ABL(ABL1)[E255K] 品牌:Carna Bio


ABL(ABL1)[E255K]

品牌:Carna Bio
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306-81913

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SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit
SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

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SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit

SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

试剂盒组成

20 Reactions

RT酶混合物(20×)

20 µL x 1支

一步反应混合物(2×)

200 μL x 1支

484E Wild Type Primer & Probe   Mixture(probe:FAM)
484E野生型引物&探针混合物(探针:FAM)

10 µL x 1支

E484K Mutant Type Primer & Probe   Mixture(probe:FAM)
E484K突变型引物&探针混合物(探针:FAM)

10 µL x 1支

200 Reactions

RT酶混合物(20×)

200 µL x 1支

一步反应混合物(2×)

1 mL x 2支

484E Wild Type Primer & Probe   Mixture(probe:FAM)
484E野生型引物&探针混合物(探针:FAM)

100 µL x 1支

E484K Mutant Type Primer & Probe   Mixture(probe:FAM)
E484K突变型引物&探针混合物(探针:FAM)

100 µL x 1支

背景

新冠病毒突变株在世界范围内不断扩散,感染人数也在不断增多。

有报告指出,新冠病毒Beta(B.1.351)突变株和Gamma(P.1)突变株含有的E484K突变或会逃避免疫,使疫苗的效果降低1-3)


※ Beta(B.1.351)突变株:在南非首次发现的突变株

※ Gamma(P.1)突变株:在巴西首次发现的突变株

 

通过FUJIFILM Wako开发的Primer设计技术,可以高灵敏检测难以被检测的基因点突变。本产品是快速简便检测E484K突变的试剂盒。

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

特点

判定容易

通过比较使用突变株与野生株Primer/Probe Set时的Ct值来判定

一步法RT-qPCR快速检测突变

约70 min即可完成

使用FUJIFILM Wako研发的Primer/Probe,高灵敏检测突变

所有突变株均可在相同的反应条件下检测

由于N501Y、E484K、L452R、E484Q的PCR反应条件均相同,可在同一个96孔板中进行检测。

 

 

检测原理

采用TaqMan®探针的一步法RT-qPCR。

利用FUJIFILM Wako开发的Primer,高灵敏度检测点突变。

▼使用前

病毒RNA量较多情况下,在突变株中使用常规株(非突变)检测用“484E Wild type Primer & Probe Mixture”,也可以观察到扩增信号。务必使用常规株(非突变)检测用的“484E Wild type Primer & Probe Mixture”和突变株检测用的“E484K Mutant Type Primer & Probe Mixture”两种试剂进行检测。

比较两个Ct值,若突变株检测用“E484K Mutant Type Primer & Probe Mixture”的Ct值小,则可判断病毒为E484K突变株。

突变株的检测应用数据

本试剂盒已经检出以下3种新冠病毒(SARS-CoV-2)株。

● Gamma株(P.1)突变株(TY7-501、E484K突变N501Y突变,由日本国立感染症研究所提供)

● Beta株(B.1.351)突变株(TY8-612、E484K突变、N501Y突变,由日本国立感染症研究所提供)

● Alpha株(B.1.1.7)突变株(QHN001、E484K无突变N501Y突变,由日本国立感染症研究所提供)

● VR-1986HK(E484K无突变N501Y突变ATCC)

样品拷贝份数:5000、500、50 copies/Well

循环数:45

 


 gamma(P.1)株:TY7-501(E484K突变、N501Y突变)

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

5000 copies

500 copies

50 copies

Gamma株

(含有E484K突变)

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

对于含有E484K突变的gamma株(P.1)突变株,使用突变株检测用的“E484K Mutant type Primer & Probe”,可以确认到扩增信号

常规株(非突变)检测用的“484E Wild type Primer & Probe”,在5000 copies的条件下可以观察到扩增信号,但可以在更低Ct值下检测到突变株,由此判断为E484K突变株。在500 copies和50 copies的条件下,未能检测到常规(非突变)的扩增信号。



 Beta株(B.1.351):TY8-612(E484K突变、N501Y突变)

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

5000 copies

500 copies

50 copies

Beta株

(含有E494K突变)

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SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

对于含有E484K突变的beta株(B.1351)突变株,使用突变株检测用的“E484K Mutant type Primer/Probe”,可以确认到扩增信号

常规株(非突变)检测用的“484E Wild type Primer/Probe”,在5000 copies的条件下可观察到轻微的扩增信号,但可以在更低的Ct值下检测到突变株,由此判断为E484K突变株。在500 copies和50 copies的条件下,未能检测到常规(非突变)的扩增信号。



 Alpha株(B.1.1.7):QHN001(E484K无突变N501Y突变)

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

5000 copies

500 copies

50 copies

alpha株

(含有E484K突变)

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SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

对于不含E484K突变的alpha株(B.1.1.7)突变株,利用常规(非突变)检测用的“484E Wild type Primer&Probe”,可以确认到扩增信号

突变株检测用的“E484K Mutant type Primer&Probe”,在5000copies的条件下可观察到扩增信号,但可以在更低的Ct值下检测到常规(非突变),由此判断为常规株的突变株。在500 copies和50 copies的条件下,未能检测到突变株的扩增信号。

 


④ VR-1986HKE484K无突变N501Y无突变)

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

5000 copies

500 copies

50 copies

无突变

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

对于不含N501Y突变和E484K突变的VR-1986HK,利用常规(非突变)检测用的“484E Wild type Primer&Probe”,可以确认到扩增信号

关于突变株检测用的“E484K Mutant type Primer&Probe”,在5000 copies的条件下可观察到扩增信号,但可以在更低的Ct值下检测到常规(非突变),由此判断为常规株的突变株。在500 copies和50 copies的条件下,未能检测到突变株的扩增信号。

PCR反应条件

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

◆常规株以及突变株的基因型

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit                              SARS-CoV-2 E484K 突变检测试剂盒

FAQ

Q:能否判定新冠病毒阳性/阴性?

A:本试剂盒检测阳性样品中是否存在基因突变,无法判定阳性/阴性。

Q:能否检测用直接PCR法简单提取的RNA样品?

A本试剂盒无法检测简单提取的RNA。请使用RNA提取/纯化试剂盒等生成的RNA。

      离心柱:ISOSPIN Viral RNA(产品编号: 310-08931, 日本基因)

      自动核酸提取仪:QuickGene-Auto 12S/24S(倉敷紡績,还需要QuickGene AutoS RNA Virus Kit)

Q:试剂盒包装“200 Reactions”是什么意思?

A:【200 Reactions】是指实时PCR可以分开200孔进行。1个样品需要2个孔,即100个样品。

 ①    含有常规株的Primer&Probe的孔

 ②    含有突变株的Primer&Probe的孔

Q:试剂盒中是否包含病毒的阳性对照RNA?

A:本试剂盒不含阳性对照。若有需要,请向FUJIFILM Wako客服咨询。

Q:当野生株和突变株的扩增曲线均起峰时,应如何判断?

A如果病毒量高,无论是突变株样品,还是野生株,都有可能在其Primer&Probe中观察到扩增信号。然而,在此情况下,突变株的扩增信号上升

      得更快(Ct值小)。请务必通过突变株和常规株用的两种Primer&Probe进行检测,以确定 Ct 值的差异。

Q:是否存在E484K单独突变?

A不含N501Y突变、但含E484K突变的E484K单独突变株,已被确认为R.1株。但目前的信息较少,日本国立传染病研究所认为它是需要关注的突

      株(VOI),而不是高关注突变株(VOC)。

参考文献

1.

Nelson, G., Buzko, O., Spilman, P., Niazi, K., Rabizadeh, S., Soon-Shiong, P. : bioRxiv (2021). doi:https://doi.org/10.1101/2021.01.13.426558

2.

 Jangra, S., Ye, C., Rathnasinghe, R., Stadlbauer, D., PVI study group, Krammer,F., Simon, V., Martinez-Sobrido, L., García-Sastre, A., Schotsaert, M. : medRxiv (2021). doi:https://doi.org/10.1101/2021.01.26.21250543

3.

Wang, Z. et al. : Nature (2021). doi:10.1038/s41586-021-03324-6

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
287-35603 SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit 
SARS-CoV-2 E484K突变检测试剂盒
20 Reactions
281-35601 SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit 
SARS-CoV-2 E484K突变检测试剂盒
200 Reactions

anti-Akt (E17K Mutant) (human), Rabbit Monoclonal (RM336) (Biotin) 抗Akt (E17K Mutant) (人), 兔单抗 (RM336) (生物素标记) 品牌:RevMab


anti-Akt (E17K Mutant) (human), Rabbit Monoclonal (RM336) (Biotin)

抗Akt (E17K Mutant) (人), 兔单抗 (RM336) (生物素标记)

品牌:RevMab
CAS No.:
储存条件:-20°C
纯度:Protein A purified.
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

REV-31-1222-02-C050

50 µg 6,240.00


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anti-Akt (E17K Mutant) (human), Rabbit Monoclonal (RM336) 抗Akt (E17K 突变) (人), 兔单克隆抗体 (RM336) 品牌:RevMab


anti-Akt (E17K Mutant) (human), Rabbit Monoclonal (RM336)

抗Akt (E17K 突变) (人), 兔单克隆抗体 (RM336)

品牌:RevMab
CAS No.:
储存条件:-20°C
纯度:Protein A purified.
产品编号

(生产商编号)

等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

REV-31-1222-00-C050

50 µg 6,240.00


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