逆转录（也成为反转录病毒，Retrovirus）病毒载体是常用的病毒载体之一。转入宿主的细胞后，反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内，这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右，以很高的转染率感染宿主细胞，特别是分裂中的细胞。

逆转录病毒通过整合进目的细胞基因组，能实现持久的表达，而且几乎没有免疫原性，因此很受欢迎。特别是和腺病毒相比，其能整合进基因组的优势导致逆转录病毒也被广泛应用，然后逆转录病毒系统也存在一定的缺陷，首先是安全性比较低，因为所有包装所需的基因都放到一个载体上，还有就是基因能整合进目的细胞也可能会导致细胞基因组的紊乱，而且其滴度比较低。由于逆转录病毒表达系统的特殊性，其包装细胞的种类较多，表达载体的种类也较多，因此需要根据不同的实际来选择合适的表达系统。Cell Biolabs的逆转录病毒表达产品包括包装细胞系、表达系统（同时包括了包装细胞和表达质粒载体）、逆转录病毒表达质粒以及插入了目的基因的重组逆转录病毒表达质粒。

Cell Biolabs提供三种铂金版逆转录病毒包装细胞系：单嗜性（Ecotropic）Plat-E包装细胞系、双嗜性（Amphotropic）Plat-A包装细胞系及泛嗜性（Pantropic）Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。

Plat-E包装细胞系（Ecotropic）是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒，同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜，因而只能感染小鼠和大鼠细胞。Plat-GP包装细胞系（Pantropic）也来源于HEK293，但却是一种泛嗜性的包装细胞系，其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞，也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白，能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时，还需要额外的使用pVSV-G完成包装。Plat-A包装细胞系（Amphotropic）也是一种来源于HEK293细胞的细胞，在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记，因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。

一般来说，Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞；Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞（但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G，该外壳蛋白宿主范围非常广）；Plat-A用的比较少，但是其宿主范围比Plat-E要多一些，比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统，针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒，逆转录病毒的快速定量，以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等，几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

安全高效的将目的基因导入人体靶细胞是成功进行基因治疗的关键之一。经典的基因导入方式（如显微注射、电穿孔、磷酸钙转染等）虽然曾在科研中起了一定的作用，但由于不能很好的解决转染率、靶向性等问题而限制了它们的应用。随着病毒学等相关学科的发展，目前基因打靶已广泛使用各种病毒为载体，AAV载体是最近几十年发展起来的一类新型载体。作为病毒载体的重要一员，AAV不具有明显的细胞毒性效应并且不会像其他病毒载体那样引起细胞强烈的免疫反应等特性，因为其在基因治疗中的应用潜力引起了人们越来越多的兴趣和关注。

由于AAV是天然的缺陷性病毒，需要提供多个因素才能导致转染发生，因此也被认为是最安全的病毒载体。同时腺相关病毒能感染分裂型和非分裂型细胞，甚至S期静止细胞，这使腺相关病毒成为很有前途和吸引力的基因治疗载体。腺相关病毒的转导过程包括病毒结合、进入细胞以及进入后的作用、核内转移和病毒第二条DNA链的合成。在这过程中，最后一步，也就是AAV第二条DNA链的合成是腺相关病毒载体转染的限速步骤。

Cell BioLabs针对腺相关病毒转染过程中的主要问题，开发出ViraDuctin™腺相关病毒转染试剂（ViraDuctin™ AAV Transduction Kit 目录号：AAV-200/AAV-201）。该试剂盒能高效提高腺相关病毒在多种细胞内的转染效率，包括传统转染方法转导较低的细胞非分裂细胞，如原代培养细胞和干细胞。该转染试剂使用便捷，只需2小时，是AAV转染非分裂细胞的首选。该试剂盒按照可转染次数分两种包装，AAV-200能进行10次6孔板或者35mm细胞培养皿的转染，货号为AAV-201的则能进行50次转染。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供高效简便的重组腺相关病毒相关产品和服务，产品包括腺相关病毒的纯化、定量和高效转染试剂。ViraBind™腺相关病毒纯化试剂盒采用特殊的纯化Matrix技术，无需超速离心，在大大减少试验时间的同时还保证了AAV的纯度。QuickTiter™腺相关病毒定量试剂盒通过检测腺相关病毒DNA含量来测定其病毒含量，只需2小时。ViraDuction™腺相关病毒转导试剂能极大的增加腺相关病毒在多种细胞内的转导效率，包括传统转染方法转导效率低的非分裂细胞，如原代培养细胞和干细胞。如果您对腺相关病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺相关病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题，是无法高效转导非分裂期细胞，而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞，但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达，且反复应用容易引起免疫反应。慢病毒载体不但可以感染非分裂期细胞，还具有容纳外源性目的基因片段大、免疫反应小等优点，在基因治疗中具有广泛的应用前景。

人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)改造的慢病毒载体(Lentiviral vector)既可感染分裂细胞，也可感染非分裂细胞，如神经细胞、造血干细胞、肝细胞等，还具有整合到宿主细胞基因组、稳定长效转染、感染效率高等优点，是细胞基因功能研究和基因治疗中不可多得的优良载体。目前对于慢病毒的滴度滴定大部分通过检测腺病毒内壳蛋白p24的表达来完成。而在一些商用的腺病毒载体中，由于加入了GFP标记蛋白，因此也可以通过流式细胞仪检测GFP蛋白表达水平来分析病毒滴度，病毒滴度为表达GFP的细胞数乘以相应稀释倍数。另外，还可以通过TaqManPCR检测细胞中病毒拷贝数的方法检测滴度。

上海金畔生物科技有限公司针对慢病毒定量为您推荐美国细胞生物学专业产品制造商Cell BioLabs的QuickTiter™ Lentivirus Rapid Quantitation Kit。该试剂盒较p24蛋白表达以及GFP蛋白检测更简介方便，且成本更低。Cell BioLabs慢病毒快速定量试剂盒的工作原理如右图所示，首先使用核酸酶将病毒悬液内的核酸分子降解，然后用特异性的慢病毒捕获珠子结合慢病毒，从而分离出蛋白核酸复合物，洗脱下慢病毒后进一步降解，然后标记其病毒核酸，通过480/520 nm滤镜荧光仪下读取数据，对照慢病毒RNA标准曲线得出慢病毒含量。

Cell BioLabs慢病毒快速定量试剂盒内包括溶液A、溶液B、溶液C、慢病毒捕获液、Dye染料以及慢病毒RNA标准物。该试剂盒能直接用于慢病毒悬液，定量步骤快捷，可以在45-60min内获得数据。检测灵敏，可以从100ul慢病毒上清中检测出10¹⁰VP/ml的慢病毒，足够慢病毒实验中的中、高滴度需求。

Cell BioLabs为您提供全套的慢病毒技术解决方案，ViraSafe腺病毒表达系统有多种样式供您选择；多种慢病毒滴度检测和定量试剂为您提供快捷和准确的慢病毒检测方案；ViraBind™慢病毒浓缩和纯化试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的慢病毒，解决了慢病毒低滴度的软肋；Cell BioLabs还有转为慢病毒载体用的293LTV细胞及慢病毒高效转染试剂供您选择，如果您对慢病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询慢病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

通过对腺病毒基因组的改造，腺病毒载体是继逆转录病毒载体后被广泛应用的转基因载体，现已发展到第三代，转染效率高，且相对制备容易。从最早的腺病毒载体出现至今，腺病毒载体的包装系统已经经历了一系列的改进。腺病毒载体已经被广泛应用于动物细胞的基因转染和基因治疗等。

在腺病毒的应用过程中，我们经常需要测量病毒液的病毒含量以及腺病毒滴度。目前实验里做腺病毒常规滴度检测有通过TCID50或者空斑计数法（PFU）测量腺病毒感染滴度的方法，但是这种传统的方法实验周期较长，操作繁琐。如常规PFU的检测就就需要10天左右的时间。Cell BioLabs的QuickTiter™腺病毒功能滴定试剂盒，采用免疫蛋白反应的原理检测腺病毒标志性外壳蛋白——Hexon的表达含量，从而得到腺病毒液的功能滴度，只需2天多的时间就能获得比常规实验所需要10天的测量结果还要准确的数据。但是即使是这样的方法，也需耗时2天，一般说来，如果已经获得了纯化的病毒液，通过测量OD260来估算病毒颗粒的总含量不失为一种快捷的多的腺病毒定量方案。

上海金畔生物科技有限公司针对腺病毒定量为您推荐美国细胞生物学专业产品制造商Cell BioLabs的QuickTiter™ Adenovirus Rapid Quantitation Kit（目录号：VPK-106）。该试剂盒的工作原理如右图所示，首先使用核酸酶将病毒悬液内的核算分子降解，然后用特异性的腺病毒捕获珠子结合腺病毒，从而分离出蛋白核酸复合物，洗脱下腺病毒后进一步降解，然后标记其病毒核酸，通过480/520 nm滤镜荧光仪下读取数据，对照腺病毒DNA标准曲线得出腺病毒滴度。

Cell BioLabs腺病毒快速定量试剂盒内包括溶液A、溶液B、溶液C、腺病毒捕获液、Dye染料以及腺病毒DNA标准物。该试剂盒不仅能直接用于已纯化的病毒悬液，对于未纯化的腺病毒，该试剂提供快速纯化试剂，您可以在纯化前通过该kit测算出病毒悬液上清中的腺病毒含量，也可以使用该Kit内的纯化试剂先进行纯化步骤。整个腺病毒定量步骤快捷，可以在45-60min内获得数据，检测灵敏。

另外，该定量试剂盒不仅能应用于腺病毒，由于是通过OD260测量核酸含量从而通过与标准曲线的比对得出腺病毒的含量，因此还能应用于其他的病毒定量。如反转录病毒，慢病毒等。 

Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案，RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择，还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用，ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒，Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对腺病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

基因免疫和治疗是将外源目的基因转移到机体内，表达具有生物学功能的蛋白，达到免疫预防或治疗的目的。病毒载体是常用的基因导入方式之一。腺病毒载体(Adenovirus vector，Adv)、反转录病毒载体、腺病毒伴随病毒载体、单纯疱疹病毒载体、痘苗病毒载体和牛乳头瘤病毒载体等是基因免疫和治疗研究中应用较多的载体。目前，基因治疗临床试验的40%都采用腺病毒载体。

重组腺病毒在科学研究和治疗应用领域都具有很大的潜力。同时作为作为基因转移工具相对于其他病毒载体有多方面的优势。腺病毒可感染分裂细胞和非分裂细胞，转导细胞种类多，如肺细胞、肝细胞、骨细胞、血管、肌肉、脑、中枢神经系统等。其感染细胞滴度和外源基因的表达水平较高，因此重组腺病毒被广泛应用于使用脂质体转染效率较低细胞的基因转导和蛋白表达。当腺病毒进入细胞后，病毒不与染色体发生重组重排，因此不会导致宿主细胞基因的激活和失活。最近，重组腺病毒也被应用于递送RNAi到细胞内。

目前比较成熟的制备重组腺病毒的方法主要有两种，第一种是在腺病毒包装细胞系里，通过包含有目的基因的穿梭载体和含有腺病毒骨架质粒载体（E1/E3功能限制型）之间的同源重组重组，然后使用多蚀斑分离方法分离出目的重组腺病毒，这种方法耗时耗力，一般需要12-18周的时间。第二种是使用pAdEasy系统，通过在大肠杆菌E.coli中的双同源重组功能，同源重组目的基因的穿梭载体和把含有腺病毒骨架质粒载体从而得到重组腺病毒，该方案具有很高的保真性，但是由于需要筛选大量的细胞克隆，虽然比第一种方法省略了一些操作步骤，但是也是较为费时的，整个程序约需要8-9周。

针对以上腺病毒表达系统的不足，Cell Biolabs的RAPAd®腺病毒表达系统提供了一个更快更安全的产生无RCA，且高滴度的重组腺病毒方案。该系统使用了全新的腺病毒骨架基因（缺失左侧ITR、包装信号和E1序列），无需进行pAdEasy的细菌体内的同源重组步骤，无需使用多蚀斑分离方法分离目的重组腺病毒的步骤，因此不管是操作上还是时间上都进行了很大的提升。该腺病毒表达系统较其他系统生长更快，只需要2周时间；并且大大降低了重组形成野生型可复制腺病毒的危险，无E1a，不产生复制型腺病毒。

通过RAPAd®腺病毒表达系统产生的重组腺病毒。PacI线性化的pacAd5 RSV-GFP载体和pacAd5 9.2-100载体共转染293细胞后，用倒置荧光显微镜观察到转染后病毒颗粒的位置。

Cell Biolabs的RAPAd®腺病毒表达系统更易实验室人员的使用，操作方法简捷，很容易上手，并且由于对腺病毒骨架载体和穿梭载体都进行了优化，在共转染直到从病毒颗粒中分离过程中都大大简化，同时保证了高效的感染滴度。另外，在Cell Biolabs的RAPAd®腺病毒表达系统中，具有三种启动子模式供您选择。有不含有启动子的，您可以用来表达特异性启动子引导的基因，还有真核基因表达启动子RSV和强力启动子CMV供您选择。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案，RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择，还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用，ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒，Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对腺病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

1953年，Rowe等首次由人的手术切除的扁桃体组织，用血浆埋块培养分离得到一株病毒，得名腺病毒。该病毒是无囊膜的线性双链DNA病毒，腺病毒在自然界分布广泛。通过对腺病毒基因组的改造。腺病毒载体是继逆转录病毒载体后被广泛应用的转基因载体，现已发展到第三代，转染效率高，且相对制备容易。从最早的腺病毒载体出现至今，腺病毒载体的包装系统已经经历了一系列的改进。腺病毒载体已经被广泛应用于动物细胞的基因转染和基因治疗等。

在腺病毒的试验中，我们经常需要测量病毒液的病毒含量以及腺病毒滴度。目前实验里做腺病毒常规滴度检测有通过TCID50或者空斑计数法（PFU）测量腺病毒感染滴度的方法，用纯化的腺病毒通过OD260推算出的腺病毒颗粒滴度的方法等等。但是这种传统的方法，实验周期较长，如常规PFU的检测就就需要10天左右的时间，而通过OD值方案也只是推算，和腺病毒真实的活力滴度还是有一定的误差。

上海金畔生物科技有限公司针对腺病毒滴度测定实验为您推荐美国细胞生物学专业产品制造商Cell BioLabs的QuickTiter™ Adenovirus Functional Titer Kits，该Kit摒弃了传统的空斑形成试验，采用免疫蛋白反应的原理检测腺病毒标志性外壳蛋白——Hexon的表达含量，从而得到腺病毒液的功能滴度。该腺病毒滴度测定试剂盒适用性很广，可用于所有41类血清型的腺病毒。

由于采用了ELISA的方法，滴定实验的时间大大缩短，同时比传统的PFU法滴定结果更为准确，实验操作上也更为快捷，只需2天多的时间就能获得比常规实验所需要10天的测量结果还要准确的数据；另外，由于不需要进行空斑形成实验，无需繁复的琼脂铺层步骤，因此也很便于实验室操作，大大方便了腺病毒使用的科研工作者。 

该腺病毒滴度测定试剂盒内包括hexon一抗、HRP酶联二抗、TMB/DAB底物、终止液及ad-b gal阳性对照；您也可以根据您实验的要求，选择ELISA Kit或者Immunoassay Kit其中的一种。

Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案，RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择，还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用，ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒，Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对腺病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。