DNs-Rh ＜Cell-based GST Activity Assay Reagent＞
可用于活细胞的GST活性检测探针
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
DNs-Rh ＜Cell-based GST Activity Assay Reagent＞
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DNs-Rh ＜Cell-based GST Activity Assay Reagent＞ 可用于活细胞的GST活性检测探针
DNs-Rh ＜Cell-based GST Activity Assay Reagent＞
可用于活细胞的GST活性检测探针
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可用于活细胞的GST活性检测探针
DNs-Rh ＜Cell-based GST Activity Assay Reagent＞
DNs-Rh是可以在活细胞中观察Glutathione S-transferase（GST）酶活性的荧光探针。由于可以根据GST活性发出绿色荧光，可用于评价细胞内GST的活性。GST亚家族跨度广泛，可以实现总GST活性的可视化。
※本产品基于名古屋大学 理学研究科 阿部洋教授的研究成果商品化。
※本产品仅供科研，严禁用于科研以外用途。
DNs-Rh具有细胞膜透过性，随着细胞内GST酶活性改变而产生绿色荧光。通过显微镜或流式细胞仪定量荧光强度，从而实现GST活性的相对定量。
◆GST及其活性检测方法
Gluthathione S-Transferase（GST）家族广泛存在于细菌及动植物中，细胞内的疏水性外源物质（xenobiotics）被添加到gluthathione（GSH）中，具有转换为GSH缀合物（GSH-conjugate）的活性。GSH缀合物通过MRP（multidrug resistance-associated protein）运输积极地排出细胞外，存在去除异物的机制。因此，GST可以作为排出具有潜在细胞毒性的外源性物质的解毒因子而发挥作用。
另一方面，由于大多数的抗癌剂等医药品也是通过GST转换为GSH缀合物排出细胞外，GST作为耐药因子具有削弱药效的负面效果。尤其是随着癌症的恶化特定的GST同种型（GSTP1）的表达量增强，癌细胞获得了强耐药性。
GST既是异物代谢和解毒作用因子，也具有耐药性因子的作用。因此，需要合适的检测细胞内GST活性的技术，但传统方法仅限于in vitro 的活性检测，缺少在活细胞内观察活性的方法。
名古屋大学阿部洋教授及其研究人员们开发的DNs-Rh是细胞膜透过性的化合物，是一种可以根据GST酶活性产生绿色荧光的GST活性应答探针。因为可以用于活细胞，进行各类细胞的GST活性的定量化和刺激依赖性的GST活性的监测，可以用于传统方法无法实现的基于细胞水平的抑制剂的开发等的各种应用。
GST作用示意图
GST活性检测用探针的比较
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探针名称 |
传统方法（CDNB） |
DNs-Rh |
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检测方法 |
UV（~340 nm） |
绿色荧光（Ex / Em = 496 / 520 nm） |
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检测对象 |
广泛的GST家族 |
广泛的GST家族 |
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适用实验 |
in vitro（如裂解液或纯化酶） |
可以 |
可以 |
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活细胞实验 |
成像 |
不可以 |
可以 |
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流式细胞术 |
不可以 |
可以 |
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检测灵敏度 |
低（UV测定） |
高（荧光测定） |
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高通量和简便性 |
低（需要配制裂解液） |
高（活细胞状态下观察） |
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非特异性反应（GST非依赖的GSH反应性） |
高 |
低 |
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与其他的因子同时检测 |
不可以 |
可以（可以和蓝色和红色荧光同时使用） |
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◆详细原理
DNs-Rh是在Rhodamine110上添加2个GST基质2,4- dinitrobenzene sulfonamide（DNB）的化合物，呈消光状态。DNB基质通过GST转换为GSH缀合体，Rhodamine 110释放出来并发出绿色荧光（激发／荧光 = 496 / 520 nm）。DNs-Rh最初开发作为检测体内硫醇的试剂1），但后来却被发现其也能高效用作GST活性的检测试剂2）。与硫醇应答相比，GST应答性更强，现在我们期待DNs-Rh能成为活细胞用的GST活性检测探针4）。
原理示意图
◆参考文献
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1. |
Shibata, A.,et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 18, 2246-2249 (2008) [PMID:18358719] "Rhodamine-based fluorogenic probe for imaging biological thiol." |
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2. |
Alander, J., et al., Anal. Biochem., 390, 52-56 (2009) [PMID:19348782] "Characterization of a new fluorogenic substrate for microsomal glutathione transferase 1." |
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3. |
Zhang, J.,et al., J. Am. Chem. Soc., 133, 14109-14119 (2011) [PMID:21786801] "Synthesis and characterization of a series of highly fluorogenic substrates for glutathione transferases, a general stategy." |
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4. |
Shishido, Y., et al.,ChemBioChem., (in press) "A covalent inhibitor for Glutathione S-Transferase Pi (GSTP1-1) in human cells." |
◆特点
● 根据GST活性释放rhodamine110产生绿色荧光（激发/荧光=496/520 nm）。
● 具有细胞膜通透性，只需添加至培养基即可使用。
● 已确认与各种GST家族具有交叉反应性
◆应用实例
荧光光谱（反应前后）
向GSTP1重组体（10 μg/mL）中添加DNs-Rh（1 μM）、GSH（1 mM）30分钟后，测定激发光为490 nm时的荧光光谱。仅在GSH / GSTP1存在时观察到了Emmax 520 nm附近的荧光。
荧光光谱
GST in vitro活性检测
向GSTP1重组体（10 μg/mL）中添加DNs-Rh（1 μM）、GSH（1 mM）观察绿色荧光强度（Ex / Em 490 / 520 nm）随时间的变化，纵轴将1 μM Rhodamine 110溶液的荧光强度设为100%。GST存在时，可以发现（GSH（＋）/ GST（＋））在约30分钟左右的时候荧光强度明显增强，约55%的探针转换成Rhodamine，相对的，在GSH（＋）/ GST（ｰ）的条件下，可以观察到GSH稍微有所增加，但是Rhodamine的转换率只有3%。
※ 正如原理所述，DNs-Rh与硫醇化合物反应甚微。与GST存在时相比反应明显较弱，但是也有可能经过几个小时的长时间反应使荧光强度增强，因此建议在反应30~60分
※ 钟左右后即刻进行观察。
活细胞荧光测定
培养细胞中的GST活性测定
向HeLa细胞中添加2.5 μM的DNs-Rh，孵育30分钟后用荧光显微镜（Ex 480 / Em 535 nm）进行观察。添加1 mM的不可逆性抑制物质CNBSF（#FDV-0031）作为前处理，反应15分钟。通过DNs-Rh 从细胞内观察到 Rhodamine 110 的绿色荧光，但是用抑制物质 CNBSF 进行前处理时，荧光强度明显减弱。
※ 成像注意：本试剂是通过观察GST释放出来的rhodamine 110在细胞内的分布，虽然可以基于荧光强度观察GST的相对活性强度，但不能实现细胞内GST定位的可视化。
培养细胞荧光成像
流式细胞术定量GST活性
左：向K562细胞中添加2.5 μM的DNs-Rh，5、60、180分钟后用流式细胞仪检测（Ex / Em = 488 / 525 nm）。
左：可以观察到荧光强度随时间变化增强。
右：向K562细胞和HL60细胞中添加2.5 μM的DNs-Rh，60分钟后用流式细胞仪检测（Ex / Em = 488 / 525 nm）。
右：与K562细胞相比，每个HL60细胞都显示出更高的GST活性。
流式细胞仪检测
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
◆相关产品
可用于活细胞的不可逆GST抑制剂
CNBSF ＜Irreversible GST Inhibitor＞
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| FDV-0030 | DNs-Rh ＜Cell-based GST Activity Assay Reagent＞ | 0.1 μmol |
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AcroleinRED, Cell-based Acrolein Detection Reagent 品牌：Funakoshi
AcroleinRED, Cell-based Acrolein Detection Reagent
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品牌：Funakoshi
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
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FDV-0022 |
– | 0.5 mg | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
DNs-Rh, Cell-based GST Activity Assay Reagent 品牌：Funakoshi
DNs-Rh, Cell-based GST Activity Assay Reagent
|
品牌：Funakoshi
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
FDV-0030 |
– | 0.1 μmol | – | 咨询 | – | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
cellnest人Ⅰ型重组胶原蛋白肽 cellnest, recombinant peptide based on human collagen type
cellnest人Ⅰ型重组胶原蛋白肽
cellnest, recombinant peptide based on human collagen type
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
cellnest人Ⅰ型重组胶原蛋白肽
培养基材料
可用作细胞培养的基础材料的人I型重组胶原蛋白肽，现已开售。本品不含动物源物质（无异物），可实现与动物性胶原相同或以上的细胞贴壁性。
用于再生医疗研究领域。
◆特点
● 不含动物由来物质（无异物）・・・通过酵母生产，实现高安全性
● 与动物胶原具有同等或以上的细胞贴壁性 ・・・具有细胞贴壁性同样的RDG序列的复合构造
● 活体分解吸收性・・・在活体内易分解吸收，适用于医疗研究材料
● 分子量均一・・・可加工成各种形态
● 低内毒素(10 EU/g以下)
结构
从人I型重组胶原蛋白肽α1链中将含有高细胞贴壁性的RGD序列部分切出4种类型片段，片段连接后，3个相同片段连接成结合物形成本产品 。由于本品不含抗原部分，所以保持很高的细胞贴壁性。
易加工型
本品的分子量51 kDa，分子量均一，操作简单。
可加工为海绵、颗粒、多孔质粒子等形态。
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产品质量稳定
本品是通过酵母生产的重组体，批次间品质差异小，可稳定供给。
◆使用案例
培养实例细胞
内皮细胞（HUVEC），角质化细胞（NHEK），成肌细胞（C2C12），嗜铬细胞瘤（PC12），成骨细胞系（MC3T3-L1），成纤维细胞系（MC3T3-E1），上皮细胞系（CHO-K1, Vero, MDCK），肾细胞（CV-1）
在涂层了本品的培养皿上培养的HUVEC（人脐静脉血管内皮细胞），贴壁和伸展形态良好。
注：本产品已停产，需要其他细胞外基质可点击：
颗粒型细胞支架cellnest μ-piece
凝胶包埋及薄层包被用胶原Cellmatrix
3D培养全合成温敏性水凝胶Mebil Gel
各种细胞系的细胞涂层方法
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1. 3T3L1 |
2. BHK-21 |
3. C2C12 |
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4. CHO-K1 |
5. CV-1 |
6. hMSC |
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7. HUVEC |
8. MC3T3E1 |
9. MDCK |
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10. NHEK |
11. Vero |
欲了解各种细胞系的细胞涂层方法，请点击相关文字。
参考文献
［1］Kentaro Nakamura, Yasuhiko Tabata.A new fluorescent imaging of renal inflammation with RCP.Journal of Controlled Release, Volume 148, Issue 3, Pages 351-358
［2］Kentaro Nakamura, Reiko Iwazawa & Yasuhiro Yoshioka.Introduction to a new cell transplantation platform via recombinant peptide petaloid pieces and its application toislet transplantation with mesenchymal stem cells.Transplant International, Volume 29, Issue 9, September 2016, Pages 1039-1050
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 635-30081 | cellnest人Ⅰ型重组胶原蛋白肽 0.1%溶液 cellnest, recombinant peptide based on human collagen type I 0.1% solution |
20 mL | － | － |
| 638-30071 | cellnest人Ⅰ型重组胶原蛋白肽冷冻干燥体 cellnest, recombinant peptide based on human collagen type I Lyophilized |
100 mg | － | － |
螺旋聚喹喔啉类手性磷化氢 Polyquinoxaline-based Helically Chiral Phosphine
螺旋聚喹喔啉类手性磷化氢
Polyquinoxaline-based Helically Chiral Phosphine
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
螺旋聚喹喔啉类手性磷化氢（(P)-(R)-PQXphos）
本产品是有手性的高分子主链的、可循环利用的高对映选择性手性配体。由于主链有螺旋手性，在进行聚苯乙烯的不对称碳化硅烷化或不对称铃木-宫浦偶联反应等的 不对称催化反应时有很高的对映选择性。根据溶剂的不同发生螺旋手性转换，可以进行对映选择性的手性转换。
◆特点
由于在高分子的主链中有螺旋手性，有高对映选择性并且可以循环利用。
由于可以根据溶剂的不同发生螺旋手性转换，所以可以从一个配体中分出两个对映异构体。
可以进行聚苯乙烯的不对称碳化硅烷化、不对称铃木-宫浦偶联反应等。
◆聚喹喔啉螺旋高分子配体
由于高分子主链上有螺旋手性，聚合物类配体中也有可能有高手性选择性和可以循环利用。
◆根据选择的溶剂进行螺旋手性转换
由于可以根据溶剂的不同发生螺旋手性转换，所以可以从一个配体中分出两个对映异构体。
◆聚苯乙烯的不对称碳化硅烷化
◆不对称铃木-宫浦偶联反应
参考文献
［1］Yamamoto, T. and Suginome. M.: Angew. Chem. Int. Ed., 48, 539 (2009).
［2］Yamamoto, T. Yamada, T., Nagata, Y. and Suginome, M.: J. Am. Chem. Soc., 132, 7899 (2010).
［3］Yamamoto, T., Akai, Y., Nagata, Y. and Suginome, M.: Angew. Chem. Int. Ed., 50, 8844 (2011).
［4］Suginome, M., Yamamoto, T., Nagata, Y., Yamada, T. and Akai. Y.: Pure Appl. Chem., 84, 1759 (2012).
［5］Akai, Y., Yamamoto, T., Nagata, Y., Ohmura, T. and Suginome, M.: J. Am. Chem. Soc., 134, 11092 (2012).
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 161-26621 | Polyquinoxaline-based Helically Chiral Phosphine 螺旋聚喹喔啉类手性磷化氢 |
100 mg | for Organic Synthesis | – |
cellnest, recombinant peptide based on human collagen type I 0.1% solution cellnest，人I型胶原样重组肽0.1％溶液 品牌：Fuji Film Co., Ltd.
cellnest, recombinant peptide based on human collagen type I 0.1% solution
cellnest，人I型胶原样重组肽0.1％溶液
|
品牌：Fuji Film Co., Ltd.
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
635-30081 |
– | 20 ml | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。
cellnest, recombinant peptide based on human collagen type I Lyophilized cellnest，人类I型胶原样重组肽冻干 品牌：Fuji Film Co., Ltd.
cellnest, recombinant peptide based on human collagen type I Lyophilized
cellnest，人类I型胶原样重组肽冻干
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品牌：Fuji Film Co., Ltd.
CAS No.： 储存条件：2-10℃ 纯度：– |
| 产品编号
(生产商编号) |
等级 | 规格 | 运输包装 | 零售价(RMB) | 库存情况 | 参考值 |
|
638-30071 |
– | 100 mg | – |
|
– | – |
* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用
* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。