测序级重组赖氨酰内肽酶/胰蛋白酶预混装

◆概述

本品选用A. Lyticus 来源氨基酸序列，利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C，能够特异性识别并酶切肽链中Lys羧基端肽键；其与重组表达并经甲基化修饰的测序级胰蛋白酶，经研究和方法验证，按照特定比例混合后，能够在一次酶切或分步酶切中，保证特异性的前提下，酶切效率更高，便于进行序列分析。

◆优势

1）采用甲基化修饰重组表达胰蛋白酶，其赖氨酸残基经甲基化修饰有效防止酶切缓冲中胰酶自切或被Lys-C降解造成胰酶活性的降低。

2）独有的Lys-C重组表达制备技术，保证高纯度与高酶活性的同时，无任何杂酶活性，确保酶切反应的特异性。

◆纯度·来源

选用A. Lyticus 来源氨基酸序列，利用独特大肠杆菌重组表达技术制备的Lys-C

选用猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因，利用毕赤酵母菌株重组表达技术制备的胰蛋白酶

◆使用方法

溶解缓冲：用无菌水或者50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5；溶解后分装，-15℃以下保存。

酶切缓冲：50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5

推荐条件：蛋白酶:融合蛋白质量比1:25~1:100（蛋白组学或肽图）37℃反应。

          针对疏水性强、溶解性较差的蛋白，可添加变性剂或者封闭二硫键（烷基化）使其空间结构被打开，从而提高酶切效率或者提高肽图覆盖率。

可以参考以下方法：

两步溶出法消化：可以添加终浓度为5 mmol/L的DTT 在室温反应30 min ； 再加入终浓度为10 mmol/L 的碘乙酰胺，在室温避光反应30 min。蛋白溶液中补入终浓度6~8 mol/L 尿素，胰蛋白酶/Lys-C 与蛋白质或蛋白质混合物以1：25 的蛋白质∶蛋白酶比(w/w)混合并在37℃下孵育3~4 h，用酶切缓冲稀释尿酸降至1 mol/L 以下，在37℃反应过夜。

终止反应：加入终浓度0.5-1%三氟乙酸，14000-16000×g，离心10 min 去除沉淀颗粒。

◆保存条件

储存稳定性：冻干粉存于-15℃以下，24 个月稳定；50 mmol/L Tris-HCl pH 8.0~8.5 溶解后储存于-15℃以下，反复冻融5次，无活性损失。

运输稳定性：冰袋保温运输，活性稳定。

◆应用实例

Lys-C/Trypsin Mix 与Trypsin 特异性酶切抗体对比图

蛋白酶：单抗质量比1:25，37℃酶切反应过夜。

(更多范畴应用实例，请与我们联系)

◆产品列表

◆相关产品

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

重组双碱性氨基酸内肽酶检测试剂盒

◆原理

本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中双碱性氨基酸内肽酶的微量残留。用捕获抗体包被96孔酶标板，制成固相抗体，往酶标板中加入标准品和检测样品，与检测抗体桥联结合，再加入辣根过氧化物酶标记物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算待测样品中双碱性氨基酸内肽酶的残留量。

◆特点

●　高灵敏度，能检测低至0.98 ng/mL的双碱性氨基酸内肽酶残留

●　采用双抗体夹心法，特异性更高，能检测不同来源的双碱性氨基酸内肽酶

●　提供预包被的96孔板，检测更稳定

●　可拆卸的96孔板，操作更灵活

●　适用于重组蛋白药物残留检测

◆操作流程

◆产品信息

重组蛋白药物或融合表达工艺中，使用到了重组或天然的双碱性氨基酸内肽酶进行酶切，可以以本试剂盒进行以检测样品中微量双碱性氨基酸内肽酶残留量。

◆产品列表

◆相关产品

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒

◆原理

本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术测定样品中赖氨酰内肽酶（Lys-C）的微量残留。用捕获抗体包被96孔酶标板，制成固相抗体，往酶标板中加入标准品和检测样品，与检测抗体桥联结合，再加入辣根过氧化物酶标记物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算待测样品中赖氨酰内肽酶的残留量。

◆特点

●　高灵敏度，能检测低至0.98 ng/mL的赖氨酰内肽酶残留

●　采用双抗体夹心法，特异性更高，能检测不同厂家无色杆菌来源的Lys-C

●　提供预包被的96孔板，检测更稳定

●　可拆卸的96孔板，操作更灵活

●　适用于重组蛋白药物残留检测

◆操作流程

◆产品信息

重组蛋白药物或融合表达工艺中，使用到了重组或提取的无色杆菌来源赖氨酰内肽酶进行酶切，可以以本试剂盒进行以检测样品中微量赖氨酰内肽酶残留量。

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。