剂可与细胞表面和细胞内的蛋白质共价结合,对膜受损的死亡细胞进行强染色。此外,染色剂在固定和渗透细胞后不会渗漏。染色后,活细胞和死细胞的荧光强度差异显著,通过流式细胞仪分析,死细胞很容易区分和排除。

技术信息

区分和排除死细胞对使用流式细胞仪 (FCM) 获得准确数据至关重要,近年来,这一过程已成为发表论文时越来越常见的要求。碘化丙啶(PI)可用于区分死细胞,但细胞膜的固定或渗透会导致 PI 从细胞中渗出,从而难以获得准确的数据。这种试剂具有与细胞表面和细胞内部蛋白质共价结合的特性,因此即使细胞被固定或渗透后,染料也不会渗出。此外,染色后活细胞和死细胞的荧光强度差异很大,因此 FCM 可以轻松区分死细胞并将其排除在分析之外。

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

DMSO 储存溶液的保质期

本产品的 DMSO 储备溶液可冷冻保存六个月。

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

与现有 PI 方法的比较

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

 

 

实验案例: 诱导 MOLT-4 细胞衰竭后的 PD-1 检测

MOLT-4 细胞在含有 Ionomycin(500 ng/ml)和 PMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate,50 ng/ml)的 RPMI 培养基中刺激 48 小时。死细胞用本品染色,PD-1 表达用免疫染色法检测(一抗:抗 PD-1 小鼠抗体,二抗:抗小鼠抗体-Alexa488)。结果表明,死细胞和活细胞可以清楚地区分开来,而且在只选取活细胞的情况下,受刺激细胞组的 PD-1 表达升高。

实验步骤

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

试验结果

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

常见问题Q&A

Q1:能否测量贴壁细胞?
A1:可对贴壁细胞进行检测。用胰蛋白酶消化细胞或用刮板收集细胞,以制备细胞悬液。
Q2:胰蛋白酶会干扰测量吗?
A2:通过以下实验证实胰蛋白酶对 HeLa 细胞的影响。我们将胰蛋白酶处理与使用刮板进行了比较,确认两种情况下的分析结果没有区别。

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

Q3:是否可以用显微镜进行观察?
A3:我们已经证实,可以对染色后的 HeLa 细胞进行成像。用这种染料染色的 HeLa 细胞在固定和膜渗透后的成像结果如下。

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

Q4:染色是否会产生细胞毒性?
A4:使用CCK-8 来评估染色对 HeLa 细胞的细胞毒性,结果显示几乎没有细胞毒性。
Q5:染色后能否保存固定的细胞?
A5:不建议保存。由于荧光强度在固定后会随着时间的推移而降低,因此染色后的样本应在当天进行检测。
Q6:DMSO stock solution的稳定性如何?
A6:该产品在 -20°C 下冷冻保存 6 个月是稳定的。本品受潮后会降解;如果考虑长期储存超过 6 个月,请使用未开封且含水量低的DMSO。

此外,如有必要,可将产品分成小份储存

Q7:如何对细胞进行栅极化?
A7:以下是使用 Becton Dickinson (BD) 流式细胞仪的方法。

 

 

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

死细胞标记试剂–Blue货号:C555 死细胞标记试剂–Blue

日本同仁化学Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)| DOJINDO

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Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05
脂滴荧光检测(蓝色)
Lipid Droplet Assay Kit-Blue
商品信息
储存条件:冷暗处保存
运输条件:室温

特点:

 

● 高特异性脂滴定位

● 可流式定量检测

● 多种颜色可供选择

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选择规格:
1set

现货

点击查看更多脂滴荧光选择

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

产品解说
活动进行中
试剂盒内含
概述
原理
特点
实验例
脂肪滴产品选择指南
参考文献

产品解说

 

活动进行中

订购满5000元,200元礼品等你拿

凑单关联产品TOP5

NO.1.    Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit    细胞凋亡检测

NO.2.    Lipid Droplet Assay Kit-Blue    脂滴荧光检测(蓝色

NO.3.    Lipid Droplet Assay Kit-Deep Red    脂滴荧光检测(深红色)

NO.4.    Glucose    葡萄糖摄取检测

NO.5.    Lactate Assay Kit-WST    乳酸检测

 

试剂盒内含

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

概述

同仁化学研究所研发的Lipid Droplet Assays Kit-Blue&Deep Red试剂盒,与油红O和尼罗红不同,只需简单操作即可选择性的检测LDs。与尼罗红相比试剂盒中的染色剂,具有更好的选择性,从而将荧光背景降低到最小值。此外,试剂盒中的Loading Buffer可维持检测过程中细胞的状态完好。本试剂盒可使用流式细胞仪检测活细胞或固定细胞,也可用于荧光酶标仪进行高通量检测。

原理

脂滴(脂肪滴,Lipid droplets, LDs)由中性脂肪组成,主要包括甘油三酯和胆固醇酯,其外层被一层单层磷脂分子包裹。而且脂滴不仅在脂肪细胞中存在,在真核生物中也普遍存在。最新的研究表明,以前认为脂滴仅是一个简单的脂质储存器,但最近的研究表明其在调节脂质代谢1),自噬2)和细胞衰老3)等方面都起着重要作用,因此需要进一步详细地研究脂滴形成·成长·融合·分解的机制。Lipi系列探针是高脂肪亲油性小分子探针,可在疏水环境例如脂滴中发出强荧光。Lipi探针染色后,无须洗涤即可观察到脂滴。

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.

2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature, 2009, 458(7242), 1131.

3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports, 2014, 7(5), 1691.

特点

特点1:定量专用试剂盒

试剂盒包含所需的工作液和缓冲液、可以简便实现定量脂滴。

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

特点2:大幅度缩短操作,活细胞也可以使用

Lipid Droplet Assay Kit中使用的荧光染料可用于活细胞和固定细胞。因此,与使用比色法试剂相比可以大大缩短检测所需的时间。此外,由于染料不会沉积在孔板上,所以可以提高实验的重现性。

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

实验例

实验例1:孔板检测实验例

将油酸或Triacsin C(acyl-CoA synthetase抑制剂)分别加入到A549细胞中,并使用Lipid Droplet Assay Kit对脂滴的变化进行定量。结果表明,与对照和加入Triacsin C的细胞相比,加入油酸的细胞中脂滴量有所增加。

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

<检测条件>

Blue:Ex: 376 – 386 nm、 Em: 435 – 455 nm

Deep Red :Ex: 623 – 633 nm、 Em: 649 – 669 nm

实验例2:流式细胞术的实验例

将油酸或Triacsin C(acyl-CoA synthetase抑制剂)分别加入到HeLa细胞中,并使用Lipid Droplet Assay Kit对脂滴的变化进行定量。结果表明,与对照和加入Triacsin C的细胞相比,加入油酸的细胞中脂滴量有所增加。

Lipid Droplet Assay Kit-Blue试剂货号:LD05 脂滴荧光检测(蓝色)

< 检测条件>

Blue:Ex: 405 nm、 Em: 425 – 475 nm

Deep Red :Ex: 640 nm、 Em: 650 – 670 nm

脂肪滴产品选择指南

产品名称 规格 货号
成像(成像)

脂滴荧光探针

Lipi-Blue 10 nmol LD01
Lipi-Green 10 nmol LD02
Lipi-Red 100 nmol LD03
Lipi-Deep Red 10 nmol LD04
定量(荧光酶标仪,FCM)
脂滴荧光检测试剂盒
Lipid Droplet Assay Kit – Blue 1 set LD05
Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red 1 set LD06

参考文献

1. Fujimoto,T.et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits”Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.

2. Singh,R.et al., “Autophagy regulates lipid metabolism”Nature2009, 458(7242), 1131.

3. Yokoyama, M.et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity”Cell Reports2014, 7(5), 1691.

4. Oka, M.et al.,  “Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes”, Cells., 2019, 8, (4), 373.

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日本同仁化学Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)| DOJINDO

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Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)
商品信息
储存条件:冷暗处保存
运输条件:室温

特点:

 

● 高特异性脂滴定位

● 可进行组织脂滴成像

● 多种颜色可供选择

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选择规格:
10 nmol

现货

点击查看更多脂滴荧光选择

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

产品解说
概述
原理
脂滴的染色例
与竞争品比较
产品特点
实验例
Lipi系列荧光图谱
脂肪滴产品种类的检测方法
常用问题Q&A
参考文献
参考文献

产品解说

 

概述

 Lipi系列探针是高脂肪亲脂性小分子探针,其在疏水环境例如脂滴中发出强荧光。活细胞和固定细胞中的脂滴都可以使用本试剂清楚地观察。

原理

脂滴(脂肪滴,Lipid droplets, LDs)由中性脂肪组成,主要包括甘油三酯和胆固醇酯,其外层被一层单层磷脂分子包裹。而且脂滴不仅在脂肪细胞中存在,在真核生物中也普遍存在。最新的研究表明,以前认为脂滴仅是一个简单的脂质储存器,但最近的研究表明其在调节脂质代谢1),自噬2)和细胞衰老3)等方面都起着重要作用,因此需要进一步详细地研究脂滴形成·成长·融合·分解的机制。Lipi系列探针是高脂肪亲油性小分子探针,可在疏水环境例如脂滴中发出强荧光。Lipi探针染色后,无须洗涤即可观察到脂滴。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.

2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature, 2009, 458(7242), 1131.

3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports, 2014, 7(5), 1691.

脂滴的染色例

在活细胞状态下,用油酸诱导HeLa细胞后,用不同颜色的Lipi系列荧光探针检测

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

检测条件:

* Lipi-Blue :Ex:405 nm, Em:450–500 nm

* Lipi-Green:Ex:488 nm, Em:500–550 nm

* Lipi-Red:Ex:561 nm, Em:565–650 nm

* Lipi-Deep Red:Ex:640 nm, Em:650–700 nm

染色条件:

 

在HeLa细胞培养基中加入200 μmol/l油酸,过夜培养后,用PBS清洗细胞,并分别加入不同颜色的Lipi探针(Lipi-Blue/Green/Deep Red:0.1 μmol/l、Lipi-Red:1 μmol/l) 染色15 min后观察。

如何制备油酸溶液

请参考Q&A“油酸溶液的制备和加入细胞的方法”。

与竞争品比较

Lipi系列荧光探针大幅度地改善了现有脂滴染色试剂存在的问题 (如选择性,滤波器的适应性,荧光滞留性)。而且 Lipi系列荧光探针也适用于多重染色实验,可选颜色更多。

 

同仁化学试剂 其他品牌(T公司)
Lipi-Blue Lipi-Green Lipi-Red Lipi-Deep Red Oil Red O

(比色)

Nile Red 试剂B
活细胞染色 ×
固定细胞染色
对脂肪滴的选择性
(低背景)
× ×
与其他试剂的共染色*1 *2 n.d. ×*3
活细胞内的滞留性(24h) × × n.d. × ×

*1. 与绿色荧光共染时,推荐使用550 nm以下的绿色荧光滤光片。

*2. 关于共染时推荐的荧光滤光片,您可以参考网页下方Q&A“共染时推荐的荧光滤光片”。

*3. 用GFP的滤光片(500~540 nm)时会串色。

产品特点

特点1:与抗体检测方法高度相似

4%PFA固定HepG2细胞后,用100 nmol/l Lipi-Blue染色。 然后在脂滴膜上用抗ADFP抗体荧光标记,免疫染色, 该抗体可以特异性标记脂滴膜上的蛋白质 (Adipophilin; ADFP)。 实验证明Lipi-Blue与脂滴上蛋白质ADFP的定位高度相关。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

<检测条件> 

Lipi-Blue:Ex:405 nm / Em:450-500 nm,

抗ADFP抗体(Alexa Fluor 647):Ex:640 nm / Em:650-700 nm

特点2:高特异性定位脂滴

在HeLa活细胞中加入油酸,并用100 nmol/l Lipi-Blue和100 nmol/l Nile Red(T公司)染色。该结果显示Nile Red会染上脂滴以外的其它细胞质。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

<检测条件> 

Lipi-Blue:Ex:405 nm / Em:450-500 nm,

Nile Red:Ex:561 nm / Em:565-650 nm

特点3:荧光在细胞中滞留时间长

分别用Lipi系列、Nile Red和市售的试剂B染色HepG2细胞,观察在培养30 min和24 h时的荧光图像。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

实验证实Lipi-Blue和Lipi-Green在培养24 h后虽然荧光强度有所降低,但仍有荧光。 而Lipi-Red,Lipi-Deep Red,Nile Red和市售试剂B在培养24 h后几乎无荧光,不适合长时间的实时成像观察。

实验例

实验例1:脂肪细胞的脂滴成像

用Lipi系列染色3T3-L1前脂肪细胞,可以清楚地检测出脂肪细胞中的脂质。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

<脂肪细胞染色实验例>

(1)将3T3-L1细胞(1.5×104cells/孔)接种在µ-Plate 96孔板(ibidi)的各孔中,并在37℃ 5% CO2培养箱内培养。

(2)按照常规方法诱导分化为脂肪细胞。

(3) 去除上清液,用DMEM(25 mmol/l葡萄糖, 10% FBS, 无酚红)洗涤两次。

(4)加入用DMEM(25 mmol/l葡萄糖,10%FBS,无酚红)制备的每种染料的工作溶液,并在37℃下培养24 h。

(5)用荧光显微镜观察。

※试剂浓度:各2.5 µmol/l

实验例2:脂肪组织的脂滴成像

用4%PFA固定小鼠肝脏脂肪组织(冰冻切片)后用Lipi系列染色,比较幼鼠(6周龄)和老年小鼠(31周龄)的脂滴成像图像,发现肝脏脂肪组织中的脂滴量有很大差异。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

<组织样品的染色实验例>

(1)向小鼠肝脏脂肪组织(冰冻切片)中加入4%PFA(PBS),在室温下静置5 min。

(2)用PBS清洗后,加入各浓度的Lipi系列working solution(PBS),在4℃下静置24 h。

(3)用PBS清洗后,用落射型荧光显微镜进行荧光观察。

※工作液浓度:2.5 µmol/l(Lipi-Blue、Lipi-Green、Lipi-Deep Red)、25 µmol/l(Lipi-Red)

实验例3:使用细胞成像仪进行定量分析

将油酸或Triacsin C(acyl-CoA synthetase抑制剂)分别加入到HepG2细胞中,并比较脂滴的变化。在分析中,我们使用共聚焦定量细胞成像仪(横河电机株式会社 CQ1)获得每个细胞脂滴数量和面积的数据。

脂肪滴和细胞核的成像

使用共聚焦定量细胞成像仪在447/60 nm处拍摄脂滴图像,在525/50 nm处拍摄细胞核图像,在分析软件CellPathfinder中识别单个脂滴和细胞核,并计算其数量和面积。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

横河电机CQ1拍摄条件

使用板:96 well plate,物镜:20倍

激发波长 :405 nm (Lipi-Blue):蓝色、488 nm (SYBR Green): 绿色

黄框线:细胞核、红框线:脂滴

脂滴数量及面积的分析

根据细胞核和脂滴的检测数据,每个细胞的脂滴的数量和面积如图所示。结果,加入油酸的脂滴增加了7-10倍,而加入Triacsin C抑制了脂滴的形成,脂滴数量减少到Control组的50-60%。

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

细胞处理及脂滴染色条件

将HepG2细胞(1×103cells)接种到96孔板中过夜培养。除去培养上清液后,加入未处理(仅含FBS的DMEM培养基)、油酸(含200 μmol/l油酸和FBS的DMEM培养基)或Triacsin C(含5 µmol/l Triacsin C和FBS的DMEM培养基)过夜培养。之后用PBS 清洗2次,用4%的PFA在室温下固定5 min后,用PBS 清洗2次。最后,加入0.5 μmol/l Lipi-Blue working solution在室温、避光下染色2 h后,用共聚焦定量细胞成像仪进行定量分析。

Lipi系列荧光图谱

Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

脂肪滴产品种类的检测方法

产品名称 规格 货号
成像(成像)

脂滴荧光探针

Lipi-Blue 10 nmol LD01
Lipi-Green 10 nmol LD02
Lipi-Red 100 nmol LD03
Lipi-Deep Red 10 nmol LD04
定量(荧光酶标仪,FCM)
脂滴荧光检测试剂盒
Lipid Droplet Assay Kit – Blue 1 set LD05
Lipid Droplet Assay Kit – Deep Red 1 set LD06

常用问题Q&A

Q1:油酸溶液的制备和加入细胞的方法
A1:我们按照以下步骤制备和使用油酸溶液。
<油酸储存溶液>
必要的试剂
·BSA(牛血清白蛋白)
·油酸
·0.1 mol/l Tris-HCl(pH8.0)
制备步骤
1)在0.1 mol/l Tris-HCl(pH8.0)中加入BSA并溶解(BSA:浓度0.14 g/ml)。
2)在容器(一次性的离心管)中加入油酸后,加入步骤1)得到的BSA溶液,使用涡旋振荡器进行混合(油酸浓度:4 mmol/l)。*1
3)用孔径为0.22 µm的注射式过滤器(PTFE)过滤步骤2)的混合溶液。
4)每次使用后冷藏保存。*2
* 1   油酸和BSA溶液混合可能导致液体混浊,继续摇动让油酸和BSA形成复合物使混浊会消失。
* 2 将所需量的油酸储备溶液加入到实验使用的培养基中,用于将油酸加入到细胞中。
<加入细胞的方法>
1)将细胞在37℃ 5%CO2培养箱内培养24 h。
2)用加入了油酸储备溶液的培养基(油酸的终浓度200 µmol/L)替换,再培养24 h。
3)然后按照说明书对脂滴进行荧光染色观察。
Q2:共染时推荐的荧光滤光片。
Lipi-Blue试剂货号:LD01 脂滴检测(蓝色)

 

Q3:检测不到荧光信号的应对方法是什么?
  Q4如果没有检测到荧光信号,可能会有几个因素。
请确认以下内容,并根据情况考虑优化条件。
1.激发·发射波长与染料的荧光特性不一致。
确认说明书上的荧光图谱和您仪器的激发和发射波长是否匹配。
2.染色条件不是最合适的。
[试剂浓度]
确认工作液的浓度是否在以下范围内。
Lipi-Blue,Lipi-Green:0.1-0.5μmol/l
Lipi-Red:1-5μmol/l
*如果在上述条件下仍未检测到荧光信号,请提高染色浓度。
Lipi-Blue,Lipi-Green:1-2μmol/l
Lipi-Red:10-20μmol/l
[染色时间]
-一般是30min,如没有荧光信号可以延长染色时间至1-2 h。
3.固定条件不适合。
根据细胞种类不同,染色前后的固定操作可能会导致无法染色或灵敏度减弱。
在这种情况下,“请参考Q&A:是否可以对固定细胞进行染色?。
4.脂滴小,难以确认。
根据细胞的不同,可能会有脂滴很小难以确认的情况。
这种情况下,我们建议在高倍率的显微镜下确认,或用油酸处理细胞作为阳性对照进行评估。
Q4:是否可以对固定细胞进行染色?
A4:可以染色,固定细胞的染色步骤有以下注意事项:
※请用多聚甲醛 (PFA) 固定细胞,不建议用甲醇等醇类固定细胞,因为可能会影响脂滴的结构。
※部分细胞种类染色后,如果在固定细胞过程中出现无染色或染色强度不够的情况,需要摸索最佳固定条件。
○细胞染色后固定实验例 (以HepG2细胞为例)
1. 将HepG2细胞接种在µ-Slide 8孔板上,并在37℃ 5% CO2培养箱中过夜培养。
2. 去除培养基,用PBS清洗2次。
3. 在细胞中加入用PBS配制的Lipi工作液,在37℃培养箱中培养15 min。
4. 去除上清液,用PBS清洗2次。
5. 加入4% PFA (在PBS中),在室温固定5 min。
6. 去除上清液,用PBS清洗后,在荧光显微镜下观察。
○细胞染色前固定实验例 (以HeLa细胞为例)
1. 将HeLa细胞接种在µ-Slide 8孔板上,并在37℃ 5% CO2培养箱中过夜培养。
2. 去除培养基,用PBS清洗2次。
3. 加入4% PFA (在PBS中),在室温固定5 min。
4. 去除上清液,用PBS清洗2次。
5. 在细胞中加入用PBS配制的Lipi工作液,在37℃培养箱中培养30 min。
6. 去除上清液,用PBS清洗后,在荧光显微镜下观察。

参考文献

1) Y. Tatenaka, H. Kato, M. Ishiyama, K. Sasamoto, M. Shiga, H. Nishitoh and Y. Ueno, “Monitoring Lipid Droplet Dynamics in Living Cells by Using Fluorescent Probes”, Biochemistry., 2019, DOI: 10.1021/acs.biochem.8b01071 .

参考文献

1) Y. Tatenaka, H. Kato, M. Ishiyama, K. Sasamoto, M. Shiga, H. Nishitoh and Y. Ueno, “Monitoring Lipid Droplet Dynamics in Living Cells by Using Fluorescent Probes”, Biochemistry., 2019, DOI: 10.1021/acs.biochem.8b01071 .

日本同仁化学Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01| DOJINDO

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Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01
葡萄糖摄取检测试剂盒
葡萄糖代谢、葡萄糖摄取
商品信息
储存条件:0-5°C
运输条件:常温

特点:

 

● 检测灵敏度高

● 操作简便,用时短

● 可以用荧光酶标仪做高通量筛选

● 荧光染料泄露少,数据重现性高

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葡萄糖摄取检测

选择规格:
1 set

期货

数据重现性高

葡萄糖检测试剂盒(点击查看)

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

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产品优势
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实验例
常见问题Q&A
规格性状

产品解说

 

产品概述

细胞通过摄入各种各样的营养物质并在胞内的代谢作用下产生能量。营养物代谢的过程随着细胞外环境、细胞状态、细胞种类的不同亦不尽相同。近年来的研究发现,营养代谢不仅与能量的产生密切相关,还与基因表达等各种各样的细胞调节机制有关。葡萄糖是最重要的一种营养物质,细胞摄取葡萄糖的过程对于研究和理解细胞机能非常重要。细胞摄取葡萄糖的评价方法主要是放射性同位素示踪法。但是由于放射性同位素示踪法操作繁杂,泛用性并不高。另外,还有一种使用2-Deoxy-D-glucose(2-DG)的酶循环法,该方法虽然可以进行孔板检测,但是无法用于荧光显微镜和流式细胞仪观察。因此,最近常用的方法是通过葡萄糖类似物2-NBDG的荧光检测法1)。然而,2-NBDG也有荧光强度弱、灵敏度低的问题,而且被细胞摄取的2-NGDG还有从细胞中向外泄漏的情况出现。同仁化学研究新开发的荧光葡萄糖类似物Glucose Uptake Probe-Blue是一种比2-NBDG灵敏度更高的葡萄糖摄取能力检测试剂。而且使用本试剂盒中包含的Washing and Imaging (WI) Solution可以抑制探针从细胞内泄漏,得到重现性更高的实验数据。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

产品优势

与传统方向相比的优势! 4大特征

Glucose Uptake Probe-Blue是蓝色荧光染料,可以轻松得与其他颜色的荧光染料共染色。另外,由于采用高亮度的荧光染料,相较于传统方法(2-NBDG)可以在更短时间内进行高灵敏度检测。

① 与其他荧光染料的共染色

可以根据实验需求,选择其他荧光染料与Glucose Uptake Probe进行共染色,一次检测多个指标。下图是用Glucose Uptake Probe Blue与脂肪滴(红色:Lipi-Red 货号LD03)共染色脂肪细胞分化而来的3T3-L1细胞的荧光图像。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

<观测条件>

细胞: 3T3-L1

检测条件:

Glucose Uptake Probe-Blue:Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Lipi-Red:Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

② 可用荧光显微镜或流式细胞仪检测

下面是分别使用不含葡萄糖的培养基以及高葡萄糖浓度的培养基培养A549细胞并用Glucose Uptake Probe-Blue进行染色的实验结果。可以观察到高浓度葡萄糖对Glucose Uptake Probe-Blue摄入的抑制作用。结果分别用荧光显微镜和流失细胞仪进行检测。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

细胞:A549

检测条件

Glucose Uptake Assay Kit-Blue:Ex = 340-380 nm, Em = 435-485 nm

③ 快速检测

使用高亮度的Glucose Uptake Probe-Blue,即使使用2-NBDG完全相同的实验步骤,也可以大幅缩短实验时间。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

操作的前处理、染色(进入细胞内的过程)的步骤只需要清洗3次,非常简便。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

④  减少荧光染料的泄漏

使用试剂盒附带的WI Solution清洗细胞,可以抑制染料进入细胞后的泄漏,得到重现性更高的数据。详细的实验数据请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green 货号UP02的页面。

 

与传统法的比较

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

*以上结果源自A549细胞实验的结果,其他细胞系的向胞外泄露的时间可能不同。

相关产品区别

与Glucose Assay Kit的不同点

Glucose Uptake Probe-Green和Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)的不同点。

 

1.Glucose Assay Kit-WST可以定量检测细胞上清液中葡萄糖的消费量。

Glucose Uptake Assay Kit无法定量检测葡萄糖。

 

2.Glucose Uptake Assay Kit-Green可短时间内检测葡萄糖摄取能力的差值。

Glucose Assay Kit-WST无法在短时间内检测葡萄糖量的变化。

 

详细的实验数据请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green 货号UP02的页面。

实验例

实验例1:Cytochalasin B对葡萄糖摄取的抑制作用

HepG2细胞经过葡萄糖转运蛋白抑制剂Cytochalasin B处理后,使用本试剂盒对葡萄糖摄取能力的抑制作用进行高灵敏度观察。

 

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

(Scale Bar: 50 μm)

 

<观测条件>

细胞:HepG2细胞

使用培养基:MEM (5.5 mmol/l Glucose)

培养条件:5 µmol/l Cytochalasin B / MEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS), 37℃, 24 h

染色条件:Glucose Uptake Probe (500倍稀释)/DMEM (0 mol/l Glucose), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜;

Glucose Uptake Assay Kit-Blue: Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Green: Ex = 450-490 nm; Em = 500-550 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Red: Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

实验例2:Insulin(胰岛素)对细胞葡萄糖摄取能力的促进

胰岛素对脂肪细胞(adipocyte)的葡萄糖摄取能力的影响通过本试剂盒进行高灵敏度检测。

荧光显微镜观察

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

(Scale Bar: 50 μm)

 

<观测条件>

细胞:mouse adipocyte

使用培养基:DMEM (5.5 mmol/l Glucose, 10% FBS)

刺激条件:0 or 1 µmol/l Insulin / DMEM (0 mmol/l Glucose , serum free), 37℃, 15 min

染色条件:Glucose Uptake Probe-Green (500倍稀释) /DMEM (0 mmol/l Glucose, serum free), 37℃, 15 min

检测仪器:荧光显微镜;

Glucose Uptake Assay Kit-Blue: Ex = 340-380 nm; Em = 435-485 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Green: Ex = 450-490 nm; Em = 500-550 nm

Glucose Uptake Assay Kit-Red: Ex = 533-557 nm; Em = 570-640 nm

 

实验例:饥饿培养诱导细胞自噬以及葡萄糖摄取能力的变化

用自噬体染色试剂DAPRed和自噬溶酶体染色试剂DALGreen染色HeLa细胞后,再用不含氨基酸的培养基饥饿培养3小时诱导细胞自噬。通过荧光显微镜观察发现DAPRed和DALGreen的荧光强度增强,证明细胞自噬的发生,另外通过Glucose Uptake Probe-Blue观察到细胞摄取葡萄糖的能力上升。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

<检测条件>

Blue: Ex = 340-380 nm, Em = 435-485 nm

Green: Ex = 450-490 nm, Em = 500-550 nm

Red: Ex = 533-557 nm, Em = 570-640 nm

Scale bar: 50 μm

常见问题Q&A

Q1:Glucose Uptake Probe-Blue具体是通过哪种葡萄糖转运蛋白进入细胞的?
A:对于具体的每一种葡萄糖转运蛋白的特异性目前还没有详细的数据。
Q2:Glucose Uptake Probe-Blue被细胞摄入后,会被分解或代谢掉吗?
A:染料的荧光部分非常稳定,实验范围内的操作不会造成分解。另外,类葡萄糖的部位,从结构上考虑可能会被Hexokinase(己糖激酶)磷酸化,除此以外应该不会参加任何代谢反应。
Q3: Glucose Uptake Probe-Blue被活细胞摄入后,可以进行细胞固定的操作吗?
A:由于荧光探针会从细胞内漏出,染色后无法进行细胞固定。
Q4:Probe working solution可以长期保存吗?
A:Probe working solution无法长期保存,请现配现用。Probe stock solution冷冻可以保存一个月。
Q5: 无法观察到荧光信号变化的时候,应该怎么办?
A:预实验的时候可以先从稀释浓度(x250~x1,000)、染色时间(5 min~1 h)范围内进行摸索。
Q6:荧光背景高的时候,应该怎么办?
A:可能是由于有未被细胞摄入的残留荧光染料。请用WI Solution再多进行一次清洗操作。
Q7: 用WI solution清洗之后,荧光染料可以在细胞内停留多长时间?
A:一般在室温下可以保持在细胞内1 h左右,不同的细胞种类,时间可能会有一定差别。
Q8:可以对葡萄糖进行定量检测吗?
A:本产品不能用于葡萄糖的定量检测。如果需要定量检测培养基中的葡萄糖的消耗量或者细胞内的葡萄糖量,可以使用同仁化学研究所的Glucose Assay Kit-WST(货号:G264)。
Q9: 可以对被细胞摄入的染料进行定量吗?
A:不可以对细胞摄入的染料进行定量。本试剂盒是葡萄糖摄取能力强弱或增减的检测试剂盒。
Q10: 如果无法通过葡萄糖的竞争性抑制细胞探针的摄取,该如何解决?
A:竞争性抑制是否发生取决于每个细胞中的葡萄糖转运蛋白的表达水平和类型。(例如:HepG2细胞)Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

在这种情况下,使用2-脱氧葡萄糖(2-DG)进行预处理可能会在葡萄糖竞争抑制方面产生差异。请参考Glucose Uptake Assay Kit-Green(产品代码:UP02)的使用示例。

2-DG预处理对探针摄取的抑制和葡萄糖竞争性抑制(HepG2细胞)

1.将细胞接种在培养皿或微孔板中,并在5% CO₂培养箱(37°C)中培养过夜。

2.除去培养基[DMEM (10% FBS,高葡萄糖)]后,加入50 mmol/l 2-DG/培养基,并在5% CO₂培养箱(37℃)中培养细胞2小时。

3.清洗细胞两次。

4.加入预热的DMEM(无葡萄糖,无血清)并将细胞在5%CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

5.除去上清液后,加入预热的探针溶液并在5% CO₂中孵育 在培养箱(37°C)中培养15 min。

6.除去上清液后,用冷却的WI溶液(1x)洗涤细胞两次。

7.除去上清液后,加入冷却后的WI溶液(1x),并在室温下培养 5分钟。

8.除去上清液后,加入冷却的WI溶液(1x)。

9.荧光显微镜下观察细胞。

Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

Q11: 目前有过检测实例的细胞有哪些?
Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

Q12: 以下为不同细胞添加抑制剂后,葡萄糖摄取能力检测实验。
Glucose(葡萄糖)摄取能力检测试剂盒-Blue货号:UP01

 

规格性状

            Glucose Uptake Probe-Blue  ×1

WI Solution (50X)   5 ml ×1

供参考的可测次数

每个试剂盒大约可检测12枚35 mm dish或1枚96孔板

Nile Red(Synonyms: 尼罗红 Nile Blue A oxazone Phenoxazone 9)

Nile Red;(Synonyms: 尼罗红; Nile Blue A oxazone; Phenoxazone 9) 纯度: 98.02%

Nile Red (Nile Blue A oxazone) 是一种针对细胞内脂质小滴和中性脂质的选择性疏水性荧光染料。Nile Red 在所有有机溶剂中均具有强烈的荧光性,其荧光颜色范围从金黄色到深红色。

Nile Redamp;;(Synonyms: 尼罗红; Nile Blue A oxazone;  Phenoxazone 9)

Nile Red Chemical Structure

CAS No. : 7385-67-3

规格 价格 是否有货 数量
Free Sample (0.1-0.5 mg) ; Apply now ;
10;mM;*;1 mL in DMSO ¥440 In-stock
10 mg ¥400 In-stock
50 mg ¥650 In-stock
100 mg ¥800 In-stock
500 mg ¥1400 In-stock
1 g ; 询价 ;
5 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

Nile Red 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Bioactive Compound Library Plus

生物活性

Nile Red (Nile Blue A oxazone) is a selective and hydrophobic fluorescent stain for intracellular lipid droplets and neutral lipids. Nile Red is intensely fluorescent in all organic solvents and the fluorescence colors range from golden yellow to deep red[1][2].

体外研究
(In Vitro)

Nile red-stained, lipid droplet-filled macrophages exhibit greater fluorescence intensity than does Nile red-stained control macrophages, and the two cell populations could be differentiated and analyzed by flow cytofluorometry. Better selectivity for cytoplasmic lipid droplets is obtained when the cells are viewed for yellow-gold fluorescence (excitation, 450-500 nm; emission, greater than 528 nm) rather than red fluorescence (excitation, 515-560 nm; emission, greater than 590 nm)[1].
Nile red is strongly fluorescent, but only in the presence of a hydrophobic environment. Nile red is very soluble in the lipids it is intended to show, and it does not interact with any tissue constituent except by solution[1].
Spectral and physicochemical properties of the lipophilic dye Nile red induce a yellow-gold-spectral shift in its excitation-emission peak, allowing it to fluoresce in the green emission spectrum only when in a lipid-rich environment, but not in more polar environments[4].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

体内研究
(In Vivo)

When Nile red-stained Caenorhabditis elegans is viewed for green fluorescence, discrete lipid bodies can be observed throughout the intestine and other tissues either in clusters or evenly dispersed, depending on the animal’s genotype or experimental treatment[3].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

318.37

Formula

C20H18N2O2

CAS 号

7385-67-3

中文名称

尼罗红

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4deg;C, protect from light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (protect from light)

溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : ≥ 50 mg/mL (157.05 mM)

H2O : 0.1 mg/mL (0.31 mM; Need ultrasonic)

* “≥” means soluble, but saturation unknown.

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1410 mL 15.7050 mL 31.4100 mL
5 mM 0.6282 mL 3.1410 mL 6.2820 mL
10 mM 0.3141 mL 1.5705 mL 3.1410 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

参考文献
  • [1]. Greenspan P, et al. Nile red: a selective fluorescent stain for intracellular lipid droplets. J Cell Biol. 1985 Mar;100(3):965-73.

    [2]. Gibrán S Alemán-Nava, et al. How to use Nile Red, a selective fluorescent stain for microalgal neutral lipids. J Microbiol Methods. 2016 Sep;128:74-79.

    [3]. Wilber Escorcia, et al. Quantification of Lipid Abundance and Evaluation of Lipid Distribution in Caenorhabditis elegans by Nile Red and Oil Red O Staining. J Vis Exp. 2018 Mar 5;(133):57352.

    [4]. Elizabeth C Pino, et al. Biochemical and high throughput microscopic assessment of fat mass in Caenorhabditis elegans. J Vis Exp. 2013 Mar 30;(73):50180.

Thiazolyl Blue(Synonyms: MTT Thiazolyl Blue Tetrazolium bromide Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide)

Thiazolyl Blue;(Synonyms: MTT; Thiazolyl Blue Tetrazolium bromide; Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide) 纯度: 99.84%

Thiazolyl Blue (MTT) 是一种广泛用于测量细胞增殖的比色剂。Thiazolyl Blue (MTT) 在活细胞中从黄色还原为紫色甲。

Thiazolyl Blueamp;;(Synonyms: MTT; Thiazolyl Blue Tetrazolium bromide; Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide)

Thiazolyl Blue Chemical Structure

CAS No. : 298-93-1

规格 价格 是否有货 数量
Free Sample (0.1-0.5 mg) ; Apply now ;
10;mM;*;1 mL in DMSO ¥550 In-stock
500 mg ¥500 In-stock
1 g ¥800 In-stock
5 g ¥3000 In-stock
10 g ; 询价 ;
50 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

Thiazolyl Blue 相关产品

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生物活性

Thiazolyl Blue (MTT) is a colorimetric agent widely used to measure cell proliferation. Thiazolyl Blue (MTT) is reduced from yellow color to purple formazan in living cells.

体外研究
(In Vitro)

Thiazolyl Blue (MTT) is used in conjunction with rhodamine B to measure mitochondrial membrane potential. Thiazolyl Blue-formazan is generated in mitochondria acts as a fluorescence quencher for rhodamine that distributes across membranes of viable cells according to membrane potential. In the absence of mPMS, cellular reduction of Thiazolyl Blue is strong. Thiazolyl Blue is membrane-impermeable when incorporated into large unilamellar liposomes, and therefore it is taken up by cells via endocytosis[1].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

414.32

Formula

C18H16BrN5S

CAS 号

298-93-1

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4deg;C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 25 mg/mL (60.34 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C)

H2O : 0.88 mg/mL (2.12 mM; Need ultrasonic and warming)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4136 mL 12.0680 mL 24.1359 mL
5 mM 0.4827 mL 2.4136 mL 4.8272 mL
10 mM 0.2414 mL 1.2068 mL 2.4136 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂:;PBS

    Solubility: 6.67 mg/mL (16.10 mM); Clear solution; Need ultrasonic

  • 2.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 3.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (5.02 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献
  • [1]. Berridge MV, et al. Tetrazolium dyes as tools in cell biology: new insights into their cellular reduction. Biotechnol Annu Rev. 2005;11:127-52.

荧光染料Bromophenol blue(Synonyms: 溴酚蓝)

荧光染料Dye Reagents Bromophenol blue;(Synonyms: 溴酚蓝)

Bromophenol blue 是一种酸性酞菁染料,被用作电泳的示踪染料。Bromophenol blue 也用作 pH 指示剂,pH 指示范围在 3 至 4.6 之间。

Bromophenol blueamp;;(Synonyms: 溴酚蓝)

Bromophenol blue Chemical Structure

CAS No. : 115-39-9

规格 价格 是否有货 数量
10;mM;*;1 mL in DMSO ¥500 In-stock
500 mg ¥500 In-stock
1 g ; 询价 ;
5 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

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  • Bioactive Compound Library Plus
  • Covalent Screening Library

生物活性

Bromophenol blue is an acid phthalein dye, and it is used as a tracking dye for electrophoresis. Bromophenol blue is also used as a pH indicator, with a transition range of pH 3 to 4.6[1][2].

分子量

669.96

Formula

C19H10Br4O5S

CAS 号

115-39-9

中文名称

溴酚蓝

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4deg;C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 50 mg/mL (74.63 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.4926 mL 7.4631 mL 14.9263 mL
5 mM 0.2985 mL 1.4926 mL 2.9853 mL
10 mM 0.1493 mL 0.7463 mL 1.4926 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献
  • [1]. Mendoza L, et, al. Nanocellulose for gel electrophoresis. J Colloid Interface Sci. 2019 Mar 22; 540: 148-154.

    [2]. Dangui AZ, et, al. Preferential solvation bromophenol blue in water-alcohol binary mixture. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. 2018 Oct 5; 203: 333-341.

荧光染料Reactive Blue 4(Synonyms: 活性蓝4)

荧光染料Dye Reagents Reactive Blue 4;(Synonyms: 活性蓝4) 纯度: ge;97.0%

Reactive Blue 4 是一种蒽醌类染料,能作为单一的比色化学传感器,用于在水介质中连续测定具有不同光学响应的多种分析物。Reactive Blue 4 具有植物毒性、细胞毒性和基因毒性。

Reactive Blue 4amp;;(Synonyms: 活性蓝4)

Reactive Blue 4 Chemical Structure

CAS No. : 13324-20-4

规格 价格 是否有货 数量
10;mM;*;1 mL in DMSO ¥550 In-stock
500 mg ¥500 In-stock
1 g ; 询价 ;
5 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

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生物活性

Reactive Blue 4 is an anthraquinone dye, as a single colorimetric chemosensor for sequential determination of multiple analytes with different optical responses in aqueous media. Reactive Blue 4 is phytotoxic, cytotoxic and genotoxic. Reactive Blue 4 [1][2].

分子量

637.43

Formula

C23H14Cl2N6O8S2

CAS 号

13324-20-4

中文名称

活性蓝4

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式
Powder -20deg;C 3 years
4deg;C 2 years
In solvent -80deg;C 6 months
-20deg;C 1 month
溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 83.33 mg/mL (130.73 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5688 mL 7.8440 mL 15.6880 mL
5 mM 0.3138 mL 1.5688 mL 3.1376 mL
10 mM 0.1569 mL 0.7844 mL 1.5688 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 4.17 mg/mL (6.54 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 4.17 mg/mL (6.54 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 41.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 4.17 mg/mL (6.54 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 4.17 mg/mL (6.54 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 41.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
  • 3.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% corn oil

    Solubility: ≥ 4.17 mg/mL (6.54 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 4.17 mg/mL (6.54 mM,饱和度未知) 的澄清溶液,此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 41.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。

  • 4.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (3.26 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (3.26 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 5.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (3.26 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (3.26 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献
  • [1]. Reactive Blue 4 as a Single Colorimetric Chemosensor for Sequential Determination of Multiple Analytes with Different Optical Responses in Aqueous Media: Cu2+-Cysteine Using a Metal Ion Displacement and Cu2+-Arginine Through the Host-Guest Interaction.

    [2]. Chaudhari AU, et al. Effective biotransformation and detoxification of anthraquinone dye reactive blue 4 by using aerobic bacterial granules. Water Res. 2017 Oct 1;122:603-613.

荧光染料Bromophenol blue(Synonyms: 溴酚蓝)

荧光染料Dye Reagents Bromophenol blue;(Synonyms: 溴酚蓝)

Bromophenol blue 是一种酸性酞菁染料,被用作电泳的示踪染料。Bromophenol blue 也用作 pH 指示剂,pH 指示范围在 3 至 4.6 之间。

Bromophenol blue(Synonyms: 溴酚蓝)

Bromophenol blue Chemical Structure

CAS No. : 115-39-9

规格 价格 是否有货 数量
10;mM;*;1 mL in DMSO ¥500 In-stock
500 mg ¥500 In-stock
1 g ; 询价 ;
5 g ; 询价 ;

* Please select Quantity before adding items.

Bromophenol blue 相关产品

bull;相关化合物库:

  • Covalent Screening Library Plus
  • Bioactive Compound Library Plus
  • Covalent Screening Library

生物活性

Bromophenol blue is an acid phthalein dye, and it is used as a tracking dye for electrophoresis. Bromophenol blue is also used as a pH indicator, with a transition range of pH 3 to 4.6[1][2].

分子量

669.96

Formula

C19H10Br4O5S

CAS 号

115-39-9

中文名称

溴酚蓝

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4deg;C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80deg;C, 6 months; -20deg;C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

溶解性数据
In Vitro:;

DMSO : 50 mg/mL (74.63 mM; Need ultrasonic)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.4926 mL 7.4631 mL 14.9263 mL
5 mM 0.2985 mL 1.4926 mL 2.9853 mL
10 mM 0.1493 mL 0.7463 mL 1.4926 mL

*

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。

In Vivo:

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:

——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用; 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 1.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 40% PEG300 ;; 5% Tween-80 ;; 45% saline

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀;然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

    将 0.9 g 氯化钠,完全溶解于 100 mL ddH₂O 中,得到澄清透明的生理盐水溶液

  • 2.

    请依序添加每种溶剂:;10% DMSO ;; 90% (20% SBE-β-CD in saline)

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM); Clear solution

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL (3.73 mM,饱和度未知) 的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中,混合均匀。

    将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中,再用生理盐水定容至 10 mL,完全溶解,澄清透明
*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
参考文献
  • [1]. Mendoza L, et, al. Nanocellulose for gel electrophoresis. J Colloid Interface Sci. 2019 Mar 22; 540: 148-154.

    [2]. Dangui AZ, et, al. Preferential solvation bromophenol blue in water-alcohol binary mixture. Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. 2018 Oct 5; 203: 333-341.

荧光染料Vat Blue 2

荧光染料Dye Reagents Vat Blue 2;

Vat Blue 2 是一种靛蓝 (HY-N0335) 衍生物,是一种深蓝色的 5,5′-二溴-4,4′-二氯靛染料 (dye)。

Vat Blue 2

Vat Blue 2 Chemical Structure

CAS No. : 29245-44-1

规格 是否有货
5 mg 询价
10 mg 询价
100 mg 询价

* Please select Quantity before adding items.

生物活性

Vat Blue 2, a indigo (HY-N0335) derivative, is a dark blue 5,5′-dibromo-4,4′-dichloroindigo dye[1].

体外研究
(In Vitro)

Indigo is the parent compound for a series of bromine and chlorine-substituted dyestuffs. Vat Blue 2 has four substituents, two each of chlorine and bromine, but located at different positions[1].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

488.95

Formula

C16H6Br2Cl2N2O2

CAS 号

29245-44-1

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

参考文献
  • [1]. Judy D. Timpa, et al. The Flammability of Cotton Fabrics Dyed with Indigo Dyes.